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1. (WO2006035975) PROCEDE DE CRIBLAGE DE PROTEINE CIBLE D’UBIQUITINATION PAR LIGASE D’UBIQUITINE
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2006/035975    N° de la demande internationale :    PCT/JP2005/018245
Date de publication : 06.04.2006 Date de dépôt international : 27.09.2005
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01), C12N 15/09 (2006.01), G01N 33/15 (2006.01), G01N 33/50 (2006.01), G01N 33/68 (2006.01)
Déposants : RIKEN [JP/JP]; 2-1, Hirosawa, Wako-shi, Saitama 3510198 (JP) (Tous Sauf US).
KISHI, Tsutomu [JP/JP]; (JP) (US Seulement)
Inventeurs : KISHI, Tsutomu; (JP)
Mandataire : HIRAKI, Yusuke; Kamiya-cho MT Bldg. 19F 3-20, Toranomon 4-chome Minato-ku, Tokyo 105-0001 (JP)
Données relatives à la priorité :
2004-279216 27.09.2004 JP
Titre (EN) METHOD OF SCREENING TARGET PROTEIN OF UBIQUITINATION BY UBIQUITIN LIGASE
(FR) PROCEDE DE CRIBLAGE DE PROTEINE CIBLE D’UBIQUITINATION PAR LIGASE D’UBIQUITINE
(JA) ユビキチンリガーゼによるユビキチン化の標的タンパク質をスクリーニングする方法
Abrégé : front page image
(EN)It is intended to develop an experiment system for screening a protein to be ubiquitinated by ubiquitin ligase and identify a target protein of the ubiquitination by using the system. It is found out that a target protein can be stabilized and consequently screened by, in a yeast two-hybrid screening system, (1) using, as a bait, not the full-length F-box protein but a mutated F-box protein lacking the F-box motif, which is seemingly an Skp1-binding region, either as a whole or to such an extent as losing the ability to bind to Skp1, and (2) further using a mutant having a lowered ability to degrade the target protein (for example, a temperature-sensitive mutant or a deletion mutant).
(FR)Cette invention a pour objet de développer un système de criblage d'une protéine à ubiquitiner au moyen d’ubiquitine ligase et d’identifier une protéine cible pour l’ubiquitination en utilisant le système. Il est démontré qu'une protéine cible peut être stabilisée et par conséquent criblée, par un système de test à deux hybrides sur levure, (1) en utilisant, à la manière d’un piège, non pas la protéine F-box entière, mais une protéine F-box ayant subi une mutation dépourvue du motif F-box, qui est apparemment une région de liaison Skp1, soit entièrement, soit de telle manière qu’elle a perdu sa capacité à se lier à Skp1, et de plus (2) en utilisant une protéine mutante ayant une capacité moindre à dégrader la protéine cible (par exemple, un mutant thermosensible ou un mutant de délétion).
(JA) ユビキチンリガーゼによってユビキチン化されるタンパク質をスクリーニングする実験系を開発し、これを用いてユビキチン化の標的タンパク質を同定することを課題とする。 酵母two hybridスクリーニング系に、(1)完全長のF-boxタンパク質ではなく、Skp1との結合領域であると考えられているF-boxモチーフを、全体あるいはSkp1と結合できなくなる程度を欠失した変異型F-boxタンパク質をbaitとして用い、更に(2)標的タンパク質の分解能が低下した変異株(例えば、温度感受性変異株あるいは欠失変異株)用いることにより、標的タンパク質を安定化でき、結果としてスクリーニングできることを見出した。
États désignés : AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : japonais (JA)
Langue de dépôt : japonais (JA)