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1. (WO2001079549) CONSTRUCTION DE BANQUES D'ADNC CLONE DE MANIERE DIRECTIONNELLE, A PARTIR D'ARN MESSAGER, AUX FINS D'AMELIORATION DU SEQUENCAGE A PARTIR DE L'EXTREMITE 3' DE L'ADN
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2001/079549    N° de la demande internationale :    PCT/US2001/011211
Date de publication : 25.10.2001 Date de dépôt international : 05.04.2001
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    25.10.2001    
CIB :
C12N 15/10 (2006.01)
Déposants : INCYTE PHARMACEUTICALS, INC. [US/US]; 3160 Porter Drive Palo Alto, CA 94304 (US)
Inventeurs : FU, Glenn, K.; (US).
STARNES, Steven; (US).
STUVE, Laura, L.; (US)
Mandataire : FRANCIS, Carol, L.; Bozicevic, Field & Francis LLP Suite 200 200 Middlefield Road Menlo Park, CA 94025 (US)
Données relatives à la priorité :
09/549,770 14.04.2000 US
Titre (EN) CONSTRUCTION OF UNI-DIRECTIONALLY CLONED cDNA LIBRARIES FROM MESSENGER RNA FOR IMPROVED 3'END DNA SEQUENCING
(FR) CONSTRUCTION DE BANQUES D'ADNC CLONE DE MANIERE DIRECTIONNELLE, A PARTIR D'ARN MESSAGER, AUX FINS D'AMELIORATION DU SEQUENCAGE A PARTIR DE L'EXTREMITE 3' DE L'ADN
Abrégé : front page image
(EN)Methods are provided for preparing cDNA corresponding to a mRNA. In the subject methods, a mRNA is first contacted with a mixture of primers under first strand cDNA synthesis conditions. The primer mixture contains primers that have at least 10 contiguous deoxythymidines, a double stranded restriction enzyme recognition sequence near one end and a non-polyA-complementary region near the other end, where the non-polyA-complementary region is -VV, -VTV, -VTTV, -VTTTV, and -VVVVV. The resultant cDNA is modified such that the polyT tail is substantially removed. The modified cDNA is then ligated into a vector. The subject methods find use in a variety of applications, and find particular use in the sequencing of DNA and in the synthesis of cDNA libraries.
(FR)L'invention concerne des procédés de préparation d'ADNc correspondant à un ARNm, lesquels consistent à mettre d'abord en contact un ARNm avec un mélange d'amorces, dans des conditions de synthèse d'un premier brin d'ADNc. Le mélange d'amorces contient des amorces qui possèdent au moins 10 désoxythymidines contiguës, une séquence de reconnaissance d'enzyme de restriction double brin située à proximité d'une extrémité, ainsi qu'une région non poly A complémentaire située à proximité de l'autre extrémité, cette région non poly A complémentaire étant -VV, -VTV, -VTTV, -VTTTV, ou VVVVV. L'ADNc résultant est modifié de façon que soit sensiblement éliminée la queue poly T. Il est possible d'utiliser les procédés de l'invention dans diverses applications, notamment dans le séquençage d'ADN et dans la synthèse de banques d'ADNc.
États désignés : CA, JP.
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE, TR).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)