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1. (WO1999037323) ENZYMES MUTANTES CHIMIQUEMENT MODIFIEES ET PROCEDES DE FABRICATION ET DE CRIBLAGE CORRESPONDANTS
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1999/037323    N° de la demande internationale :    PCT/US1999/001230
Date de publication : 29.07.1999 Date de dépôt international : 21.01.1999
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    20.08.1999    
CIB :
C11D 3/386 (2006.01), C12N 9/56 (2006.01)
Déposants : GENENCOR INTERNATIONAL, INC. [US/US]; 925 Page Mill Road Palo Alto, CA 94304-1013 (US)
Inventeurs : JONES, J., Bryan; (CA).
PLETTNER, Erika; (US)
Mandataire : HUNTER, Tom; Majestic, Parsons, Siebert & Hsue P.C. Four Embarcadero Center, Suite 1100 San Fracisco, CA 94111-4106 (US)
Données relatives à la priorité :
60/072,266 23.01.1998 US
Titre (EN) CHEMICALLY MODIFIED MUTANT ENZYMES AND METHODS FOR PRODUCING THEM AND SCREENING THEM
(FR) ENZYMES MUTANTES CHIMIQUEMENT MODIFIEES ET PROCEDES DE FABRICATION ET DE CRIBLAGE CORRESPONDANTS
Abrégé : front page image
(EN)The present invention relates to method for screening chemically modified mutant enzymes for amidase and/or esterase activity. This method includes providing a chemically modified mutant enzyme with one or more amino acid residues from an enzyme being replaced by cysteine residues, where at least some of the cysteine residues are modified by replacing thiol hydrogen in the cysteine residues with a thiol side chain, contacting the chemically modified mutant enzyme with a substrate for an amidase and/or a substrate for an esterase and determining whether the chemically modified mutant enzyme exhibits amidase and/or esterase activity. The presentinvention also relates to chemically modified mutant enzymes and a method for producing them where one or more amino acid residues from an enzyme are replaced by cysteine residues, and the cysteine residues are modified by replacing at least some of the thiol hydrogen in the cysteine residue with a thiol side chain to form the chemically modified mutant enzyme. The thiol side chain is selected from the group consisting of -SCH2($i(p)-CH3-C6H4), -SCH2($i(p)-OCH3-C6H4), -SCH2($i(p)-CF3-C6H4), and -SCH2(2,4-diNO2-C6H3).
(FR)L'invention concerne un procédé de criblage d'enzymes mutantes chimiquement modifiées visant l'activité d'amidase et/ou d'estérase. Le procédé consiste à fournir une enzyme mutante chimiquement modifiée, un ou plusieurs résidus d'acides aminés d'une enzyme étant remplacés par des résidus de cystéine, où l'on a modifié au moins certains résidus de cystéine en remplaçant l'hydrogène de thiol dans les résidus de cystéine avec une chaîne latérale de thiol, en mettant l'enzyme mutante chimiquement modifiée en contact avec un substrat pour une amidase et/ou un substrat pour une estérase et en déterminant si l'enzyme mutante chimiquement modifiée manifeste une activité d'amidase et/ou d'estérase. La présente invention se rapporte également à des enzymes mutantes chimiquement modifiées et à un procédé de leur fabrication dans des conditions où un ou plusieurs résidus d'acides aminés provenant de l'enzyme sont remplacés par des résidus de cystéine et où les résidus de cystéine sont modifiés par le remplacement d'au moins une partie de l'hydrogène de thiol dans le résidu de cystéine avec une chaîne latérale de thiol, et ce pour former l'enzyme mutante chimiquement modifiée. La chaîne latérale de thiol est sélectionnée dans le groupe constitué de -SCH2($i(p)-CH3-C6H4), -SCH2($i(p)-OCH3-C6H4), -SCH2($i(p)-CF3-C6H4) et -SCH2(2,4-diNO2-C6H3).
États désignés : AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, UZ, VN, YU, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (GH, GM, KE, LS, MW, SD, SZ, UG, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)