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1. WO2003000881 - NOUVEAU PROCEDE

Numéro de publication WO/2003/000881
Date de publication 03.01.2003
N° de la demande internationale PCT/EP2002/006780
Date du dépôt international 19.06.2002
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 21.01.2003
CIB
C12N 15/64 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
63Introduction de matériel génétique étranger utilisant des vecteurs; Vecteurs; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci; Régulation de l'expression
64Méthodes générales pour la préparation du vecteur, pour son introduction dans la cellule ou pour la sélection de l'hôte contenant le vecteur
C12N 15/68 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
63Introduction de matériel génétique étranger utilisant des vecteurs; Vecteurs; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci; Régulation de l'expression
67Méthodes générales pour favoriser l'expression
68Stabilisation du vecteur
CPC
A61K 2039/52
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
39Medicinal preparations containing antigens or antibodies
51comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
52Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
C12N 15/64
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
64General methods for preparing the vector, for introducing it into the cell or for selecting the vector-containing host
C12N 15/68
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
67General methods for enhancing the expression
68Stabilisation of the vector
Déposants
  • ISAKSSON, Leif [SE/SE]; SE
  • HÄGG, Peter, Jörgen [SE/SE]; SE
  • ABDULKARIM, Farhad, Maruf [SE/SE]; SE
Inventeurs
  • ISAKSSON, Leif; SE
  • HÄGG, Peter, Jörgen; SE
  • ABDULKARIM, Farhad, Maruf; SE
Mandataires
  • ALBIHNS STOCKHOLM AB ; Box 5581 S-114 85 Stockholm, SE
Données relatives à la priorité
0102204-521.06.2001SE
Langue de publication anglais (EN)
Langue de dépôt anglais (EN)
États désignés
Titre
(EN) METHOD OF PLASMID STABILISATION BY IN VIVO DELETING THE ANTIBIOTIC RESISTENCE AND SELECTING WITH AN ESSENTIAL GENE
(FR) NOUVEAU PROCEDE
Abrégé
(EN)
The invention relates to a method for deletion of antibiotic resistance and /or plasmid stabilisation. The invention includes the steps of constructing a vector comprising an antibiotic resistance gene surrounded by a direct repeat sequence gene. This direct repeat gene may be an essential gene or a Rek-sequence. In the latter case the essential gene with a suitable promoter is presented in the vector. A host cell is transformed with the vector obtained, followed by deletion of the essential chromosomal gene in the host cell and deletion of the antibiotic resistance gene in the vector in the cell. The essential gene infA is preferred.The invention also relates to a method of stable maintenance of a vector in a host cell, a method of producing DNA in the cell and a method of producing amino acids, preptides and proteins in the cell. Further, the invention is directed to transformed host cells from which the chromosomal essential gene has been deleted and which comprise a vector containing the corresponding essential gene and possibly also one or more genes X of interest. The vector carries no gene for antibiotic resistance. The use of vector DNA obtained from the host for the preparation of a pharmaceutical composition for gene therapy such as a vaccine is also covered. Bacteria carrying the vector with appropriate genes X can be used for large scale production of compounds as directed by the gene product(s) of such gene(s).
(FR)
L'invention concerne un procédé de délétion de la résistance antibiotique et/ou de la stabilisation de plasmides. L'invention concerne en outre les étapes qui consistent à construire un vecteur comprenant un gène de résistance antibiotique entouré d'un gène de séquence de répétition directe qui peut être un gène essentiel ou une séquence Rek. Dans ce dernier cas, le gène essentiel avec un promoteur approprié est présenté dans le vecteur. Une cellule hôte est transformée avec le vecteur obtenu, suivie de la délétion du gène chromosomique dans la cellule hôte et de la délétion du gène de résistance antibiotique dans le vecteur de la cellule. On préfère le gène <i>inf</i>A. L'invention concerne également un procédé de conservation stable d'un vecteur dans une cellule hôte, un procédé de production d'ADN dans la cellule et un procédé de production d'acides aminés, de peptides et de protéines dans la cellule. En outre, l'invention traite de cellules hôtes transformées à partir desquelles le gène essentiel chromosomique a été délété et qui comprennent un vecteur contenant le gène essentiel correspondant et, éventuellement, au moins un gène X d'intérêt. Le vecteur ne porte aucun gène de résistance antibiotique. L'invention concerne également l'utilisation du vecteur ADN obtenu à partir de l'hôte pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à la thérapie génique, par exemple un vaccin. On peut utiliser des bactéries portant le vecteur muni de gènes X appropriés pour produire à grande échelle de composés comme le demande le(s) produits(s) génique(s) de tels gènes.
Également publié en tant que
RU2004104947
ZA200309767
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