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1. (WO1993009245) HYBRIDATION INVERSE PAR BUVARDAGE EN TACHES A L'AIDE DE NOMONERES TANDEM EN TETE-A-QUEUE CONTENANT DES SONDES SYNTHESISEES PAR DES AMORCES COMPLEMENTAIRES DECALEES
Dernières données bibliographiques dont dispose le Bureau international   

N° de publication :    WO/1993/009245    N° de la demande internationale :    PCT/US1992/009113
Date de publication : 13.05.1993 Date de dépôt international : 22.10.1992
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 :    14.05.1993    
CIB :
C12Q 1/68 (2006.01)
Déposants : UNIVERSITY OF PITTSBURGH [US/US]; Cathedral of Learning, Pittsburgh, PA 15260 (US)
Inventeurs : RUDERT, William, A.; (US).
TRUCCO, Massimo; (US)
Mandataire : COLEN, Frederick, H.; Reed Smith Shaw & McClay, P.O. Box 2009, Pittsburgh, PA 15230 (US)
Données relatives à la priorité :
07/786,228 31.10.1991 US
Titre (EN) REVERSE DOT BLOT HYBRIDIZATION USING TANDEM HEAD-TO-TAIL MONOMERS CONTAINING PROBES SYNTHESIZED BY STAGGERED COMPLEMENTARY PRIMERS
(FR) HYBRIDATION INVERSE PAR BUVARDAGE EN TACHES A L'AIDE DE NOMONERES TANDEM EN TETE-A-QUEUE CONTENANT DES SONDES SYNTHESISEES PAR DES AMORCES COMPLEMENTAIRES DECALEES
Abrégé : front page image
(EN)A method of detecting the presence or absence of nucleic acid sequences, comprising binding to a substrate polymers of selected oligonucleotide probes which are complementary to a region in a nucleic acid sequence which is to be detected; contacting said substrate to which said probe polymers are bound with an amplified test DNA sample containing unknown oligonucleotide sequences, wherein a reporter moiety has been incorporated, such that complementary nucleotide sequences anneal; washing said substrate to remove unannealed amplified test DNA from said substrate; and detecting the presence or absence of reporter moieties retained by the oligonucleotide probes on said substrate. The polymers bound to the substrate contain multiple tandemly repeated copies of a specific oligonucleotide probe and may be synthesized using enzymatic amplification techniques. The described method may be used in reverse dot blot procedures and can be used for HLA molecular typing.
(FR)L'invention concerne un procédé de détection de l'absence ou de la présence de séquences d'acides nucléiques, consistant à lier à un substrat des polymères sondes d'oligonucléotides sélectionnés qui sont complémentaires à une région dans une séquence d'acide nucléique devant être détectée; à mettre en contact ledit substrat, auquel sont liés lesdits polymères sondes, avec un échantillon test d'ADN ampifié contenant des séquences d'oligonucléotides dans lesquelles on a incorporé une fraction reporter de façon à ce que les séquences nucléotidiques complémentaires s'hybrident; à laver ledit substrat afin d'enlever le test ADN amplifié non-hybridé à partir du substrat; et à détecter la présence ou l'absence de fractions reporter retenues par les sondes d'oligonucléotides sur ledit substrat. Les polymères liés au substrat contiennent des copies multiples répétées en tandem d'une sonde spécifique d'oligonucléotides et peuvent être synthétisées à l'aide de techniques d'amplification enzymatique. Le procédé décrit peut être utilisé dans des techniques de buvardage en taches ainsi que pour le groupage moléculaire du HLA.
États désignés : JP.
Office européen des brevets (OEB) (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, SE).
Langue de publication : anglais (EN)
Langue de dépôt : anglais (EN)