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1. (WO2014020124) MOYENS ET PROCÉDÉS POUR LA DÉTECTION D'UNE MÉTHYLATION DE L'ADN
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2014/020124    N° de la demande internationale :    PCT/EP2013/066221
Date de publication : 06.02.2014 Date de dépôt international : 01.08.2013
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : UNIVERSITAET KONSTANZ [DE/DE]; Universitaetsstrasse 10 78464 Konstanz (DE)
Inventeurs : MARX, Andreas; (DE).
DRUM, Matthias; (DE).
STREICHERT, Katharina; (DE).
MAYER, Jutta; (DE).
KRANASTER, Ramon; (DE).
WIELAND, Markus; (DE)
Mandataire : KOCH, Andreas; Schiweck Weinzierl Koch European Patent Attorneys Landsberger Str. 98 80339 Munich (DE)
Données relatives à la priorité :
PCT/EP2012/003279 01.08.2012 EP
Titre (EN) MEANS AND METHODS FOR THE DETECTION OF DNA METHYLATION
(FR) MOYENS ET PROCÉDÉS POUR LA DÉTECTION D'UNE MÉTHYLATION DE L'ADN
Abrégé : front page image
(EN)The present invention relates to the means and methods for the detection of the methylation status of cytosine residues and in particular to the use of at least one primer which is at least 5 nucleotides in length, and which hybridizes to a target sequence that comprises at least one defined 5'-CpG-3' which target sequence is comprised in a genomic DNA of a vertebrate, and which has its 3'end opposite to the C of said 5'-CpG-3', and which comprises at said 3'end a mismatched nucleotide in relation to said C of said 5'-CpG- 3', for determining the methylation status of a vertebrate genomic nucleic acid at said C. Said mismatched base at the 3'-end of the primer does not sufficiently pair with the cytosine of interest, in case said cytosine is not methylated or hydroxymethylated, thus impairing for example a DNA polymerase reaction with said primer using said DNA molecule as template. However, said mismatched base at the 3'-end of the primer pairs sufficiently with the cytosine of interest, in case said cytosine is methylated or hydroxymethylated, thus allowing a DNA polymerase reaction with said primer using said DNA molecule as template. The present invention further relates to polymerase proteins that can be used in the embodiments of the present invention. The present invention also relates to a kit comprising at least one primer of the invention and optionally means to conduct the amplification.
(FR)La présente invention concerne des moyens et des procédés pour la détection de l'état de méthylation de résidus cytosine et notamment l'utilisation d'au moins une amorce qui est d'une longueur d'au moins 5 nucléotides, et qui s'hybride avec une séquence cible qui comprend au moins un 5'-CpG-3' défini, ladite séquence cible étant comprise dans un ADN génomique d'un vertébré, et dont l'extrémité 3' est opposée au C dudit 5'-CpG-3', et qui comprend au niveau de ladite extrémité 3' un nucléotide non correspondant par rapport audit C dudit 5'-CpG- 3', pour la détermination de l'état de méthylation d'un acide nucléique génomique d'un vertébré au niveau dudit C. La base non correspondante située à l'extrémité 3' de l'amorce ne s'apparie pas à ladite cytosine dans le cas où la cytosine n'est pas méthylée ou hydroxyméthylée, ce qui empêche une réaction impliquant l'ADN polymérase avec ladite amorce, à l'aide de ladite molécule d'ADN qui sert de modèle. Cependant, la base non correspondante située à l'extrémité 3' de l'amorce s'apparie à ladite cytosine dans le cas où la cytosine est méthylée ou hydroxyméthylée, ce qui permet une réaction impliquant l'ADN polymérase avec ladite amorce, à l'aide de ladite molécule d'ADN qui sert de modèle.La présente invention concerne également des protéines polymérases qui peuvent être utilisées dans les modes de réalisation de la présente invention. La présente invention concerne également un kit comprenant au moins une amorce de l'invention et éventuellement des moyens de réalisation de l'amplification.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)