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1. (WO1997000962) PROCEDE NOUVEAU D'ISOLEMENT DE MUTANTS ET DE CLONAGE DU GENE DE COMPLEMENT
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1997/000962    N° de la demande internationale :    PCT/NL1996/000259
Date de publication : 09.01.1997 Date de dépôt international : 24.06.1996
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    23.01.1997    
CIB :
C07K 14/38 (2006.01), C07K 14/47 (2006.01), C12N 9/04 (2006.01), C12N 9/24 (2006.01), C12N 9/88 (2006.01), C12N 15/10 (2006.01), C12N 15/63 (2006.01), C12N 15/65 (2006.01), C12N 15/80 (2006.01), C12Q 1/02 (2006.01)
Déposants : DANISCO INGREDIENTS A/S (DANISCO A/S) [DK/DK]; Edwin Rahrs Vej 38, DK-8220 Brabrand (DK) (Tous Sauf US).
DE GRAAFF, Leendert, Hendrik [NL/NL]; (NL) (US Seulement).
VAN DEN BROECK, Henriëtte, Catharina [NL/NL]; (NL) (US Seulement).
VISSER, Jacob [NL/NL]; (NL) (US Seulement)
Inventeurs : DE GRAAFF, Leendert, Hendrik; (NL).
VAN DEN BROECK, Henriëtte, Catharina; (NL).
VISSER, Jacob; (NL)
Mandataire : DE BRUIJN, Leendert, C.; Nederlandsch Octrooibureau, Scheveningseweg 82, P.O. Box 29720, NL-2502 LS The Hague (NL)
Données relatives à la priorité :
95201707.7 23.06.1995 EP
95202346.3 30.08.1995 EP
Titre (EN) A NOVEL METHOD TO ISOLATE MUTANTS AND TO CLONE THE COMPLEMENTING GENE
(FR) PROCEDE NOUVEAU D'ISOLEMENT DE MUTANTS ET DE CLONAGE DU GENE DE COMPLEMENT
Abrégé : front page image
(EN)The subject invention lies in the field of microorganism mutation and selection of the mutants. In particular, the invention is directed at obtaining metabolic mutants in a simple, direct and specific manner. In a preferred embodiment it is also possible to obtain desired mutants not comprising recombinant DNA, thereby facilitating incorporation thereof in products for human consumption or application, due to shorter legislative procedures. The method according to the invention involves random mutation and specific selection of the desired metabolic mutant. A nucleic acid cassette comprising a nucleic acid sequence encoding a bidirectional marker, said nucleic acid cassette further comprising a basic transcriptional unit operatively linked to the nucleic acid sequence encoding the bidirectional marker and said nucleic acid cassette further comprising an inducible enhancer or activator sequence linked to the basic transcription unit in such a manner that upon induction of the enhancer or activator sequence the bidirectional marker encoding nucleic acid sequence is expressed, said inducible enhancer or activator sequence being derived from a gene associated with activity of part of metabolism, said inducible enhancer or activator sequence being derived from a gene associated with metabolism is claimed as is application thereof in a selection method for mutants. In addition a regulator gene x1nR encoding an activating regulator of an inducible enhancer or activator sequence and application of said gene and/or its expression product in overexpression of homologous or heterologous protein or peptide is described. Knockout mutants wherein said gene is absent or inactivated and mutants with increased or decreased DNA binding capacity are also claimed.
(FR)La présente invention concerne le domaine de la mutation des microorganismes et de la sélection des mutants. L'invention vise en particulier à obtenir des mutants métaboliques d'une manière simple, directe et spécifique. Selon un mode de réalisation préférentiel, il est également possible d'obtenir des mutants désirés qui ne comportent pas d'ADN recombinant, ce qui facilite leur incorporation à des produits destinés à la consommation ou à une application humaines, grâce à des procédures législatives plus brèves. Le procédé de l'invention concerne la mutation aléatoire et la sélection spécifique du mutant métabolique désiré. Une cassette d'acide nucléique comprend une séquence d'acide nucléique encodant un codeur bidirectionnel, cette cassette d'acide nucléique comprenant en outre une unité de transcription de base liée, en ce qui concerne l'effet, à la séquence encodant le marqueur bidirectionnel, et cette cassette d'acide nucléique comprenant en outre une séquence inductible d'accroissement ou d'activation reliée à l'unité de transcription de base d'une manière telle que, lors de l'induction de la séquence d'accroissement ou d'activation, la séquence d'acide nucléique encodant le marqueur bidirectionnel est exprimée, cette séquence inductible d'accroissement ou d'activation provenant d'un gène associé à une activité d'une partie du métabolisme. Cette séquence inductible d'accroissement ou d'activation provenant d'un gène associé au métabolisme fait l'objet de l'invention, de même que son application dans une méthode de sélection pour mutants. De plus, l'invention concerne un gène régulateur xlnR qui encode un régulateur activateur d'une séquence inductible d'accroissement ou d'activation, et l'application de ce gène ou de son produit d'expression, ou les deux, dans la surexpression de protéines ou de peptides homologues ou hétérologues. Des mutants de knock-out dans lesquels le gène en question est absent ou rendu inactif et des mutants ayant une capacité de fixation d'ADN augmentée ou diminuée font également l'objet de l'invention.
États désignés : AL, AM, AT, AU, AZ, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GE, HU, IL, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, US, UZ, VN.
Organisation régionale africaine de la propriété intellectuelle (ARIPO) (KE, LS, MW, SD, SZ, UG)
Office eurasien des brevets (OEAB) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
Organisation africaine de la propriété intellectuelle (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)