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1. (WO2009115244) PROCÉDÉ ET APPAREIL DE LOCALISATION DE MOLÉCULES DE COLORANT SIMPLES EN MICROSCOPIE PAR FLUORESCENCE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2009/115244    N° de la demande internationale :    PCT/EP2009/001840
Date de publication : 24.09.2009 Date de dépôt international : 13.03.2009
CIB :
G01N 21/64 (2006.01), G02B 21/00 (2006.01)
Déposants : RUPRECHT-KARLS-UNIVERSITÄT HEIDELBERG [DE/DE]; Kirchhoff-Institut für Physik Im Neuenheimer Feld 227 69120 Heidelberg (DE) (Tous Sauf US).
LEMMER, Paul [DE/DE]; (DE) (US Seulement).
CREMER, Cristoph [DE/DE]; (DE) (US Seulement).
BADDELEY, David [NZ/NZ]; (NZ) (US Seulement).
EIPEL, Heinz [DE/DE]; (DE) (US Seulement)
Inventeurs : LEMMER, Paul; (DE).
CREMER, Cristoph; (DE).
BADDELEY, David; (NZ).
EIPEL, Heinz; (DE)
Mandataire : SCHIUMA, Daniele; MÜLLER-BORE & PARTNER Grafingerstraße 2 D-81671 München (DE)
Données relatives à la priorité :
10 2008 015 051.7 19.03.2008 DE
PCT/EP2008/009671 14.11.2008 EP
Titre (EN) A METHOD AND AN APPARATUS FOR LOCALIZATION OF SINGLE DYE MOLECULES IN THE FLUORESCENT MICROSCOPY
(FR) PROCÉDÉ ET APPAREIL DE LOCALISATION DE MOLÉCULES DE COLORANT SIMPLES EN MICROSCOPIE PAR FLUORESCENCE
Abrégé : front page image
(EN)The invention concerns a method and a corresponding apparatus for obtaining a sub-resolution spatial information of a sample labeled with at least one type fluorescent label, said sub-resolution spatial information comprising localization information about the positions of fluorescent molecules of the at least one type fluorescent label in at least one spatial direction. The method comprises: - acquiring localization image data by employing fluorescence localization microscopy, wherein said localization image data comprises a series of images obtained by - illuminating a region of interest of the sample with illumination light having intensity in the range of approximately 1 kW/cm2 to approximately 1 MW/cm2, - detecting by an information acquiring sensor at least a portion of the fluorescent light emitted by at least a portion of the fluorescent molecules of the at least one type fluorescent label upon illumination, thereby obtaining an image of the region of interest; - repeating the steps of illuminating and detecting of the emitted fluorescent light a plurality of times, thereby obtaining the series of images, each image being taken at a different time step; and - processing the acquired localization image data to thereby obtain said localization information about the positions of fluorescent molecules of the at least one type fluorescent label in at least one spatial direction, wherein the step of processing comprises determining in each of the detected images of the series the positions of the barycenters of the detected fluorescence emission distributions from the single fluorescent molecules of the one or more fluorescent labels in at least one spatial direction.
(FR)L'invention concerne un procédé et un appareil correspondant permettant d'obtenir des informations spatiales en sous-résolution d'un échantillon marqué avec au moins un marqueur fluorescent d'un type donné, lesdites informations spatiales en sous-résolution comprenant des informations de localisation sur les positions de molécules fluorescentes du ou des marqueurs fluorescents d'un type donné dans au moins une direction spatiale. Ledit procédé consiste à acquérir des données d'images de localisation par utilisation d'une microscopie de localisation par fluorescence, les données d'images de localisation comprenant une série d'images obtenues par éclairage d'une région d'intérêt de l'échantillon avec une lumière d'éclairage présentant une intensité comprise entre environ 1 KW/cm2 et environ 1 MW/cm2, par détection, au moyen d'un détecteur d'acquisition d'informations, d'au moins une partie de la lumière fluorescente émise par au moins une partie des molécules fluorescentes du ou des marqueurs fluorescents d'un type donné lors de l'éclairage, d'où l'obtention d'une image de la région d'intérêt, et par répétitions multiples des étapes d'éclairage et de détection de la lumière fluorescente émise, d'où l'obtention de la série d'images, chaque image étant prise à un intervalle différent. Ledit procédé consiste en outre à traiter les données d'images de localisation acquises pour obtenir lesdites informations de localisation sur les positions des molécules fluorescentes du ou des marqueurs fluorescents d'un type donné dans au moins une direction spatiale, l'étape de traitement consistant à déterminer, dans chacune des images détectées de la série, les positions des barycentres de la distribution d'émission de fluorescence détectée des molécules fluorescentes simples du ou des marqueurs fluorescents dans au moins une direction spatiale.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)