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1. (WO2009027351) PRODUCTION DE PLASMIDES ET EXPRESSION DE PROTEINES RECOMBINANTES DANS DES CELLULES CULTIVEES SANS ANTIBIOTIQUES
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2009/027351    N° de la demande internationale :    PCT/EP2008/061045
Date de publication : 05.03.2009 Date de dépôt international : 22.08.2008
CIB :
C12N 15/63 (2006.01), C12N 15/64 (2006.01), C12N 15/65 (2006.01)
Déposants : CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (CNRS) [FR/FR]; 3, rue Michel Ange, F-75016 Paris (FR) (Tous Sauf US).
UNIVERSITE PARIS DESCARTES [FR/FR]; 12, rue de l'Ecole de Médecine, F-75006 Paris (FR) (Tous Sauf US).
INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE (INSERM) [FR/FR]; 101, rue de Tolbiac, F-75013 Paris (FR) (Tous Sauf US).
SCHERMAN, Daniel [FR/FR]; (FR) (US Seulement).
MARIE, Corinne [FR/FR]; (FR) (US Seulement)
Inventeurs : SCHERMAN, Daniel; (FR).
MARIE, Corinne; (FR)
Mandataire : WARCOIN, AHNER, TEXIER, LE FORESTIER, CALLON DE LAMARCK, COLLIN, TETAZ-CABINET REGIMBEAU; 20, rue de Chazelles, F-75847 Paris Cedex 17 (FR)
Données relatives à la priorité :
0757175 24.08.2007 FR
Titre (EN) PLASMID PRODUCTION AND EXPRESSION OF RECOMBINANT PROTEINS IN CELLS CULTIVATED WITHOUT ANTIBIOTICS
(FR) PRODUCTION DE PLASMIDES ET EXPRESSION DE PROTEINES RECOMBINANTES DANS DES CELLULES CULTIVEES SANS ANTIBIOTIQUES
Abrégé : front page image
(EN)The invention relates to a mutated cell such as a bacteria or yeast in which the thyA gene coding thymidylate synthase includes a nonsense codon, preferably the amber codon, said nonsense codon replacing a codon coding an amino acid and inducing the interruption of thyA gene translation and the auxotropy of the cell for the thymidine. Advantageously, the endA gene coding the endonuclease 1 and/or the recA gene coding the recombinase is inactivated in said mutated cell. The invention also relates to an expression plasmid including a transgene and a sequence of a suppressing ARM structural gene containing an anticodon that can be paired with the nonsense codon of the thyA gene and is specific of an amino acid capable of restoring the translation of the mutated thyA gene and thereby obtaining a protein of the wild or mutated type having a thymidylate synthase activity. The invention also relates to a method for the multiplication of the expression plasmid.
(FR)La présente invention concerne une cellule mutée telle qu'une bactérie ou une levure, dans laquelle le gène thyA codant la thymidylate synthase comporte un codon non sens, de préférence le codon ambre, ledit codon non sens remplaçant un codon codant un acide aminé et entraînant un arrêt de la traduction du gène thyA et l'auxotrophie de la cellule pour la thymidine. Avantageusement, le gène endA codant l'endonucléase 1 et/ou le gène recA codant la recombinase est inactivé dans ladite cellule mutée. L'invention concerne également un plasmide d'expression comprenant un transgène et une séquence de gène structural d'ARM suppresseur comprenant un anticodon capable de s'apparier au codon non sens du gène thyA et qui est spécifique d'un acide aminé capable de restaurer la traduction du gène thyA muté et d'obtenir ainsi une protéine de type sauvage ou mutée possédant une activité thymidylate synthase. Un procédé de multiplication du plasmide d'expression est également revendiqué.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MT, NL, NO, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : français (FR)
Langue de dépôt : français (FR)