Traitement en cours

Veuillez attendre...

Paramétrages

Paramétrages

Aller à Demande

1. EP1294748 - COMPLEXES MAJEURS D'HISTOCOMPATIBILITE MONOCATENAIRES DE CLASSE 1, CONSTRUCTIONS LES CODANT ET LEURS METHODES DE PRODUCTION

Note: Texte fondé sur des processus automatiques de reconnaissance optique de caractères. Seule la version PDF a une valeur juridique

Revendications

1. Composition isolée comprenant une pluralité de complexes, chacun étant composé d'un peptide antigénique qui est capable de se lier au CMH de classe I humain ; et d'un polypeptide recombinant produit par des bactéries qui comprend une β-2 microglobuline humaine fonctionnelle fusionnée de manière traductionnelle en amont d'une chaîne lourde du CMH de classe I humain fonctionnelle, où ladite pluralité de complexes peut être reconnue par un seul clone de LTC spécifique.
  2. Composition isolée selon la revendication 1, comprenant en outre un peptide de liaison qui est interposé entre ladite β-2 microglobuline humaine fonctionnelle et ladite chaîne lourde du CMH de classe I humain fonctionnelle.
  3. Composition isolée selon la revendication 1, dans laquelle ledit peptide antigénique est fusionné de manière traductionnelle audit polypeptide.
  4. Préparation de corps d'inclusion dérivés de bactéries comprenant plus de 30 pour cent en poids d'un polypeptide recombinant ayant une séquence d'acides aminés qui comprend une β-2 microglobuline humaine fonctionnelle fusionnée de manière traductionnelle en amont d'une chaîne lourde du CMH de classe I humain fonctionnelle.
  5. Procédé pour produire un complexe CMH de classe I-peptide antigénique, consistant à :

(a) exprimer, dans des bactéries, un polypeptide du CMH de classe I simple chaîne qui comprend une séquence d'acides aminés de β-2 microglobuline humaine fonctionnelle fusionnée de manière traductionnelle en amont d'une séquence d'acides aminés de chaîne lourde du CMH de classe I humain fonctionnelle ;

(b) isoler ledit polypeptide du CMH de classe I simple chaîne ; et

(c) replier ledit polypeptide du CMH de classe I simple chaîne en présence d'un peptide antigénique qui est capable de se lier audit polypeptide du CMH de classe simple chaîne, de sorte à obtenir une pluralité de complexes CMH de classe I-peptide antigénique, ladite pluralité de complexes CMH de classe I-peptide antigénique pouvant être reconnue par un seul clone de LTC spécifique.


  6. Procédé selon la revendication 5, comprenant en outre l'étape consistant à :

(d) isoler ledit complexe CMH de classe I-peptide antigénique par une chromatographie d'exclusion stérique.


  7. Procédé selon la revendication 5, dans lequel l'étape (a) est réalisée de sorte que ledit polypeptide du CMH de classe I simple chaîne forme des corps d'inclusion dans lesdites bactéries.
  8. Procédé selon la revendication 7, dans lequel ladite étape d'isolation dudit polypeptide consiste en outre à dénaturer lesdits corps d'inclusion de sorte à libérer des molécules protéiques à partir de ceux-ci.
  9. Procédé selon la revendication 5, comprenant en outre la réduction dudit polypeptide du CMH de classe I simple chaîne avant l'étape (c).
  10. Procédé selon la revendication 5, dans lequel ledit repliement est réalisé dans des conditions de renaturation.
  11. Complexe du CMH de classe I multimérique comprenant une pluralité de monomères polypeptidiques recombinants produits par des bactéries, chacun comprenant une β-2 microglobuline humaine fonctionnelle fusionnée de manière traductionnelle en amont d'une chaîne lourde du CMH de classe I humain fonctionnelle.
  12. Complexe du CMH de classe I multimérique selon la revendication 11, dans lequel ladite pluralité de monomères polypeptidiques recombinants est liée à un substrat commun.
  13. Composition isolée selon la revendication 1, préparation de corps d'inclusion dérivés de bactéries selon la revendication 4, ou complexe du CMH de classe I multimérique selon la revendication 11, où ledit polypeptide recombinant comprend en outre une séquence peptidique pour une biotinylation site-spécifique.
  14. Procédé selon la revendication 5, dans lequel ledit polypeptide du CMH de classe I simple chaîne comprend en outre une séquence peptidique pour une biotinylation site-spécifique.
  15. Composition isolée selon la revendication 13, préparation de corps d'inclusion dérivés de bactéries selon la revendication 13, procédé selon la revendication 14, ou complexe du CMH de classe I multimérique selon la revendication 13, où la séquence peptidique pour une biotinylation site-spécifique est positionnée à l'extrémité C-terminale de ladite chaîne lourde du CMH de classe I.
  16. Composition isolée selon la revendication 13, préparation de corps d'inclusion dérivés de bactéries selon la revendication 13, procédé selon la revendication 15, ou complexe du CMH de classe I multimérique selon la revendication 13, où la séquence peptidique pour une biotinylation site-spécifique est décrite par SEQ ID NO: 17.