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1. (WO2008089132) SÉLECTION GÉNÉTIQUE POUR LE REPLIEMENT DES PROTÉINES ET LA SOLUBILITÉ DANS LE PÉRIPLASME BACTÉRIEN
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2008/089132    N° de la demande internationale :    PCT/US2008/050991
Date de publication : 24.07.2008 Date de dépôt international : 14.01.2008
CIB :
C12P 21/04 (2006.01), C07K 1/00 (2006.01)
Déposants : CORNELL RESEARCH FOUNDATION, INC. [US/US]; 20 Thornwood Drive, Suite 105, Ithaca, NY 14850 (US) (Tous Sauf US).
DELISA, Matthew, P. [US/US]; (US) (US Seulement).
MANSELL, Thomas, J. [US/US]; (US) (US Seulement).
FISHER, Adam, C. [US/US]; (US) (US Seulement)
Inventeurs : DELISA, Matthew, P.; (US).
MANSELL, Thomas, J.; (US).
FISHER, Adam, C.; (US)
Mandataire : JONES, J., Michell; Casimir Jones, S.c., 440 Science Drive, Suite 203, Madison, WI 53711 (US)
Données relatives à la priorité :
60/880,312 12.01.2007 US
Titre (EN) GENETIC SELECTION FOR PROTEIN FOLDING AND SOLUBILITY IN THE BACTERIAL PERIPLASM
(FR) SÉLECTION GÉNÉTIQUE POUR LE REPLIEMENT DES PROTÉINES ET LA SOLUBILITÉ DANS LE PÉRIPLASME BACTÉRIEN
Abrégé : front page image
(EN)The present invention relates to the fields of microbiology, molecular biology and protein biochemistry. More particularly, it relates to compositions and methods for analyzing and altering (e.g., enhancing or inhibiting) protein folding and solubility (e.g., within periplasm). The present invention provides an engineered assay for protein folding and solubility in the E. coli periplasm based on co-translational translocation of a chimera comprising a protein of interest fused to TEM-I β-lactamase that is targeted for export via the signal recognition particle (SRP)-dependent pathway. Using an array of native and heterologous proteins, it is demonstrated that periplasmic folding behavior of proteins is intimately coupled to in vivo β-lactamase activity. As a result of this coupling, the reporter is useful for (1) facile discovery of extrinsic periplasmic factors that affect protein folding and solubility; and (2) genetic selection of solubility-enhanced proteins.
(FR)La présente invention concerne les domaines de la microbiologie, de la biologie moléculaire et de la biochimie des protéines. Plus particulièrement, l'invention concerne des compositions et des procédés pour analyser et altérer (par exemple, améliorer ou inhiber) le repliement des protéines et la solubilité (par exemple, à l'intérieur du périplasme). La présente invention concerne un test conçu pour le repliement des protéines et la solubilité dans le périplasme d'E. coli basé sur la translocation co-translationnelle d'une chimère comprenant une protéine intéressante fusionnée à une TEM-I β-lactamase dont on cible l'exportation par l'intermédiaire de la voie dépendant de la particule de reconnaissance du signal (SRP). En utilisant une matrice de protéines natives et hétérologues, il a été démontré que le comportement de repliement périplasmique des protéines est intimement lié à l'activité in vivo de la β-lactamase. Il résulte de ce couplage que le rapporteur est utile pour (1) une découverte aisée des facteurs périplasmiques extrinsèques qui affectent le repliement des protéines et la solubilité ; et (2) la sélection génétique des protéines ayant une solubilité améliorée.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MT, NL, NO, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)