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1. (WO2000055310) VECTEUR D'EXPRESSION AMELIORE POUR L'EXPRESSION CELLULAIRE CONSTANTE DE TET SUR REPRESSEUR DANS DE MULTIPLES TYPES DE CELLULES
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/2000/055310    N° de la demande internationale :    PCT/US2000/006862
Date de publication : 21.09.2000 Date de dépôt international : 15.03.2000
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    10.10.2000    
CIB :
A01K 67/027 (2006.01), C07K 14/47 (2006.01), C12N 15/85 (2006.01)
Déposants : THE TRUSTEES OF COLUMBIA UNIVERSITY IN THE CITY OF NEW YORK [US/US]; West 116th Street and Broadway, New York, NY 10027 (US) (Tous Sauf US).
FISHER, Paul, B. [US/US]; (US) (US Seulement).
GOPALKRISHNAN, Rahul [IN/US]; (US) (US Seulement)
Inventeurs : FISHER, Paul, B.; (US).
GOPALKRISHNAN, Rahul; (US)
Mandataire : WHITE, John, P.; Cooper & Dunahm LLP, 1185 Avenue of the Americas, New York, NY 10036 (US)
Données relatives à la priorité :
09/268,303 15.03.1999 US
Titre (EN) IMPROVED EXPRESSION VECTOR FOR CONSISTENT CELLULAR EXPRESSION OF THE TET ON REPRESSOR IN MULTIPLE CELL TYPES
(FR) VECTEUR D'EXPRESSION AMELIORE POUR L'EXPRESSION CELLULAIRE CONSTANTE DE TET SUR REPRESSEUR DANS DE MULTIPLES TYPES DE CELLULES
Abrégé : front page image
(EN)The present invention provides a vector comprising Protein Translation Peptide Elongation Factor-1 $g(a) promoter and nucleic acids encoding reverse tetracycline controlled transactivator, wherein the expression of said transactivator is under the control of Protein Translation Peptide Elongation Factor-1 $g(a) promoter. In addition, the invention provides a method of generating a reverse tetracycline controlled transactivator expression system for inducible tetracycline regulated gene expression comprising: (a) isolation of a DNA fragment encoding the reverse tetracycline controlled transactivator by restriction enzyme digestion, (b) generation of Protein Translation Peptide Elongation Factor-1 $g(a) promoter vector, by restriction enzyme digestion, (c) directional cloning of reverse tetracycline controlled transactivator into Protein Translation Peptide Elongation Factor-1 $g(a) promoter vector by ligation of 5' EcoRi compatible restriction enzyme overhangs, (d) directional cloning of reverse tetracycline controlled transactivator into Protein Translation Peptide Elongation Factor-1 $g(a) promoter vector by Klenow fragment mediated blunt end generation of 3' Bam HI end of DNA fragment encoding the reverse tetracycline controlled transactivator and 3' XbaI end of Protein Translation Peptide Elongation Factor-1 $g(a) promoter vector and (e) blunt cloning of partially ligated fragment to produce Protein Translation Peptide Elongation Factor-1 $g(a) promoter vector expressing reverse tetracycline controlled transactivator.
(FR)La présente invention concerne un vecteur contenant un promoteur $g(a) du facteur 1 d'allongement de peptide de traduction de protéine et des acides nucléiques codant pour un transactivateur régulé par la tétracycline inverse. L'expression dudit transactivateur est commandée par le promoteur $g(a) du facteur 1 d'allongement de peptide de traduction de protéine. De plus, l'invention concerne un procédé servant à produire un système d'expression de transactivateur régulé par la tétracycline inverse, utile pour l'expression inductible d'un gène régulé par la tétracycline, ce procédé comportant les étapes qui consistent à: (a) isoler un fragment d'ADN codant pour le transactivateur régulé par la tétracycline inverse au moyen d'une digestion par une enzyme de restriction; (b) produire un vecteur de promoteur $g(a) du facteur 1 d'allongement de peptide de traduction de protéine au moyen d'une digestion par une enzyme de restriction; (c) effectuer un clonage directionnel du transactivateur régulé par la tétracycline inverse de façon à obtenir un vecteur de promoteur $g(a) du facteur 1 d'allongement de peptide de traduction de protéine par ligature des prolongations d'enzyme de restriction compatibles avec 5' EcoRI; (d) effectuer un clonage directionnel du transactivateur régulé par la tétracycline inverse de façon à obtenir un vecteur de promoteur $g(a) du facteur 1 d'allongement de peptide de traduction de protéine, par la production d'extrémités franches dépendant du fragment de Klenow de la terminaison 3' Bam HI du fragment d'ADN codant pour le transactivateur régulé par la tétracycline inverse et de la terminaison 3' XbaI du vecteur de promoteur $g(a) du facteur 1 d'allongement de peptide de traduction de protéine; et (e) effectuer le clonage franc du fragment partiellement ligaturé pour produire le vecteur de promoteur $g(a) du facteur 1 d'allongement de peptide de traduction de protéine exprimant le transactivateur régulé par la tétracycline inverse.
États désignés : AE, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZA, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (GH, GM, KE, LS, MW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)