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1. (WO2008125080) PROTÉINE POUR LA PRODUCTION CHIMIO-ENZYMATIQUE DE L-THREO-HYDROXYASPARTATE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2008/125080    N° de la demande internationale :    PCT/DE2008/000580
Date de publication : 23.10.2008 Date de dépôt international : 07.04.2008
CIB :
C12N 9/02 (2006.01), C12P 13/20 (2006.01)
Déposants : PHILIPPS-UNIVERSITÄT MARBURG [DE/DE]; Biegenstrasse 10 35032 Marburg (DE) (Tous Sauf US).
MARAHIEL, Mohamed, A. [DE/DE]; (DE) (US Seulement).
STRIEKER, Matthias [DE/DE]; (DE) (US Seulement).
ESSEN, Lars-Oliver [DE/DE]; (DE) (US Seulement)
Inventeurs : MARAHIEL, Mohamed, A.; (DE).
STRIEKER, Matthias; (DE).
ESSEN, Lars-Oliver; (DE)
Mandataire : BUCHHOLD, Jürgen; Olbricht, Buchhold, Keulertz & Partner Postfach 1143 35095 Weimar (DE)
Données relatives à la priorité :
10 2007 017 861.3 13.04.2007 DE
Titre (DE) PROTEIN ZUR CHEMOENZYMATISCHEN HERSTELLUNG VON L-THREO-HYDROXYASPARTAT
(EN) PROTEIN FOR CHEMOENZYMATIC PRODUCTION OF L-THREO-HYDROXYASPARTATE
(FR) PROTÉINE POUR LA PRODUCTION CHIMIO-ENZYMATIQUE DE L-THREO-HYDROXYASPARTATE
Abrégé : front page image
(DE)Die vorliegende Erfindung beschreibt eine einfache Mutante der natürlichen Asparaginoxygenase, wobei diese einfache Mutante mindestens die Aminosäuren 13 bis 318 der natürlichen Asparaginoxygenase AsnO umfasst. In diesem erfindungsgemäßen Protein umfassend mindestens die Aminosäuren 13-318 von AsnO D241N ist der Aminosäurerest an Position 241 der natürlichen Asparaginoxygenase AsnO von Aspartat (D) zu Asparagin (N) ausgetauscht. Das erfindungsgemäße Protein umfassend mindestens die Aminosäuren 13-318 von AsnO D241N wird hergestellt durch eine gerichtete Mutagenese aus dem AsnO-Wildtyp, Klonierung dieses Expressionplasmids in einen Vektor, Transformation des Vektor-Plasmid-Konstruktes in einen Wirtsorganismus und Expression des rekombinanten Proteins hergestellt. Das erfindungsgemäße Protein eignet sich für die chemoenzymatische und enantioselektive Herstellung von L-threo-Hydroxyaspartat aus L-Aspartat. Das Protein ist substratspezifisch und setzt L-Aspartat quantitativ zu L-threo-Hydroxyaspartat um.
(EN)The present invention describes a simple mutant of natural asparagine oxygenase, wherein said simple mutant comprises at least the amino acids 13 through 318 of the natural asparagine oxygenase AsnO. In said protein according to the invention comprising at least the amino acids 13-318 from AsnO D241 N, the residual amino acid at position 241 of the natural asparagine oxygenase AsnO is exchanged from aspartate (D) to asparagine (N). The protein according to the invention comprising at least the amino acids 13-318 of AsnO D241 N is produced by a directed mutagenesis of the AsnO wild type, cloning of the expression plasmid into a vector, transformation of the vector plasmid construct into a host organism, and expression of the recombinant protein. The protein according to the invention is suitable for chemoenzymatic and enantioselective production of L-threo-hydroxyaspartate from L-aspartate. The protein is substrate specific, and quantitatively converts L-aspartate to L-threohydroxyaspartate.
(FR)La présente invention concerne un mutant simple de l'asparaginoxygénase naturelle, qui comporte au moins les acides aminés 13 à 318 de l'asparaginoxygénase naturelle AsnO. Dans cette protéine selon l'invention comprenant au moins les acides aminés 13-318 de AsnO D241N, le reste d'acide aminé en position 241, aspartate (D), de l'asparaginoxygénase naturelle AsnO est remplacé par asparagine (N). La protéine selon l'invention comprenant au moins les acides aminés 13-318 de AsnO D241N est produite par une mutagenèse dirigée à partir du type sauvage de AsnO, par clonage de ce plasmide d'expression dans un vecteur, par transformation du produit de synthèse vecteur-plasmide dans un organisme hôte et par expression de la protéine recombinée. La protéine selon la présente invention est appropriée pour la production chimio-enzymatique et énantiosélective de L-threo-hydroxyaspartate à partir de L-aspartate. Elle est spécifique d'un substrat et convertit de manière quantitative le L-aspartate en L-threo-hydroxyaspartate.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MT, NL, NO, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : allemand (DE)
Langue de dépôt : allemand (DE)