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1. (WO2006123555) PROCEDE DE TRANSFORMATION ET PROCEDE DE TRANSFECTION OU D’INFECTION POUR CELLULE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2006/123555    N° de la demande internationale :    PCT/JP2006/309345
Date de publication : 23.11.2006 Date de dépôt international : 09.05.2006
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    05.10.2006    
CIB :
C12N 15/00 (2006.01), C12N 1/00 (2006.01), C12N 15/09 (2006.01)
Déposants : TOHOKU UNIVERSITY [JP/JP]; 1-1, Katahira 2-chome, Aoba-ku, Sendai-shi Miyagi 9808577 (JP) (Tous Sauf US).
NAGAMINE, Kuniaki [JP/JP]; (JP) (US Seulement).
ONODERA, Shiho [JP/JP]; (JP) (US Seulement).
TORISAWA, Yusuke [JP/JP]; (JP) (US Seulement).
MATSUE, Tomokazu [JP/JP]; (JP) (US Seulement).
SHIKU, Hitoshi [JP/JP]; (JP) (US Seulement).
YASUKAWA, Tomoyuki [JP/JP]; (JP) (US Seulement)
Inventeurs : NAGAMINE, Kuniaki; (JP).
ONODERA, Shiho; (JP).
TORISAWA, Yusuke; (JP).
MATSUE, Tomokazu; (JP).
SHIKU, Hitoshi; (JP).
YASUKAWA, Tomoyuki; (JP)
Mandataire : SHIGENOBU, Kazuo; 7F, Kioicho K Bldg., 3-28, Kioi-cho, Chiyoda-ku, Tokyo 102-0094 (JP)
Données relatives à la priorité :
2005-145340 18.05.2005 JP
Titre (EN) TRANSFORMATION METHOD AND TRANSFECTION OR INFECTION METHOD FOR CELL
(FR) PROCEDE DE TRANSFORMATION ET PROCEDE DE TRANSFECTION OU D’INFECTION POUR CELLULE
(JA) 細胞の形質転換方法及び形質導入方法
Abrégé : front page image
(EN)[PROBLEMS] To provide a transformation method for a microorganism such as Escherichia coli or yeast or a transfection or infection method for a floating cell on a device for the comprehensive analysis in a cellular level of the information such as the change in gene expression over time, the phenotype derived from a gene and the intracellular localization of a gene product which has been difficult or impossible to evaluate or analyze on a DNA microarray. [MEANS FOR SOLVING PROBLEMS] Microwells having a vector attached thereon are filled with a solution of collagen having a microorganism suspended therein or a cell floating therein to perform a transformation and/or transfection or infection, and the collagen is gelled to allow the transformed and/or transfected or infected host (microorganism or floating cell) to be embedded in the microwells, thereby producing a gene-introduced cell microarray. The expression of a target gene is then induced in each of the microwells by performing the selective culture while contacting the microwells with a selective culture medium. Subsequently, with respect to the transformed and/or transfected or infected cell retained in each of the microwells, the activity of a reporter protein expressed by the transformation or transfection or infection is detected in the substrate.
(FR)L'invention concerne un procédé de transformation pour un microorganisme tel qu’Escherichia coli ou une levure ou un procédé de transfection ou d’infection pour une cellule flottante sur un dispositif pour l’analyse globale à un niveau cellulaire d’information tel que la modification de l’expression du gène dans le temps, le phénotype dérivé d’un gène et la localisation intracellulaire d’un produit de gène qui a été jusqu'ici difficile ou impossible à évaluer ou analyser sur une micromatrice d’ADN. Des microgodets ayant un vecteur qui y est accroché sont remplis avec une solution de collagène ayant un microorganisme qui y est suspendu ou une cellule qui y flotte pour réaliser une transformation et/ou une transfection ou une infection, et le collagène est gélifié pour permettre à l’hôte transformé et/ou transfecté ou infecté (microorganisme ou cellule flottante) d’être inclus dans les microgodets, produisant de ce fait une micromatrice cellulaire avec un gène introduit. L’expression d’un gène cible est alors induite dans chacun des microgodets en réalisant la culture sélective tout en mettant en contact les microgodets avec un milieu de culture sélectif. Par la suite, en fonction de la cellule transformée et/ou transfectée ou infectée retenue dans chacun des microgodets, l’activité d’une protéine rapporteur exprimée au moyen de la transformation ou de la transfection ou de l’infection est détectée dans le substrat.
(JA)【課題】 デバイス上における大腸菌や酵母などの微生物の形質転換方法や浮遊細胞の形質導入方法を提供し、遺伝子発現の時間的変化の評価、各遺伝子に由来する表現型の解析、そして遺伝子産物の細胞内局在など、DNAマイクロアレイでは困難あるいは不可能であった情報に関して細胞レベルで網羅的に解析すること。 【解決手段】 コラーゲン溶液に懸濁した微生物又は浮遊細胞を、ベクターを付着させたマイクロウェル内に満たして形質転換(トランスフォーメーション)及び/又は形質導入(トランスフェクションまたはインフェクション)を行い、コラーゲンをゲル化させ、形質転換及び/又は形質導入した宿主(微生物又は浮遊細胞)をマイクロウェル内に封じ込めて、遺伝子導入細胞マイクロアレイを製造し、マイクロウェルを選択培地に接触させながら選択培養し、各々のマイクロウェル内にて目的遺伝子発現誘導を促し、各々のマイクロウェル内に保持された形質転換及び/又は形質導入された細胞に関し、引続き同一基板で形質転換または形質導入により発現したレポータータンパク質の活性を検出する。
États désignés : AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : japonais (JA)
Langue de dépôt : japonais (JA)