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1. (WO1998003633) PROCEDE ENZYMATIQUE POUR LA DISSOCIATION DE CELLULES DE TISSUS ANIMAUX ET SON APPLICATION
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1998/003633    N° de la demande internationale :    PCT/ES1997/000169
Date de publication : 29.01.1998 Date de dépôt international : 04.07.1997
CIB :
C12N 5/079 (2010.01), C12N 9/52 (2006.01)
Déposants : UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID [ES/ES]; Rectorado, Avenida de Seneca, 2, E-28040 Madrid (ES) (Tous Sauf US).
PRADA ELENA, Carmen [ES/ES]; (ES) (US Seulement).
LOPEZ LOPEZ, Rosario [ES/ES]; (ES) (US Seulement).
LOPEZ GALLARDO, Meritxell [ES/ES]; (ES) (US Seulement).
PRIETO PRIETO, Agustin [ES/ES]; (ES) (US Seulement)
Inventeurs : PRADA ELENA, Carmen; (ES).
LOPEZ LOPEZ, Rosario; (ES).
LOPEZ GALLARDO, Meritxell; (ES).
PRIETO PRIETO, Agustin; (ES)
Données relatives à la priorité :
P 9601641 24.07.1996 ES
Titre (EN) ENZYMATIC PROCESS FOR THE DISSOCIATION OF ANIMAL TISSUE CELLS AND APPLICATION OF SUCH PROCESS
(ES) PROCEDIMIENTO ENZIMATICO PARA LA DISOCIACION DE CELULAS DE TEJIDOS ANIMALES Y SU APLICACION
(FR) PROCEDE ENZYMATIQUE POUR LA DISSOCIATION DE CELLULES DE TISSUS ANIMAUX ET SON APPLICATION
Abrégé : front page image
(EN)The invention relates to a new process of disgregation of animal tissues, and specially of those of the CNS of vertebrae, which provides for the separation of viable cells, while preserving their native morphology, through the use of proteases of Streptomyces fradiae and in specific conditions (low ionic strength, osmolality between 175 and 300 mOsm/kg, pH between 6.2 and 7.4 and temperature between 32 and 36 °C) in the disgregation process. Said results which cannot be obtained with prior disgregation processes, represent an important improvement for applications such as a) the use of dissociated cells of the embryonic CNS in cell cultures for growth studies and pharmacological products, and neuronal transplants; b) use of neurones and glial cells dissociated from adult CNS in electrophysiological studies and fine location of molecules in subcellular structures; and c) purification of specific populations of cells for biochemical and genetic studies.
(ES)La invención objeto de esta patente consiste en un nuevo método de disgregación de tejidos animales, y en especial de los del SNC de los vertebrados, que permite separar células viables, conservando su morfología nativa, mediante el empleo de proteasas de Streptomyces fradiae y de condiciones específicas (baja fuerza iónica, osmolalidad entre 175-300 mOsm/kg, pH 6,2-7,4 y temperatura de 32-36 °C) en el proceso de disgregación. Estos resultados, no alcanzables con los procedimientos de disgregación anteriormente descritos, representan una mejora importante para aplicaciones tales como a) el uso de células disociadas del SNC embrionario en cultivos de células para estudios de desarrollo y farmacológicos, y transplantes neuronales; b) utilización de neuronas y células de glía disociadas del SNC adulto en estudios electrofisiológicos y de localización fina de moléculas en estructuras subcelulares; y c) purificación de poblaciones específicas de células para estudios bioquímicos y genéticos.
(FR)L'invention concerne un nouveau procédé de séparation des tissus animaux, et en particulier ceux du SNC des vertébrés, afin de séparer les cellules viables, tout en conservant leur morphologie native, à l'aide de protéases de Streptomyces fradiae et dans des conditions spécifiques (faible force ionique, osmolalité entre 175 et 300 mOsm/kg, pH entre 6,2 et 7,4 et température entre 32 et 36 °C) dans le processus de séparation. Ces résultats, qui ne peuvent être atteints avec les procédés de séparation antérieurs, représentent une amélioration importante pour des applications telles que a) l'utilisation de cellules dissociées du SNC embryonnaire dans des cultures de cellules pour des études de développement et de produits pharmacologiques ainsi que des transplants neuronaux; b) utilisation de neurones et de cellules gliales dissociées du SNC adulte dans des études électrophysiologiques et de localisation fine de molécules dans des structures subcellulaires; et c) purification de populations spécifiques de cellules pour des études biochimiques et génétiques.
États désignés : AU, CA, JP, US.
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE).
Langue de publication : espagnol (ES)
Langue de dépôt : espagnol (ES)