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1. (WO2008002235) PURIFICATION ET IDENTIFICATION DE PROTÉINES
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2008/002235    N° de la demande internationale :    PCT/SE2007/000553
Date de publication : 03.01.2008 Date de dépôt international : 08.06.2007
CIB :
C07K 1/16 (2006.01)
Déposants : GE HEALTHCARE BIO-SCIENCES AB [SE/SE]; Patent Department, Björkgatan 30, S-751 84 Uppsala (SE) (Tous Sauf US).
AXELMAN, Johan [SE/SE]; (SE) (US Seulement).
IVANSSON, Daniel [SE/SE]; (SE) (US Seulement).
RENLUND, Staffan [SE/SE]; (SE) (US Seulement)
Inventeurs : AXELMAN, Johan; (SE).
IVANSSON, Daniel; (SE).
RENLUND, Staffan; (SE)
Mandataire : GE HEALTHCARE BIO-SCIENCES AB; Patent Department, Björkgatan 30, S-751 84 Uppsala (SE)
Données relatives à la priorité :
0601460-9 30.06.2006 SE
Titre (EN) PROTEIN PURIFICATION AND IDENTIFICATION
(FR) PURIFICATION ET IDENTIFICATION DE PROTÉINES
Abrégé : front page image
(EN)The present invention relates to a method for protein purification and identification. More closely the invention relates to a method for protein pre-fractionation and identification resulting in improved yield of identified proteins, useful e.g. for proteomics. The method for pre-fractionation of protein samples, comprises the following steps : a) reducing disulfide bridges (S-S bridges) or protection cysteines in the proteins in the sample; b) loading the sample onto an ion exchange column; c) eluting the sample; d) collecting each fraction from said column separately in air sealed containers devoid of chromatographic media; e) desalting each fraction on a single RPC (reversed phase chromatography) trap column; f) separating each fraction in a second dimension RPC step to obtain further separated proteins which are collected in fractions; and g) identifying the further separated proteins by MS
(FR)La présente invention concerne un procédé de purification et d'identification de protéines. L'invention porte en particulier sur un procédé de préfractionnement et d'identification de protéines aboutissant à un meilleur rendement de protéines identifiées, utiles pour des protéomiques par exemples. Le procédé de préfractionnement d'échantillons de protéines comprend les étapes suivantes : a) la réduction des ponts disulfides (ponts S-S) ou des cystéines de protection présents dans les protéines de l'échantillon; b) la charge de l'échantillon dans une colonne d'échange d'ions; c) l'élution de l'échantillon; d) la collecte de chaque fraction provenant de ladite colonne dans des récipients séparés étanches à l'air et dépourvus de supports chromatographiques; e) le dessalage de chaque fraction dans une colonne de piégeage RPC (chromatographie à polarité de phases inversées); f) la séparation de chaque fraction au cours d'une étape RPC de seconde dimension afin d'obtenir des protéines séparées une nouvelle fois qui sont recueillies en fractions; et g) l'identification de ces protéines de nouveau séparées par MS.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MT, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)