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1. (WO1998002574) PROCEDE POUR L'EXAMEN D'ACIDES NUCLEIQUES ET KITS D'EXAMEN
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1998/002574    N° de la demande internationale :    PCT/JP1997/002370
Date de publication : 22.01.1998 Date de dépôt international : 09.07.1997
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    19.12.1997    
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : WAKUNAGA PHARMACEUTICAL CO., LTD. [JP/JP]; 5-36, Miyahara 4-chome, Yodogawa-ku, Osaka-shi, Osaka 532 (JP) (Tous Sauf US).
SRL, INC. [JP/JP]; 41-19, Akebono-cho 2-chome, Tachikawa-shi, Tokyo 190 (JP) (Tous Sauf US).
OKA, Takanori [JP/JP]; (JP) (US Seulement)
Inventeurs : OKA, Takanori; (JP)
Mandataire : KOJIMA, Takashi; Ginza Morisawa Building, 3F, 13-19, Ginza 2-chome, Chuo-ku, Tokyo 104 (JP)
Données relatives à la priorité :
8/201176 11.07.1996 JP
Titre (EN) METHOD FOR EXAMINING NUCLEIC ACIDS AND EXAMINATION KITS
(FR) PROCEDE POUR L'EXAMEN D'ACIDES NUCLEIQUES ET KITS D'EXAMEN
Abrégé : front page image
(EN)Gene mutations or polymorphisms are surely detected, identified or determined by simple procedures within a short period of time directly from specimens containing the gene mutations or polymorphisms in a trace amount within specific regions in target nucleic acids. A method for examining nucleic acids which comprises amplifying a specific region of a target nucleic acid in a specimen to thereby prepare a double stranded sample DNA, adding an excessive amount of the above-mentioned sample DNA to a labeled standard DNA consisting of a double stranded nucleic acid which has a site capable of binding to a solid phase carrier in one strand and a detectable label on another strand to effect competitive hybridization, detecting the above-mentioned labeled standard DNA thus reconstituted with the use of the detectable label and the site capable of binding to a solid phase carrier, and thus determining the degree of the substitution of the complementary strands between the above-mentioned sample DNA and the above-mentioned labeled standard DNA to thereby detect the target DNA which is identical with the above-mentioned labeled standard DNA contained in the above-mentioned sample DNA, characterized in that the detection limit of the target DNA which is identical with the above-mentioned labeled standard DNA contained in the above-mentioned sample DNA is preliminarily specified and, in the step of the competitive hybridization, the extent of the excessiveness of the above-mentioned sample DNA to be added to the above-mentioned labeled standard DNA is specified depending on the detection limit thus specified; and examination kits for detecting, identifying and determining nucleic acids carrying gene mutations or polymorphisms in accordance with this examination method.
(FR)Grâce à cette invention des mutations ou des polymorphismes géniques sont détectés, identifiés ou déterminés en toute sécurité par des procédures simples en un temps court, directement à partir de spécimens contenant ces mutations ou polymorphisme génétique, dans une quantité trace, à l'intérieur de régions spécifiques d'acides nucléiques cibles. Un procédé pour examiner les acides nucléiques consiste à amplifier une région spécifique d'un acide nucléique cible dans un spécimen, afin de préparer un ADN échantillon à deux brins, à ajouter une quantité excédentaire de cet ADN échantillon à un ADN standard marqué, constitué d'un acide nucléique à deux brins possédant un site capable de se fixer à un support en phase solide dans l'un des brins et une marque détectable sur l'autre brin, pour créer une hybridation compétitive, à détecter l'ADN standard marqué mentionné ci-dessus, ainsi reconstitué à l'aide de la marque détectable et du site capable de se fixer à un support en phase solide, et, partant, à déterminer le dégré de substitution des brins complémentaires entre cet ADN échantillon et cet ADN standard marqué, afin de détecter l'ADN cible qui est identique à cet ADN standard marqué contenu dans cet ADN échantillon. Ce procédé se caractérise en ce que la limite de détection de l'ADN cible qui est identique à l'ADN standard marqué contenu dans l'ADN échantillon est spécifiée au préalable et en ce que, dans l'étape d'hybridation compétitive, la quantité d'excédent de l'ADN échantillon devant être ajouté à l'ADN standard marqué est spécifiée en fonction de la limite de détection ainsi spécifiée. Cette invention se rapporte en outre à des kits d'examen pour détecter, identifier et déterminer des acides nucléiques portant des mutations ou des polymorphismes géniques en fonction du procédé d'examen ainsi décrit.
États désignés : CA, JP, US.
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE).
Langue de publication : japonais (JA)
Langue de dépôt : japonais (JA)