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1. (WO2013065314) PROCÉDÉ DE DOSAGE FLUORO-IMMUNOLOGIQUE FAISANT APPEL À UN COMPLEXE POLYPEPTIDIQUE CONTENANT UNE RÉGION VARIABLE D'ANTICORPS FLUOROMARQUÉE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2013/065314    N° de la demande internationale :    PCT/JP2012/007025
Date de publication : 10.05.2013 Date de dépôt international : 01.11.2012
CIB :
G01N 33/533 (2006.01), G01N 21/64 (2006.01), G01N 21/78 (2006.01), G01N 33/542 (2006.01)
Déposants : USHIO DENKI KABUSHIKI KAISHA [JP/JP]; 2-6-1, Ote-machi, Chiyoda-ku, Tokyo 1008150 (JP)
Inventeurs : UEDA, Hiroshi; (JP).
ABE, Ryoji; (JP).
TAKAGI, Hiroaki; (JP)
Mandataire : HIRAKI, Yusuke; Atago Green Hills MORI Tower 32F, 5-1, Atago 2-chome, Minato-ku, Tokyo 1056232 (JP)
Données relatives à la priorité :
2011-241402 02.11.2011 JP
Titre (EN) FLUOROIMMUNOASSAY METHOD USING POLYPEPTIDE COMPLEX CONTAINING FLUOROLABELED ANTIBODY-VARIABLE REGION
(FR) PROCÉDÉ DE DOSAGE FLUORO-IMMUNOLOGIQUE FAISANT APPEL À UN COMPLEXE POLYPEPTIDIQUE CONTENANT UNE RÉGION VARIABLE D'ANTICORPS FLUOROMARQUÉE
(JA) 蛍光標識抗体可変領域含有ポリペプチド複合体を用いた蛍光免疫測定方法
Abrégé : front page image
(EN)This invention addresses the problem of providing an immunoassay method that does not require a solid-phase immobilization step or a washing step, makes it possible to quantitatively measure the target substance in liquid phase in a speedy and simple manner, makes it possible to visualize antigens, and has high detection sensitivity. This problem is resolved by: sequentially performing (a) a step for bringing, in liquid phase, into contact with antigens in the measurement sample a complex comprising a polypeptide containing an antibody heavy-chain variable region and a polypeptide containing an antibody light-chain variable region, in which the polypeptide containing an antibody heavy-chain variable region and/or the polypeptide containing an antibody light-chain variable region is labeled by a fluorochrome, (b) a step for detecting the fluorescence of the fluorochrome or measuring the fluorescence intensity, and (c) a step for calculating the amount of antigens contained in the test subject or visualizing the antigens using, as an indicator, the fact that the antigen concentration and the fluorescence intensity of the fluorochrome are positively correlated; and measuring the concentration of the target antigen present in the tested substance.
(FR)L'objectif de cette invention est de pourvoir à un procédé de dosage immunologique qui ne nécessite pas d'étape d'immobilisation sur phase solide ou d'étape de lavage, permet de mesurer quantitativement la substance cible en phase liquide d'une manière rapide et simple, permet de visualiser les antigènes, et ayant une sensibilité de détection élevée. Pour ce faire, le procédé selon l'invention consiste à : mettre séquentiellement en œuvre (a) une étape de mise en contact, en phase liquide, des antigènes dans l'échantillon à doser avec un complexe comprenant un polypeptide contenant une région variable de chaîne lourde d'anticorps et un polypeptide contenant une région variable de chaîne légère d'anticorps, le polypeptide contenant la région variable de chaîne lourde d'anticorps et/ou le polypeptide contenant la région variable de chaîne légère d'anticorps étant marqué par un fluorochrome, (b) une étape de détection de fluorescence du fluorochrome ou de mesure de l'intensité de la fluorescence, et (c) une étape de calcul des quantités d'antigènes contenues dans la substance à doser ou de visualisation des antigènes faisant appel, à titre d'indicateur, au fait que la concentration d'antigènes et l'intensité de fluorescence du fluorochrome sont positivement corrélées; et à mesurer la concentration d'antigène cible présente dans la substance à doser.
(JA) 固相化工程と洗浄工程とを必要としない、液相において迅速かつ簡便に目的の物質の定量的な測定を可能とし、かつ、抗原を可視化することが可能で、検出感度の高い免疫測定法を提供することを課題とした。かかる課題を、(a)液相中で、抗体軽鎖可変領域を含むポリペプチドと抗体重鎖可変領域を含むポリペプチドのいずれか一方又は両方が蛍光色素により標識された、前記抗体軽鎖可変領域を含むポリペプチドと抗体重鎖可変領域を含むポリペプチドからなる複合体を、測定用試料中の抗原に接触させる工程;(b)前記蛍光色素の蛍光を検出、又は蛍光強度を測定する工程;(c)抗原濃度と前記蛍光色素の蛍光強度とが、正の相関関係にあることを指標として、検体に含まれる抗原量を算出、又は抗原を可視化する工程;を順次行い、被検物質中に存在する目的とする抗原の濃度を測定することにより解決した。
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : japonais (JA)
Langue de dépôt : japonais (JA)