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1. (WO1998025143) DETECTION ET DISPOSITIF DE DETECTION DE FLUORESCENCE BIOSPECIFIQUE, PAR EXCITATION A DEUX PHOTONS
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1998/025143    N° de la demande internationale :    PCT/FI1997/000704
Date de publication : 11.06.1998 Date de dépôt international : 18.11.1997
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    04.06.1998    
CIB :
G01N 33/543 (2006.01), G01N 33/557 (2006.01)
Déposants : SOINI, Erkki [FI/FI]; (FI).
HÄNNINEN, Pekka [FI/FI]; (FI) (US Seulement).
SOINI, Juhani [FI/FI]; (FI) (US Seulement)
Inventeurs : SOINI, Erkki; (FI).
HÄNNINEN, Pekka; (FI).
SOINI, Juhani; (FI)
Mandataire : TURUN PATENTTITOIMISTO OY; P.O. Box 99, FIN-20521 Turku (FI)
Données relatives à la priorité :
964826 03.12.1996 FI
971626 17.04.1997 FI
Titre (EN) BIOSPECIFIC, TWO PHOTON EXCITATION, FLUORESCENCE DETECTION AND DEVICE
(FR) DETECTION ET DISPOSITIF DE DETECTION DE FLUORESCENCE BIOSPECIFIQUE, PAR EXCITATION A DEUX PHOTONS
Abrégé : front page image
(EN)A method for measuring the end point and for monitoring the real time kinetics of a bioaffinity reaction in biological fluids and suspensions, employing microparticles as bioaffinity binding solid phase, biospecific reagent labelled with a fluorescent label and a fluorescence detection system which is based on two-photon fluorescence excitation, contacting the analyte, the labelled reagent and the solid phase simultaneously, focusing a two-photon exciting laser beam into the reaction suspension and measuring the fluorescence signal emitted by the microparticles from one particle at a time when they randomly float through the focal volume of the laser beam. In this method the signal is monitored kinetically for obtaining information about the concentration of the analyte before the reaction is approaching the highest point of the response. Since the growth rate of the signal intensity is directly proportional to the concentration of the analyte, the analyte concentration can be predicted in the initial phase of the reaction. The growth rate monitoring also predicts whether the analyte concentration is higher than the binding capacity of the reagent and whether the reaction will be continued over the highest point of the response curve. This method allows measurement of low and high concentrations without any risk for ambiguous results. The dynamic range of the assay can also be extended significantly. Combining the features of this invention allows a method and device for performing a fast, single-step, separation free biospecific assays with large dynamic range for very small sample volumes of body fluids, cell suspensions or other biological specimens.
(FR)L'invention concerne un procédé de mesure du point de virage et de contrôle de la cinétique en temps réel d'une réaction par bioaffinité dans des liquides et des suspensions biologiques. Dans ledit procédé, on utilise des microparticules comme phase solide de liaison par bioaffinité, un réactif biospécifique marqué par un marqueur fluorescent et un système de détection de fluorescence fonctionnant sur le principe de l'excitation de la fluorescence de deux photons. Ledit procédé consiste à mettre en contact simultanément l'analyte, le réactif marqué et la phase solide, à concentrer un faisceau laser d'excitation à deux photons dans la suspension réactionnelle et à mesurer le signal de fluorescence émis par les microparticules d'une particule au moment où elles flottent de manière aléatoire dans le volume focal du faisceau laser. Dans ce procédé, le signal est contrôlé sur le plan cinétique de sorte que soient obtenues des informations sur la concentration de l'analyte avant que la réaction approche du point de réponse le plus élevé. Etant donné que le taux de croissance de l'intensité du signal est directement proportionnel à la concentration d'analyte, la concentration d'analyte peut être prévue dans la phase initiale de la réaction. La surveillance du taux de croissance permet de prévoir également si la concentration de l'analyte est supérieure à la capacité de liaison du réactif et si la réaction va continuer au-delà du point le plus élevé de la courbe de réponse. Le procédé de l'invention permet la mesure de concentrations faibles et élevées sans risque de résultats ambigus. La plage dynamique de l'essai peut également être agrandie de manière sensible. La combinaison des caractéristiques de l'invention, permet de produire un procédé et un dispositif pour réaliser des essais biospécifiques exempts de séparation, rapides et en une seule étape, présentant une plage dynamique étendue pour des volumes d'échantillon très réduits de liquides biologiques, des suspensions de cellules ou d'autres spécimens biologiques.
États désignés : AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GE, GH, HU, ID, IL, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZW.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (GH, KE, LS, MW, SD, SZ, UG, ZW)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)