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1. (WO1998035049) DISULFURE-ISOMERASE DE PROTEINE DE LEVURE RECOMBINEE ET SON PROCEDE DE PREPARATION
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1998/035049    N° de la demande internationale :    PCT/JP1998/000498
Date de publication : 13.08.1998 Date de dépôt international : 06.02.1998
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    01.07.1998    
CIB :
C12N 9/90 (2006.01)
Déposants : ORIENTAL YEAST CO., LTD. [JP/JP]; 6-10, Azusawa 3-chome, Itabashi-ku, Tokyo 174-8505 (JP) (Tous Sauf US).
ISHII, Nobuyoshi [JP/JP]; (JP) (US Seulement).
SUZUKI, Yasuo [JP/JP]; (JP) (US Seulement).
UCHIDA, Kohji [JP/JP]; (JP) (US Seulement).
MATUO, Yushi [JP/JP]; (JP) (US Seulement).
TANAKA, Hideo [JP/JP]; (JP) (US Seulement)
Inventeurs : ISHII, Nobuyoshi; (JP).
SUZUKI, Yasuo; (JP).
UCHIDA, Kohji; (JP).
MATUO, Yushi; (JP).
TANAKA, Hideo; (JP)
Mandataire : SHAMOTO, Ichio; Yuasa and Hara, Section 206, New Ohtemachi Building, 2-1, Ohtemachi 2-chome, Chiyoda-ku, Tokyo 100-0004 (JP)
Données relatives à la priorité :
9/38588 07.02.1997 JP
Titre (EN) RECOMBINANT YEAST PDI AND PROCESS FOR PREPARING THE SAME
(FR) DISULFURE-ISOMERASE DE PROTEINE DE LEVURE RECOMBINEE ET SON PROCEDE DE PREPARATION
Abrégé : front page image
(EN)A process for preparing a biologically active recombinant yeast protein disulfide isomerase (PDI), which comprises: a) modifying a gene encoding the yeast PDI in such a manner that the gene undergoes the deletion, substitution or addition of one or more bases in the region encoding an endoplasmic reticulum localization signal to thereby fail in encoding part or the whole of the localization signal, b) integrating the modified gene into an expression vector, c) transforming host cells with the resultant vector, and d) culturing the transformed host cells in a medium while keeping the pH of the medium near neutrality, thus secreting the PDI in an active state out of the host cells. This process makes it possible to secrete the recombinant yeast PDI in a biologically active state in a large amount in the medium and recover the PDI by a simple and convenient purification method.
(FR)L'invention concerne un procédé pour préparer une disulfure-isomérase de protéine de levure recombinée biologiquement active, consistant à a) modifier un gène codant pour la disulfure-isomérase de protéine de levure de telle manière que ce gène subisse la délétion, la substitution ou l'addition d'une ou plusieurs bases dans la région codant pour un signal de localisation du réticulum endoplasmique pour ainsi ne pas coder tout ou partie du signal de localisation, b) intégrer le gène modifié dans un vecteur d'expression, c) transformer les cellules hôtes avec le vecteur résultant, et d) mettre en culture les cellules hôtes transformées dans un milieu tout en maintenant le pH de ce milieu au voisinage de la neutralité, sécrétant ainsi la disulfure-isomérase de protéine dans un état actif à partir des cellules hôtes. Ce procédé permet de sécréter la disulfure-isomérase de protéine de levure recombinée, dans un état biologiquement actif, en grande quantité dans le milieu et de la récupérer à l'aide d'une technique de purification simple et pratique.
États désignés : JP, US.
Office européen des brevets (OEB) (DE, FR, GB).
Langue de publication : japonais (JA)
Langue de dépôt : japonais (JA)