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1. (WO1998051809) VECTEURS MULTIGENES DERIVES DE HSV
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1998/051809    N° de la demande internationale :    PCT/US1998/009553
Date de publication : 19.11.1998 Date de dépôt international : 11.05.1998
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    10.12.1998    
CIB :
C12N 15/869 (2006.01)
Déposants : UNIVERSITY OF PITTSBURGH OF THE COMMONWEALTH SYSTEM OF HIGHER EDUCATION [US/US]; 911 William Pitt Union, Pittsburgh, PA 15260 (US)
Inventeurs : GLORIOSO, Joseph, C.; (US).
KRISKY, David; (US)
Mandataire : KILYK, John, Jr.; Leydig, Voit & Mayer, Ltd., Suite 4900, Two Prudential Plaza, 180 North Stetson, Chicago, IL 60601-6780 (US)
Données relatives à la priorité :
08/854,601 12.05.1997 US
Titre (EN) MULTIGENE VECTORS DERIVED FROM HSV
(FR) VECTEURS MULTIGENES DERIVES DE HSV
Abrégé : front page image
(EN)The present invention provides a method for preparing viral vectors. The method comprises co-transfecting a source vector and a mutating cassette together into a population of appropriate host cells, such that homologous recombination occurs between the mutating cassette and the source vector whereby the mutating cassette replaces a region of the HSV genome. The mutating cassette has a unique restriction site not present in the sequence of the vector. The method further comprises plaquing the co-transfected host cells, selecting plaques in which recombination has occurred between the source vector and the mutating cassette, and isolating the viral DNA from the plaques. The isolated viral DNA is digested with a restriction endonuclease appropriate for cleaving the viral DNA at the unique restriction site within the mutating cassette to produce two viral polynucleotides. Following purification, the two viral polynucleotides can be joined to form a viral vector comprising the two viral polynucleotides. Alternatively, the two isolated viral polynucleotides can be joined with an insertion cassette to form a viral vector comprising the insertion cassette at the former locus of the unique restriction site. The present invention further provides a mutant vector, particularly an HSV vector constructed in accordance with the method for the present invention. The present invention further provides a multigene HSV vector, particularly a multigene HSV vector for cancer therapy.
(FR)La présente invention concerne un procédé permettant de préparer des vecteurs viraux. Ce procédé consiste à transfecter à la fois un vecteur source et une cassette mutante dans une population de cellules hôtes appropriée, de telle manière que la recombinaison homologue se produise entre la cassette mutante et le vecteur source et grâce à quoi, la cassette mutante remplace une région du génome du virus de l'herpès simplex (HSV). La cassette mutante présente un seul site de restriction absent dans la séquence du vecteur. Ce procédé consiste en outre à former des plaques de lyse dans les cellules hôtes co-transfectées, à sélectionner des plaques de lyse dans lesquelles une recombinaison s'est produite entre le vecteur source et la cassette mutante, et à isoler l'ADN viral des plaques de lyse. L'ADN viral isolé est digéré par une endonucléase de restriction pouvant couper de l'ADN viral au niveau du seul site de restriction de la cassette mutante et ce, dans le but de produire deux polynucléotides viraux. A la suite de cette purification, ces deux polynucléotides viraux peuvent être réunis en vue de former un vecteur viral contenant les deux polynucléotides viraux. Selon un autre mode de réalisation, les deux polynucléotides viraux peuvent être réunis dans une cassette d'insertion dans le but de former un vecteur viral, contenant la cassette d'insertion, au niveau de l'ancien locus du seul site de restriction. La présente invention concerne en outre un vecteur mutant, en particulier un vecteur du HSV construit conformément au procédé selon la présente invention, ainsi qu'un vecteur de HSV multigène, en particulier un vecteur de HSV multigène destiné à la thérapie anticancéreuse.
États désignés : AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GE, GH, GM, GW, HU, ID, IL, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, UZ, VN, YU, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (GH, GM, KE, LS, MW, SD, SZ, UG, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)