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Paramétrages

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1. WO2012007569 - PROCÉDÉ DE PURIFICATION D'UN ACIDE NUCLÉIQUE CIBLE

Numéro de publication WO/2012/007569
Date de publication 19.01.2012
N° de la demande internationale PCT/EP2011/062124
Date du dépôt international 15.07.2011
CIB
C12N 15/10 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
10Procédés pour l'isolement, la préparation ou la purification d'ADN ou d'ARN
C07H 1/08 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
07CHIMIE ORGANIQUE
HSUCRES; LEURS DÉRIVÉS; NUCLÉOSIDES; NUCLÉOTIDES; ACIDES NUCLÉIQUES
1Procédés de préparation des dérivés du sucre
06Séparation; Purification
08à partir de produits naturels
CPC
C07H 1/08
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
HSUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
1Processes for the preparation of sugar derivatives
06Separation; Purification
08from natural products
C12N 15/1003
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
1003Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
C12N 15/1006
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
10Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
1003Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
1006by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
Déposants
  • QIAGEN GmbH [DE/DE]; Qiagen Str. 1 40724 Hilden, DE (AllExceptUS)
  • VOSS, Thorsten [DE/DE]; DE (UsOnly)
  • WYRICH, Ralf [DE/DE]; DE (UsOnly)
Inventeurs
  • VOSS, Thorsten; DE
  • WYRICH, Ralf; DE
Données relatives à la priorité
10007346.915.07.2010EP
Langue de publication anglais (EN)
Langue de dépôt anglais (EN)
États désignés
Titre
(EN) METHOD FOR PURIFYING A TARGET NUCLEIC ACID
(FR) PROCÉDÉ DE PURIFICATION D'UN ACIDE NUCLÉIQUE CIBLE
Abrégé
(EN)
The present invention pertains to method for purifying at least a target nucleic acid from a sample, said method comprising at least the following steps: a) incubating the sample with at least one protein-degrading compound; b) binding the target nucleic acid to a solid phase; c) eluting the target nucleic acid from the solid phase; d) incubating the eluted target nucleic acid with at least one protein-degrading compound; e) binding the target nucleic acid again to a solid phase; f) optionally eluting the bound target nucleic acid from the solid phase. It was surprisingly found that performing a second protein digestion step after the target nucleic acid was bound and eluted from a solid phase before the nucleic acids are rebound to a solid phase is very efficient in reducing remaining protein contaminations in the isolated nucleic acid.
(FR)
La présente invention concerne un procédé de purification d'au moins un acide nucléique cible à partir d'un échantillon, ledit procédé comprenant au moins les étapes suivantes : a) l'incubation de l'échantillon avec au moins un composé de dégradation des protéines ; b) liaison de l'acide nucléique cible à une phase solide ; c) élution de l'acide nucléique cible à partir de la phase solide ; d) incubation de l'acide nucléique cible élué avec au moins un composé de dégradation des protéines ; e) liaison de l'acide nucléique cible de nouveau à une phase solide ; f) facultativement, élution de l'acide nucléique cible lié à partir de la phase solide. Il a été étonnamment découvert que la réalisation d'une seconde étape de digestion protéique, après que l'acide nucléique cible a été lié et élué à partir d'une phase solide, avant que les acides nucléiques ne soient reliés à une phase solide, est très efficace dans la réduction de contaminations protéiques restantes dans l'acide nucléique isolé.
Également publié en tant que
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