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1. (WO2006055292) PRODUCTION D'UNE SEULE PROTEINE DANS DES CELLULES VIVANTES FACILITEE PAR UNE INTERFERASE D'ARN MESSAGER
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2006/055292    N° de la demande internationale :    PCT/US2005/040107
Date de publication : 26.05.2006 Date de dépôt international : 04.11.2005
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    15.06.2006    
CIB :
C12N 5/10 (2006.01), C12P 21/00 (2006.01)
Déposants : UNIVERSITY OF MEDICINE AND DENTISTRY OF NEW JERSEY [US/US]; Liberty Plaza, Suite 3200, 335 George Street, New Brunswick, New Jersey 08901 (US) (Tous Sauf US).
MASAYORI, Inouye [JP/US]; (US).
ZHANG, Junjie [CN/CN]; (CN).
SUZUKI, Motoo [JP/US]; (US)
Inventeurs : MASAYORI, Inouye; (US).
ZHANG, Junjie; (CN).
SUZUKI, Motoo; (US)
Mandataire : LUBIT, Beverly, W.; LOWENSTEIN SANDLER PC, 65 Livingston Avenue, Roseland, New Jersey 07068 (US)
Données relatives à la priorité :
60/624,976 04.11.2004 US
Titre (EN) SINGLE PROTEIN PRODUCTION IN LIVING CELLS FACILITATED BY A MESSENGER RNA INTERFERASE
(FR) PRODUCTION D'UNE SEULE PROTEINE DANS DES CELLULES VIVANTES FACILITEE PAR UNE INTERFERASE D'ARN MESSAGER
Abrégé : front page image
(EN)The present invention describes a single-protein production (SPP) system in living E. coli cells that exploits the unique properties of an mRNA interferase, for example, MazF, a bacterial toxin that is a single stranded RNA- and ACA-specific endoribonuclease, which efficiently and selectively degrades all cellular mRNAs in vivo, resulting in a precipitous drop in total protein synthesis. Concomitant expression of MazF and a target gene engineered to encode an ACA-less mRNA results in sustained and high-level (up to 90%) target expression in the virtual absence of background cellular protein synthesis. Remarkably, target synthesis continues for at least 4 days, indicating that cells retain transcriptional and translational competence despite their growth arrest. SPP technology works well for yeast and human proteins, even a bacterial integral membrane protein. This novel system enables unparalleled signal to noise ratios that should dramatically simplify structural and functional studies of previously intractable but biologically important proteins.
(FR)Système de production d'une seule protéine (SPP) dans des cellules vivantes E. coli tirant profit des propriétés uniques d'une interférase d'ARNm, notamment MazF, une toxine bactérienne qui est une endoribonucléase spécifique à l'ARN et à ACA à un seul brin, qui dégrade efficacement et sélectivement tous les ARNm cellulaires in vivo, avec pour effet d'entraîner une chute précipitée de la synthèse totale protéique. L'expression concomitante de MazF et un gène cible obtenu par ingénierie pour coder un ARNm sans ACA se traduit par un niveau élevé et soutenu, jusqu'à 90 %, de l'expression cible en l'absence virtuelle de la synthèse protéique cellulaire de fond. L'invention est remarquable en ce que la synthèse cible continue pendant au moins 4 jours, indiquant que les cellules retiennent la compétence transcriptionnelle et translationnelle malgré leur arrêt de croissance. La technologie SPP est efficace pour les protéines de levure et humaines, même pour une protéine de membrane intégrale bactérienne. Ce système innovateur permet d'obtenir des rapports signal-bruit non en parallèle qui devraient simplifier considérablement les études structurales et fonctionnelles de protéines réfractaires mais biologiquement importantes.
États désignés : AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)