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1. WO2020128117 - PRODUCCION BIOTECNOLOGIA DE D-D!BOA Y SUS DERIVADOS CLORADOS A PARTIR DE SUS PRECURSORES NITROFENOXIDO-ACETATO

N.º de publicación WO/2020/128117
Fecha de publicación 25.06.2020
Nº de la solicitud internacional PCT/ES2019/000074
Fecha de presentación internacional 19.12.2019
CIP
C12N 9/06 2006.01
CQUIMICA; METALURGIA
12BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA
NMICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO
9Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen; Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas
02Oxidorreductasas (1.), p. ej. luciferasa
06actúan sobre compuestos que contienen nitrógeno como dadores (1.4, 1.5, 1.7)
C12N 15/53 2006.01
CQUIMICA; METALURGIA
12BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA
NMICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO
15Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello
09Tecnología del ADN recombinante
11Fragmentos de ADN o de ARN; sus formas modificadas
52Genes que codifican enzimas o proenzimas
53Oxidorreductasas (1)
C12N 15/70 2006.01
CQUIMICA; METALURGIA
12BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA
NMICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO
15Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello
09Tecnología del ADN recombinante
63Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión
70Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a E. coli
Solicitantes
  • UNIVERSIDAD DE CÁDIZ [ES]/[ES]
Inventores
  • BOLÍVAR PÉREZ, Jorge
  • VALLE GALLARDO, Antonio
  • CANTERO MORENO, Domingo
  • DE LA CALLE SIERRA, Maria Elena
Datos de prioridad
P20183127421.12.2018ES
Idioma de publicación Español (ES)
Idioma de solicitud Español (ES)
Estados designados
Título
(EN) BIOTECHNOLOGICAL PRODUCTION OF D-DIBOA AND ITS CHLORINATED DERIVATES FROM ITS NITROPHENOXIDE-ACETATE PRECURSORS
(ES) PRODUCCION BIOTECNOLOGIA DE D-D!BOA Y SUS DERIVADOS CLORADOS A PARTIR DE SUS PRECURSORES NITROFENOXIDO-ACETATO
(FR) PRODUCTION BIOTECHNOLOGIQUE DE D-DIBOA ET DE SES DÉRIVÉS CHLORÉS À PARTIR DE LEURS PRÉCURSEURS NITROPHÉNOXYACÉTATE
Resumen
(EN)
The purpose of the invention is the biotechnological production of D-DIBOA, a compound similar to the natural herbicide DIBOA, from the precursor 2-(2'-nitrophenoxy)-ethyl acetate. This synthesis is carried out either using, as a cellular biocatalyst, the E.coli strain ∆lapA∆fliQ/pBAD-NfsB, designed to optimise the process, or by means of in-vitro chemical reaction catalysed by the NfsB enzyme. Using the methodologies presented in cellular biocatalysis, yields of 100% or concentration of up 379% are achieved with respect to those reported until now. Alternatively, the use of purified NfsB enzyme allows D-DIBOA to be obtained in less time. This strategy using purified NfsB enzyme also allows the production of the compounds 6-CI-D-DIBOA and 8-CI-D-DIBOA, which display greater phytotoxic activity and greater selectivity than their analogue compound D-DIBOA, with high yields.
(ES)
La invención tiene como propósito la producción biotecnológica de D-DIBQA, un compuesto análogo al herbicida natural DIBOA, a partir del precursor 2-(2'-nitrofenoxi)- acetato de etilo. Esta síntesis se realiza bien utilizando como biocatalizador celular la cepa de E. coli DlapADfliQ/pBAD-NfsB diseñada para la optimización del proceso o bien mediante reacción química "in vitro" catalizada por el enzima NfsB. Utilizando las metodologías presentadas en la biocatálisis celular se logran rendimientos del 100% o se alcanzan concentraciones de hasta 379% respecto a lo reportado hasta el momento. Alternativamente, el uso de la enzima NfsB purificada permite la obtención de D-DíBGA en menor tiempo. Esta estrategia empleando la enzima NfsB purificada también permite la producción de los compuestos 6-CI-D-DIBOA y 8-CI-D-DIBOA, que presentan una mayor actividad fitotóxica y una mayor selectividad que su compuesto análogo D-DIBOA con elevados rendimientos.
(FR)
La présente invention concerne la production biotechnologique de D-DIBOA, un composé analogue à l'herbicide naturel DIBOA, à partir du précurseur 2-(2'-nitrophénoxy)-acétate d'éthyle. Cette synthèse est réalisée soit en utilisant en tant que biocatalyseur cellulaire la souche de E. coli DlapADfliQ/pBAD-NfsB conçue pour l'optimisation du processus soit par une réaction chimique "in vitro" catalysée par l'enzyme NfsB. Au moyen des méthodologies présentées dans la biocatalyse cellulaire on obtient des rendements de 100% ou on atteint des concentrations allant jusqu'à 379% par rapport à ce qui est reporté jusqu'à présent. Dans une autre forme de réalisation, l'utilisation de l'enzyme NfsB purifiée permet d'obtenir du D-DIBOA en un temps plus court. Cette stratégie consistant à employer l'enzyme NfsB purifiée permet également de produire les composés 6-CI-D-DIBOA et 8-CI-D-DIBOA, qui présentent une meilleure activité philotoxique et une meilleure sélectivité que leur composé analogue D-DIBOA avec des rendements élevés.
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