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1. (WO2018111914) METHODS FOR ASSEMBLING DNA MOLECULES
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Nº de publicación: WO/2018/111914 Nº de la solicitud internacional: PCT/US2017/065877
Fecha de publicación: 21.06.2018 Fecha de presentación de la solicitud internacional: 12.12.2017
CIP:
C12N 15/09 (2006.01) ,C12N 15/10 (2006.01) ,C12P 19/34 (2006.01)
C QUIMICA; METALURGIA
12
BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA
N
MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO
15
Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello
09
Tecnología del ADN recombinante
C QUIMICA; METALURGIA
12
BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA
N
MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO
15
Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello
09
Tecnología del ADN recombinante
10
Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN
C QUIMICA; METALURGIA
12
BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA
P
PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA
19
Preparación de compuestos que contienen radicales sacárido
26
Preparación de hidratos de carbono que contienen nitrógeno
28
N-glucósidos
30
Nucleótidos
34
Polinucleótidos, p. ej. ácidos nucleicos, oligorribonucleótidos
Solicitantes:
SYNTHETIC GENOMICS, INC. [US/US]; 11149 North Torrey Pines Road, Suite 100 La Jolla, CA 92037, US
Personas inventoras:
GILL, John, E.; US
GIBSON, Daniel, G.; US
FU, Lixia; US
Mandataria/o:
HAILE, Lisa, A.; US
HIERHOLZER, Matthew, J.; US
LIMBACH, Alan, A.; US
HWANG, Pamela, E.; US
JACKSON, Blake; US
Datos de prioridad:
62/434,30014.12.2016US
Título (EN) METHODS FOR ASSEMBLING DNA MOLECULES
(FR) PROCÉDÉS D’ASSEMBLAGE DE MOLÉCULES D’ADN
Resumen:
(EN) The invention provides compositions and methods for assembling a DNA molecule having a desired sequence. The methods involve contacting a DNA polymerase, dNTPs, and a plurality of pairs of oligonucleotides. The oligonucleotides of a pair have a portion of the desired sequence, and an internal sequence that overlaps and is complementary to an internal sequence of the other oligonucleotide of the pair, and, when arranged in order, they have at least a portion of the desired sequence. The oligonucleotides also have a 3' or a 5' primer binding sequence having a binding site for a primer. The oligonucleotides that correspond to the end oligonucleotides of the desired sequence also have a universal 3' flanking sequence and a universal 5' flanking sequence, respectively. The methods involve performing a first amplification reaction on the plurality of pairs of oligonucleotides; removing the 3' and 5' primer binding sequences from the plurality of pairs of oligonucleotides; and subjecting the plurality of pairs of oligonucleotides to an assembly reaction to thereby assemble the dsDNA molecule having the desired sequence.
(FR) La présente invention concerne des compositions et des procédés d’assemblage d’une molécule d’ADN présentant une séquence souhaitée. Les procédés consistent à mettre en contact une ADN polymérase, des dNTP, et une pluralité de paires d’oligonucléotides. Les oligonucléotides d’une paire présentent une partie de la séquence souhaitée, et une séquence interne qui chevauche et qui est complémentaire d’une séquence interne de l’autre oligonucléotide de la paire, et, lorsque disposées dans l’ordre, elles possèdent au moins une partie de la séquence souhaitée. Les oligonucléotides possèdent également une séquence de liaison d’amorce (3’) ou (5’) ayant un site de liaison pour une amorce. Les oligonucléotides qui correspondent aux oligonucléotides terminaux de la séquence souhaitée possèdent respectivement également une séquence flanquante (3’) universelle et une séquence flanquante (5’) universelle. Les procédés consistent à effectuer une première réaction d’amplification sur la pluralité de paires d’oligonucléotides ; à éliminer les séquences de liaison d’amorce (3’) et (5’) de la pluralité des paires d’oligonucléotides ; et à soumettre la pluralité des paires d’oligonucléotides à une réaction d’assemblage pour assembler ainsi la molécule d’ADNdb possédant la séquence souhaitée.
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African Regional Intellectual Property Organization (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Oficina Eurasiática de Patentes (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
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Organización Africana de la Propiedad Intelectual (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Idioma de publicación: Inglés (EN)
Idioma de la solicitud: Inglés (EN)