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1. (WO2008020008) PROCÉDÉ PERMETTANT LA SYNTHÈSE D'UN ADNC DANS UN ÉCHANTILLON PRÉSENT DANS UNE RÉACTION ENZYMATIQUE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2008/020008    N° de la demande internationale :    PCT/EP2007/058369
Date de publication : 21.02.2008 Date de dépôt international : 13.08.2007
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : QIAGEN GMBH [DE/DE]; Qiagen Strasse 1, 40724 Hilden (DE) (Tous Sauf US).
ENGEL, Holger [DE/DE]; (DE) (US Seulement).
YERRAMILLI, Subrahmanyam [US/US]; (US) (US Seulement).
KREUTZ, Martin [DE/US]; (US) (US Seulement).
LÖFFERT, Dirk [DE/DE]; (DE) (US Seulement).
KORFHAGE, Christian [DE/DE]; (DE) (US Seulement)
Inventeurs : ENGEL, Holger; (DE).
YERRAMILLI, Subrahmanyam; (US).
KREUTZ, Martin; (US).
LÖFFERT, Dirk; (DE).
KORFHAGE, Christian; (DE)
Mandataire : VOSSIUS & PARTNER; Siebertstrasse 4, 81675 München (DE)
Données relatives à la priorité :
10 2006 038 113.0 14.08.2006 DE
Titre (DE) VERFAHREN ZUR SYNTHESE EINER cDNA IN EINER PROBE IN EINER ENZYMATISCHEN REAKTION
(EN) METHOD FOR SYNTHESIS OF A cDNA IN A SAMPLE IN AN ENZYMATIC REACTION
(FR) PROCÉDÉ PERMETTANT LA SYNTHÈSE D'UN ADNC DANS UN ÉCHANTILLON PRÉSENT DANS UNE RÉACTION ENZYMATIQUE
Abrégé : front page image
(DE)Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Synthese einer cDNA in einer Probe in einer enzymatischen Reaktion, wobei das Verfahren die Schritte umfasst, gleichzeitige Bereitstellung eines ersten Enzyms mit Polyadenylierungsaktivität, eines zweiten Enzyms mit reverser Transkriptaseaktivität, eines Puffers, mindestens eines Ribonukleotids, mindestens eines Desoxyribonukleotids, eines Anker Oligonukleotids, Zugabe einer Probe umfassend eine Ribonukleinsäure sowie Inkubation der Agenzien der vorhergehenden Schritte bei einem oder mehreren Temperaturschritten, welche so gewählt sind, dass das erste und das zweite Enzym Aktivität zeigen. Die Erfindung betrifft weiter einer Reaktionsgemisch umfassend ein erstes Enzym mit Polyadenylierungsaktivität, eines zweites Enzym mit reverser Transkriptaseaktivität, optional einen Puffer, optional mindestens ein Ribonukleotid, optional mindestens ein Desoxyribonukleotid und optional Anker Oligonukleotid. Zudem betrifft die Erfindung einen Kit umfassend ein entsprechendes Reaktionsgemisch.
(EN)The invention relates to a method for synthesis of a cDNA in a sample in an enzymatic reaction, comprising the following steps, simultaneous preparation of a first enzyme with polyadenylisation activity, a second enzyme with reverse transcriptase activity, a buffer, at least one ribonucleotide, at least one desoxyribonucleotide and a binding oligonucleotide, addition of a sample containing a ribonucleic acid and incubation of the reagents of the preceding steps over one or more temperature steps, selected such that the first and the second enzyme display activity. The invention further relates to a reaction mixture comprising a first enzyme with polyadenylisation activity, a second enzyme with reverse transcriptase activity, optionally a buffer, optionally at least one ribonucleotide, optionally at least one desoxyribonucleotide and optionally a binding oligonucleotide. A kit comprising a corresponding reaction mixture is also disclosed.
(FR)L'invention concerne un procédé permettant la synthèse d'un ADNc dans un échantillon lors d'une réaction enzymatique, le procédé comprenant les étapes suivantes: préparation simultanée d'une première enzyme présentant une activité de polyadénylation, une seconde enzyme présentant une réactivité à la transcriptase inversée, une solution tampon, au moins ribonucléotide, au moins un désoxyribonucléotide, un oligonucléotide d'ancrage; l'ajout d'un échantillon comprenant un acide ribonucléique; ainsi que l'incubation des agents des étapes susmentionnées dans une ou plusieurs étapes de températures différentes, lesquelles sont sélectionnées de manière à ce que la première et la seconde enzyme présentent une activité. L'invention concerne également un mélange de réaction comprenant une première enzyme présentant une activité de polyadénylation, une seconde enzyme présentant une réactivité de transcriptase inversée, éventuellement une solution tampon, éventuellement au moins un ribonucléotide, éventuellement un désoxyribonucléotide et éventuellement un oligonucléotide d'ancrage. L'invention concerne également un kit comprenant un mélange de réaction correspondant.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MT, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : allemand (DE)
Langue de dépôt : allemand (DE)