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1. (US20080014578) Method of multiplex microorganism detection

Office : États-Unis d'Amérique
Numéro de la demande : 10584393 Date de la demande : 24.12.2004
Numéro de publication : 20080014578 Date de publication : 17.01.2008
Numéro de délivrance : 08298758 Date de délivrance : 30.10.2012
Type de publication : B2
Référence PCT: Numéro de la demande :PCTJP2004019340 ; Numéro de publication : Cliquer pour voir les données
CIB :
C12Q 1/68
C CHIMIE; MÉTALLURGIE
12
BIOCHIMIE; BIÈRE; SPIRITUEUX; VIN; VINAIGRE; MICROBIOLOGIE; ENZYMOLOGIE; TECHNIQUES DE MUTATION OU DE GÉNÉTIQUE
Q
PROCÉDÉS DE MESURE, DE RECHERCHE OU D'ANALYSE FAISANT INTERVENIR DES ENZYMES OU DES MICRO-ORGANISMES; COMPOSITIONS OU PAPIERS RÉACTIFS À CET EFFET; PROCÉDÉS POUR PRÉPARER CES COMPOSITIONS; PROCÉDÉS DE COMMANDE SENSIBLES AUX CONDITIONS DU MILIEU DANS LES PROCÉDÉS MICROBIOLOGIQUES OU ENZYMOLOGIQUES
1
Procédés de mesure, de recherche ou d'analyse faisant intervenir des enzymes ou des micro-organismes; Compositions à cet effet; Procédés pour préparer ces compositions
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faisant intervenir des acides nucléiques
Déposants : Prima Meat Packers, Ltd.
National Agriculture and Food Research Organization
Inventeurs : Okada Yukio
Takeshita Kazuko
Sameshima Takashi
Kawamoto Shinichi
Isshiki Kenji
Données relatives à la priorité : 2003-435943 26.12.2003 JP
Titre : (EN) Method of multiplex microorganism detection
Abrégé : front page image
(EN)

The present invention is to provide a multiple detection method that can detect contaminating microorganisms existing in foods, including pathogenic Escherichia coli O157, Listeria monocytogenes and Salmonella spp., with high sensitivity comparable or even superior to official methods, comprising the steps of amplifying a plural number of target genes with a single PCR reaction tube and analyzing the same. The following steps are performed consecutively: (A) a step of extracting DNA of the target microorganisms to be detected by treating with at least a lytic enzyme such as Achromopepidase and Lysozyme and/or bacteriocin having lytic activity such as Enterolysine, a surfactant and a protein denaturing agent; and (B) a step of mixing a specific primer to the target microorganisms to be detected to perform multiplex PCR. Further, it is preferable to add a step of culturing with a culture condition where 1 CFU/100 g microorganisms becomes 10.sup.3 CFU/ml or more after 18 to 48 h of culture, for example that the pH after culture becomes 5.1 or more, before the step of extracting DNA of the target microorganisms to be detected.


Également publié sous:
EP1707638JP4621919WO/2005/064016