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1. (WO2013059746) COMPOSITIONS ET PROCÉDÉS POUR L'AMPLIFICATION ET LE SÉQUENÇAGE DIRECTIONNELS D'ACIDE NUCLÉIQUE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication : WO/2013/059746 N° de la demande internationale : PCT/US2012/061218
Date de publication : 25.04.2013 Date de dépôt international : 19.10.2012
CIB :
C40B 50/06 (2006.01)
Déposants : ARMOUR, Chris[US/US]; US (US)
NUGEN TECHNOLOGIES, INC.[US/US]; 821 Industrial Road San Carlos, CA 95050, US (AllExceptUS)
Inventeurs : ARMOUR, Chris; US
Mandataire : SKUBATCH, Maya; Wilson Sonsini Goodrich & Rosati 650 Page Mill Road Palo Alto, CA 94304-1050, US
Données relatives à la priorité :
61/549,16219.10.2011US
Titre (EN) COMPOSITIONS AND METHODS FOR DIRECTIONAL NUCLEIC ACID AMPLIFICATION AND SEQUENCING
(FR) COMPOSITIONS ET PROCÉDÉS POUR L'AMPLIFICATION ET LE SÉQUENÇAGE DIRECTIONNELS D'ACIDE NUCLÉIQUE
Abrégé : front page image
(EN) The invention provides methods and compositions for directional nucleic acid amplification and sequencing. The invention further provides methods and compositions for the construction of directional eDNA libraries. The method may comprise: a) reverse transcribing a RNA sample to generate a first strand eDNA; b) generating a second strand eDNA from the rrrst strand eDNA, wherein at least one of the four dNTPs dATP, dCTP, dGTP or dTTP is replaced by a modified dNTP during second strand synthesis and incorporated into the second strand, thereby generating a double-stranded eDNA; c) performing end repair on the double-stranded eDNA; d) Iigating adaptors to the double-stranded eDIMA, wherein only one of the adaptors has the modified dNTP incorporated into a ligation strand of the adaptor; e) performing gap repair; and f) selectively cleaving the second strand and the ligation strand of the adaptor that has the modified dNTP by a suitable cleavage agent.
(FR) L'invention concerne des procédés et des compositions pour l'amplification et le séquençage directionnels d'acide nucléique. L'invention concerne en outre des procédés et des compositions pour la construction de banques d'ADNe directionnel. Le procédé peut comprendre : a) la transcription inverse d'un échantillon d'ARN pour générer un premier brin d'eADN ; et b) la génération d'un second brin d'eADN à partir du premier brin d'eADN, où au moins un des quatre dNTP, dATP, dCTP, dGTP ou dTTP est remplacé par un dNTP modifié au cours d'une synthèse d'un second brin et incorporé dans le second brin, générant ainsi un eADN à double brin ; c) la mise en œuvre d'une réparation d'extrémité sur l'eADN à double brin ; d) la ligature d'adaptateurs à l'eADN à double brin, où uniquement un des adaptateurs a le dNTP modifié incorporé dans un brin de ligature de l'adaptateur ; e) la mise en œuvre d'une réparation d'espacement ; et f) le clivage sélectif du second brin et du brin de ligature de l'adaptateur qui présente le dNTP modifié par un agent de clivage approprié.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)