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1. (WO2014029894) MÉTHODE DE SÉPARATION DE POLYPEPTIDES ÉTIQUETÉS
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2014/029894    N° de la demande internationale :    PCT/ES2012/000228
Date de publication : 27.02.2014 Date de dépôt international : 20.08.2012
CIB :
C07K 1/14 (2006.01)
Déposants : BIOMEDAL, S.L. [ES/ES]; Avda. Américo Vespucio Bloque 5.4, Planta Primera Módulo 12 C.P. 41092 Sevilla (ES) (Tous Sauf US).
CEBOLLA RAMÍREZ, Ángel [ES/ES]; (ES).
ARÉVALO RODRIGUEZ, Miguel [ES/ES]; (ES).
VELASCO UMPIERREZ, Isabel [ES/ES]; (ES)
Inventeurs : CEBOLLA RAMÍREZ, Ángel; (ES).
ARÉVALO RODRIGUEZ, Miguel; (ES).
VELASCO UMPIERREZ, Isabel; (ES)
Mandataire : CEBOLLA RAMÍREZ, Ángel; Avda. Américo Vespucio Bloque 5.4, Planta Primera Módulo 12 C.P. 41092 Sevilla (ES)
Données relatives à la priorité :
Titre (EN) METHOD FOR SEPARATING TAGGED POLYPEPTIDES
(ES) MÉTODO DE SEPARACIÓN DE POLIPÉPTIDOS ETIQUETADOS
(FR) MÉTHODE DE SÉPARATION DE POLYPEPTIDES ÉTIQUETÉS
Abrégé : front page image
(EN)The present invention relates to a method for separating polypeptides or proteins tagged with histidine glues from a mixture of proteins (for example, a cell extract), by means of a system of two aqueous phases in which one of the components is PEG, and in which the protein tagged with polyhistidine is preferably distributed in the PEG-rich phase under specific conditions. The purification process can include one or more washing steps and is completed with an inversion in the distribution of the tagged polypeptide or protein, induced by a change in the pH or by the addition of choline, which leads to the recovery of said peptide in the opposite phase. The described method is simple, economically efficient, scalable and does not require heavy-metal ions; said method is therefore suitable for use in the industrial sector.
(ES)La presente invención se refiere a un procedimiento para la separación de polipéptidos o proteínas etiquetadas con colas de histidinas a partir de una mezcla de proteínas (por ejemplo, un extracto celular), mediante un sistema de dos fases acuosas en el que uno de los componentes es PEG, y en el cual la proteína etiquetada con polihistidina se reparte preferentemente en la fase rica en PEG en condiciones determinadas. El proceso de purificación puede incluir uno o más pasos de lavado y se completa con una inversión en el reparto del polipéptido o proteína etiquetado, inducida por un cambio en el pH o por la adición de colina, lo que da como resultado la recuperación de dicho péptido en la fase opuesta. El procedimiento descrito es simple, económicamente eficiente, no necesita iones de metales pesados y es escalable, y por ello resulta apropiado para su empleo en el sector industrial.
(FR)La présente invention concerne un procédé pour la séparation de polypeptides ou de protéines étiqueté(e)s avec des queues d'histidines à partir d'un mélange de protéines (par exemple, un extrait cellulaire), au moyen d'un système à deux phases aqueuses dont l'un des composants est le PEG, la protéine étiquetée avec de la polyhistidine étant distribuée de préférence dans la phase riche en PEG dans des conditions déterminées. Le procédé de purification peut comprendre une ou plusieurs étapes de lavage et se termine par une inversion dans la distribution du polypeptide ou de la protéine étiqueté(e), induite par un changement de pH ou par l'addition de choline, ce qui implique la récupération dudit peptide dans la phase opposée. Le procédé décrit est simple et économique. En outre, il ne requiert pas d'ions de métaux lourds et est extensible. Il peut donc trouver une application dans le secteur industriel.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : espagnol (ES)
Langue de dépôt : espagnol (ES)