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1. WO1991014771 - SYSTEME DE MODIFICATION-RESTRICTION DE $i(Kpn)I CLONE

Numéro de publication WO/1991/014771
Date de publication 03.10.1991
N° de la demande internationale PCT/US1991/001924
Date du dépôt international 20.03.1991
Demande présentée en vertu du Chapitre 2 17.10.1991
CIB
C12N 9/10 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
9Enzymes, p.ex. ligases (6.); Proenzymes; Compositions les contenant; Procédés pour préparer, activer, inhiber, séparer ou purifier des enzymes
10Transférases (2.)
C12N 9/22 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
9Enzymes, p.ex. ligases (6.); Proenzymes; Compositions les contenant; Procédés pour préparer, activer, inhiber, séparer ou purifier des enzymes
14Hydrolases (3.)
16agissant sur les liaisons esters (3.1)
22Ribonucléases
CPC
C12N 9/1007
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof
10Transferases (2.)
1003transferring one-carbon groups (2.1)
1007Methyltransferases (general) (2.1.1.)
C12N 9/22
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof
14Hydrolases (3)
16acting on ester bonds (3.1)
22Ribonucleases ; RNAses, DNAses
Déposants
  • LIFE TECHNOLOGIES, INC. [US]/[US]
Inventeurs
  • CHATTERJEE, Deb, Kumar
  • HAMMOND, Alan, Wayne
Mandataires
  • FOX, Samuel, L.
Données relatives à la priorité
496,28320.03.1990US
Langue de publication anglais (EN)
Langue de dépôt anglais (EN)
États désignés
Titre
(EN) CLONED $i(Kpn)I RESTRICTION-MODIFICATION SYSTEM
(FR) SYSTEME DE MODIFICATION-RESTRICTION DE $i(Kpn)I CLONE
Abrégé
(EN)
The present invention discloses the cloning and expression in a host such as $i(Escherichia coli) of the $i(Kpn)I restriction-modification system from $i(Klebsiella pneumoniae), utilizing a two step protocol. Initial protection of the $i(E. coli) host with methylase expressed on a vector was required to stabilize a compatible vector carrying both the endonuclease and the methylase genes on a single DNA fragment. A chromosomal map was generated localizing the genes for $i(Kpn)I methylase and endonuclease. An $i(E. coli) strain was constructed which produced several thousand-fold higher levels of $i(Kpn)I endonuclease than the level produced by $i(Klebsiella pneumoniae). This invention is also directed to cloning and expression of genes encoding for restriction endonuclease isoschizomers of $i(Kpn)I and/or modification methylase isoschizomers of $i(Kpn)I methylase.
(FR)
Clonage et expression dans un hôte tel que $i(Escherichia coli) du système de modification-restriction à partir de $i(Klebsiella pneumoniae) utilisant un protocole à deux étapes. La protection initiale de l'hôte $i(E. coli) avec une méthylase exprimée sur un vecteur a été nécessaire pour stabiliser un vecteur compatible portant à la fois les gènes d'endonucléase et de méthylase dans un seul fragment d'ADN. Un carte chromosique a été dressée pour localiser les gènes de méthylase et d'endonucléase de $i(Kpn)I. On a construit une souche de $i(E. coli) qui produit des niveaux d'endonucléase $i(Kpn)I plus élevés de plusieurs milliers de fois que le niveau produit par $i(Klebsiella pneumoniae). La présente invention a aussi trait au clonage et à l'expression de gènes codant pour des isoschizomères d'endonucléase de restriction de $i(Kpn)I et/ou des isoschizomères de méthylase de modification de la méthylase $i(Kpn)I.
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