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Paramétrages

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1. WO1985001297 - PHAGES NON VIABLES, LEUR PRODUCTION ET LEUR ADN

Numéro de publication WO/1985/001297
Date de publication 28.03.1985
N° de la demande internationale PCT/US1984/001446
Date du dépôt international 13.09.1984
CIB
C12N 15/70 2006.01
CCHIMIE; MÉTALLURGIE
12BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
NMICRO-ORGANISMES OU ENZYMES; COMPOSITIONS LES CONTENANT; CULTURE OU CONSERVATION DE MICRO-ORGANISMES; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE; MILIEUX DE CULTURE
15Techniques de mutation ou génie génétique; ADN ou ARN concernant le génie génétique, vecteurs, p.ex. plasmides, ou leur isolement, leur préparation ou leur purification; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci
09Technologie d'ADN recombinant
63Introduction de matériel génétique étranger utilisant des vecteurs; Vecteurs; Utilisation d'hôtes pour ceux-ci; Régulation de l'expression
70Vecteurs ou systèmes d'expression spécialement adaptés à E. coli
CPC
C12N 15/70
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
70Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
Déposants
  • MATTSON, Thomas, Lee [US/CH]; CH
  • EPSTEIN, Richard [US/CH]; CH
Inventeurs
  • MATTSON, Thomas, Lee; CH
  • EPSTEIN, Richard; CH
Mandataires
  • WEGNER, Harold, C.; Wegner & Bretschneider 2030 M Street, North West Washington, DC 20036, US
Données relatives à la priorité
832447913.09.1983GB
Langue de publication anglais (EN)
Langue de dépôt anglais (EN)
États désignés
Titre
(EN) INVIABLE PHAGES, THEIR PRODUCTION AND DNA THEREOF
(FR) PHAGES NON VIABLES, LEUR PRODUCTION ET LEUR ADN
Abrégé
(EN)
Inviable T4 phage-like particles capable of directing the expression of large non-T4 DNA fragments from T4 expression control sequences are produced. Thus, E. coli harboring pBR322 derivatives containing cloned T4 gene 23 DNA sequences were infected with T4 phage carrying a deletion of the denB gene. Homology-dependent recombination results in the production of inviable phage-like particles containing DNA molecules composed of multiple, tandemly repeated copies of entire plasmid molecules covalently linked to single copies of normal phage genes. The yield of these inviable particles, initially low, was increased by means of a reiterated infection process that involves the use of a cloned T4 origin of replication. When T4 gene 32 expression control sequences linked in proper orientation to a DNA sequence coding for the non-T4 protein beta-galactosidase were also cloned in one such pBR322 derivative (pVH773), inviable phage particles capable of directing the synthesis of enzymatically active beta-galactosidase were produced. The present process is applicable to other T-even bacterio-phages.
(FR)
On produit des particules similaires aux phages T4 non viables capables de diriger l'expression de grands fragments d'ADN non T4 à partir de séquences de régulation de l'expression de T4. Ainsi des E. coli hébergeant des dérivés pBR322 contenant des séquences d'ADN du gène 23 de T4 cloné furent infectées avec un phage T4 portant une suppression du gène denB. Une recombinaison en fonction de l'homologie résulte dans la production de particules similaires à des phages non viables contenant des molécules d'ADN composées de multiples copies répétées deux par deux de molécules entières de plasmide reliées de manière covalente à des copies uniques de gène de phages normaux. Le rendement de ces particules non viables, initialement bas, fut accru grâce à un procédé d'infection réitérée impliquant l'utilisation d'un T4 cloné, origine de la copie. Lorsque des séquences de régulation de l'expression du gène 32 de T4 reliées selon une orientation correcte à une séquence d'ADN assurant le codage pour la beta-galactosidase protéinique non-T4 furent également clonées dans un tel dérivé pBR322 (pVH773), des particules de phages non viables capables de diriger la synthèse de la beta-galactosidase active sur le plan enzymatique furent produites. Le présent procédé est applicable à d'autres bactériophages similaires au T.
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