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1. (WO1999032654) RT-PCR DIRECTE SUR DES MICROPLAQUETTES DE PCR A OLIGONUCLEOTIDES IMMOBILISES
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1999/032654    N° de la demande internationale :    PCT/US1998/027293
Date de publication : 01.07.1999 Date de dépôt international : 22.12.1998
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    22.07.1999    
CIB :
C12N 1/06 (2006.01), C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : HITACHI CHEMICAL CO., LTD. [JP/JP]; 1-1, Nishi-Shinjuku 2-chome Shinjuku-ku Tokyo (JP) (Tous Sauf US).
HITACHI CHEMICAL RESEARCH CENTER, INC. [US/US]; 1003 Health Sciences Road West Irvine, CA 92715 (US) (Tous Sauf US).
MITSUHASHI, Masato [JP/US]; (US) (US Seulement)
Inventeurs : MITSUHASHI, Masato; (US)
Mandataire : ALTMAN, Daniel, E.; Knobbe, Martens, Olson & Bear Sixteenth floor 620 Newport Center Drive Newport Beach, CA 92660-8016 (US)
Données relatives à la priorité :
60/068,394 22.12.1997 US
60/071,627 16.01.1998 US
Titre (EN) DIRECT RT-PCR ON OLIGONUCLEOTIDE-IMMOBILIZED PCR MICROPLATES
(FR) RT-PCR DIRECTE SUR DES MICROPLAQUETTES DE PCR A OLIGONUCLEOTIDES IMMOBILISES
Abrégé : front page image
(EN)The entire process of reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) is simplified by using oligonucleotide-immobilized microplates made of, e.g., polypropylene, to which oligonucleotides are securely immobilized and which can be subjected to thermal cycles of PCR. RT-PCR is preferably conducted in solid-phase. Capturing of mRNA and RT-PCR can be conducted in the same plates. The cDNA synthesized from the mRNA captured on the microplates can be used more than once. Further, in combination with the microplates, a filter plate is used for the preparation of cell lysates wherein target cells are placed on the filter plate, and a lysis buffer is passed through the cell layer on the filter to transfer cell lysate directly to the microplate via well-to-well communication.
(FR)On peut simplifier la totalité du processus PCR à transcription inverse (RT-PCR) par l'utilisation de microplaquettes (par exemple de polypropylène) sur lesquels sont fermement immobilisés des oligonucléotides pouvant être soumis aux cycles thermiques de la PCR. La RT-PCR s'opère de préférence en phase solide. La capture de l'ARNm, et la RT-PCR peuvent se dérouler sur la même plaquette. L'ADNc synthétisé à partir de l'ARNm prélevé sur les plaquettes peut être réutilisé plusieurs fois. On peut par ailleurs utiliser en association avec les microplaquettes une plaquette filtre servant à préparer des lysats de cellules et sur laquelle sont disposées des cellules cibles tandis qu'on fait passer un tampon de lyse à travers la couche de cellules se trouvant sur le filtre de manière à transférer le lysat de cellules directement sur la microplaquette par des communications de puits à puits.
États désignés : JP, US.
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)