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1. (WO1993016194) PROCEDE DE DETERMINATION D'ACIDES NUCLEIQUES AMPLIFIES $i(IN VITRO)
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1993/016194    N° de la demande internationale :    PCT/EP1993/000254
Date de publication : 19.08.1993 Date de dépôt international : 04.02.1993
CIB :
B01L 7/00 (2006.01), C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : DIAGEN INSTITUT FÜR MOLEKULAR-BIOLOGISCHE DIAGNOSTIK GMBH [DE/DE]; Max-Volmer-Straße 4, D-4010 Hilden (DE) (Tous Sauf US).
HENCO, Karsten [DE/DE]; (DE) (US Seulement).
EIGEN, Manfred [DE/DE]; (DE) (US Seulement).
RIESNER, Detlev [DE/DE]; (DE) (US Seulement)
Inventeurs : HENCO, Karsten; (DE).
EIGEN, Manfred; (DE).
RIESNER, Detlev; (DE)
Mandataire : MEYERS, Hans-Wilhelm; Deichmannhaus am Hauptbahnhof, D-50667 Köln 1 (DE)
Données relatives à la priorité :
P 42 03 178.8 05.02.1992 DE
P 42 34 086.1 09.10.1992 DE
Titre (DE) VERFAHREN ZUR BESTIMMUNG VON $i(IN VITRO) AMPLIFIZIERTEN NUKLEINSÄUREN
(EN) PROCESS FOR DETERMINING $i(IN VITRO) AMPLIFIED NUCLEIC ACIDS
(FR) PROCEDE DE DETERMINATION D'ACIDES NUCLEIQUES AMPLIFIES $i(IN VITRO)
Abrégé : front page image
(DE)Verfahren zur qualitativen und quantitativen Bestimmung von mindestens einer in vitro-amplifizierten Nukleinsäure in einem verschlossenen Reaktionsraum, wobei während oder nach der Amplifizierung der Nukleinsäure mindestens eine Substanz (Sonde) vorhanden ist, die mit der nachzuweisenden Nukleinsäure in Wechselwirkung tritt, wobei spektroskopisch meßbare Parameter der Substanz (Sonde) eine Änderung erfahren und dabei ein meßbares Signal erzeugt wird, die zu messende Probe der Einwirkung eines Gradienten ausgesetzt wird, der Nukleinsäuren mindestens teilweise denaturieren kann, unter Erfassung des sich durch die Einwirkung des Gradienten ändernden meßbaren Parameters und die gesamte Amplifikationsreaktion einschließlich der qualitativen und quantitativen Bestimmung in einem verschlossenen Reaktionsraum (Meßkompartiment) ohne zwischenzeitliche Öffnung durchführbar ist. Die Methode basiert auf einem Vergleich der Kopienzahl und der Sequenz einer zu analysierenden DNA oder RNA und einem internen Standard mit Hilfe eines zeitlichen Temperaturgradienten. Der Nachweis wird mit optischen Verfahren in homogenen oder heterogenen Phasen geführt und erfordert keine elektrophoretischen Trenntechniken. Der amplifizierte Reaktionsansatz kann auch während und nach der Analyse verschlossen bleiben. Damit wird z.B. eine Entsorgung unter vollständiger Vermeidung der Kontaminationsgefahr durch amplifizierte Reaktionsansätze möglich.
(EN)A process of the qualitative and quantitative determination of at least one $i(in vitro) amplified nucleic acid in a closed reaction chamber. In said process there is at least one substance (probe) during or after the amplification of the nucleic acid which enters into interaction with the nucleic acid to be detected; spectroscopically measurable parameters of the substance (probe) undergo a change and thereby a measurable signal is generated; the sample to be measured is exposed to the effect of a gradient which can at least partly denature the nucleic acids; the measurable parameter which alters through the effect of the gradient is measured; and the entire amplification reaction, including the qualitative and quantitative determination may be performed in a closed reaction chamber (measuring compartment) which does not have to be opened during the process. The method is based on a comparison of the copy number and sequence of a DNA or RNA to be analysed with an internal standard with the aid of a time-temperature gradient. Detection is performed with optical processes in homogeneous or heterogeneous phases and requires no electrophoretic separation methods. The amplified reaction process may remain closed both during and after analysis. This, for example, permits disposal by amplified reaction processes with no risk whatsoever of contamination.
(FR)Procédé de détermination qualitative et quantitative d'au moins un acide nucléique amplifié $i(in vitro) dans une chambre de réaction fermée. Selon ledit procédé il y a au moins une substance (sonde) pendant ou après l'amplification des acides nucléiques, qui entre en interaction avec l'acide nucléique qu'il faut identifier, des paramètres mesurables de manière spectroscopique de la substance (sonde) subissent un changement et un signal mesurable est produit à cette occasion, l'échantillon à mesurer est soumis à l'influence d'un gradient pouvant dénaturer au moins partiellement les acides nucléiques, le paramètre mesurable qui se modifie sous l'effet du gradient est mesuré, et la réaction globale d'amplification, y compris la détermination qualitative et quantitative, peut s'opérer dans une chambre de réaction fermée (compartiment de mesure) qui ne sera pas ouverte pendant le déroulement des opérations. La méthode se fonde sur une comparaison du nombre de copies et de la séquence d'un ADN ou d'un ARN à analyser par rapport à une référence interne, à l'aide d'un gradient temps-température. L'identification s'opère au moyen de procédés optiques dans des phases homogènes ou hétérogènes et ne nécessite pas de techniques de séparation électrophorétiques. Le processus réactionnel amplifié peut demeurer fermé pendant et après l'analyse. Cela permet par exemple une élimination par des processus réactionnels amplifiés, évitant tout risque de contamination.
États désignés : JP, US.
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE).
Langue de publication : allemand (DE)
Langue de dépôt : allemand (DE)