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1. (WO2010139837) COMPLEJOS COVALENTES DE LIPASAS CON PROTEÍNAS, SONDAS DE ADN, COFACTORES U OTRAS BIOMOLÉCULAS
Datos bibliográficos más recientes de la Oficina Internacional   

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Nº de publicación:    WO/2010/139837    Nº de la solicitud internacional:    PCT/ES2010/070368
Fecha de publicación: 09.12.2010 Fecha de presentación de la solicitud internacional: 01.06.2010
CIP:
C12N 11/08 (2006.01), C12N 11/10 (2006.01)
Solicitantes: CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTÍFICAS (CSIC) [ES/ES]; C/ Serrano, 117 E-28006 Madrid (ES) (Todos excepto los EE.UU.).
GUISAN SEIJAS, José Manuel [ES/ES]; (ES) (Únicamente los EE.UU.).
BILIVAR BOLIVAR, Juan Manuel [ES/ES]; (ES) (Únicamente los EE.UU.).
MATEO GONZÁLEZ, César [ES/ES]; (ES) (Únicamente los EE.UU.).
BATALLA BOSQUET, Pilar [ES/ES]; (ES) (Únicamente los EE.UU.).
LÓPEZ GALLEGO, Fernando [ES/ES]; (ES) (Únicamente los EE.UU.).
MACIELLO, Marzia [IT/ES]; (ES) (Únicamente los EE.UU.).
PALOMO CARMONA, José Miguel [ES/ES]; (ES) (Únicamente los EE.UU.).
FERNÁNDEZ LORENTE, Gloria [ES/ES]; (ES) (Únicamente los EE.UU.)
Personas inventoras: GUISAN SEIJAS, José Manuel; (ES).
BILIVAR BOLIVAR, Juan Manuel; (ES).
MATEO GONZÁLEZ, César; (ES).
BATALLA BOSQUET, Pilar; (ES).
LÓPEZ GALLEGO, Fernando; (ES).
MACIELLO, Marzia; (ES).
PALOMO CARMONA, José Miguel; (ES).
FERNÁNDEZ LORENTE, Gloria; (ES)
Mandataria/o: PONS ARIÑO, Ángel; Glorieta de Rubén Darío, 4 E-28010 Madrid (ES)
Datos de prioridad:
P 200930242 01.06.2009 ES
Título (EN) COVALENT COMPLEXES OF LIPASES WITH PROTEINS, DNA PROBES, COFACTORS OR OTHER BIOMOLECULES
(ES) COMPLEJOS COVALENTES DE LIPASAS CON PROTEÍNAS, SONDAS DE ADN, COFACTORES U OTRAS BIOMOLÉCULAS
(FR) COMPLEXES COVALENTS DE LIPASES AVEC DES PROTÉINES, DES SONDES D'ADN, DES COFACTEURS OU D'AUTRES MOLÉCULES
Resumen: front page image
(EN)The invention relates to complexes that include lipases covalently bonded, by means of regions not involved in the active centre thereof, to biomolecules of interest (proteins such as enzymes, antibodies or proteins A or G, cofactors or DNA probes). The complexes can be immobilised via the intact active centre of the lipases on all types of hydrophobic media, without requiring any modifications or activations thereof. The bonding of the lipase to the hydrophobic media is reversible, allowing the reversible immobilisation of the complexes. The invention provides two methods, chemical and biological, for preparing said complexes, as well as a method for immobilising said complexes. Said immobilised complexes can be used in industry, in laboratories or in diagnostics, given the potential use thereof as biocatalysts or as biosensors. The chemical method includes adsorbing the lipase to a porous hydrophobic medium, combining the lipase thus adsorbed with the biomolecule, and desorbing said complex from the medium using detergents. The biological method includes inserting the gene of the biomolecule in a plasmid containing the gene of the lipase, in a microorganism, in order for the latter to express the lipase fused with the biomolecule. The reversible immobilisation of the complexes generated using either of the two methods can be carried out on non-porous hydrophobic media.
(ES)Complejos que comprenden lipasas unidas covalentemente, a través de regiones no involucradas en su centro activo, a biomoléculas de interés (proteínas, como enzimas, anticuerpos o proteínas A o G, cofactores o sondas de ADN). Los complejos se pueden inmovilizar a través del centro activo intacto de las lipasas sobre todo tipo de soportes hidrofóbicos sin necesidad de realizar modificaciones o activaciones en los mismos. La unión de la lipasa a los soportes hidrofóbicos es reversible, lo que permite la inmovilización reversible de los complejos. La invención proporciona dos métodos, químico y biológico, de preparación de estos complejos y un método de inmovilización de los mismos. Estos complejos inmovilizados pueden tener aplicaciones en la industria, en el laboratorio o en diagnóstico, debido a su uso potencial como biocatalizadores o como biosensores. El método químico comprende la adsorción de la lipasa a un soporte hidrofóbico poroso, la conjugación de la lipasa así adsorbida con la biomolécula y desorber este complejo del soporte mediante el uso de detergentes. El método biológico comprende la inserción del gen de la biomolécula en un plásmido conteniendo el gen de la lipasa, en un microorganismo, para que éste exprese la lipasa fusionada a la biomolécula. La inmovilización reversible de los complejos creados a partir de cualquiera de los dos métodos se puede realizar en soportes hidrofóbicos no porosos.
(FR)L'invention concerne des complexes qui comprennent des lipases liées de manière covalente, par l'intermédiaire de régions non impliquées dans leur centre actif, à des molécules d'intérêt (protéines, tel que des enzymes, des anticorps ou des protéines A ou G, des cofacteurs ou des sondes d'ADN). Les complexes peuvent être immobilisés par l'intermédiaire du centre actif intact des lipases sur tout type de supports hydrophobes sans qu'il soit nécessaire de procéder à des modifications ou à des activations de ces derniers. La liaison de la lipase aux supports hydrophobes est réversible, ce qui permet l'immobilisation réversible des complexes. L'invention concerne deux méthodes, chimique et biologique, de préparation de ces complexes et une méthode d'immobilisation de ces derniers. Ces complexes immobilisés peuvent être utilisés dans l'industrie, en laboratoire ou en diagnostic, du fait de leur utilisation éventuelle en tant que biocatalyseurs ou en tant que biocapteurs. La méthode chimique comprend l'adsorption de la lipase sur un support hydrophobe poreux, la conjugaison de la lipase ainsi adsorbée avec la biomolécule et la désorption de ce complexe du support à travers l'utilisation de détergents. La méthode biologique comprend l'insertion du gène de la biomolécule dans un plasmide contenant le gène de la lipase, dans un microorganisme, pour que celui-ci exprime la lipase fusionnée à la biomolécule.
Estados designados: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Organización Regional Africana de la Propiedad Intelectual (ORAPI) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Organización Eurasiática de Patentes (OEAP) (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
Oficina Europea de Patentes (OEP) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, SE, SI, SK, SM, TR)
Organización Africana de la Propiedad Intelectual (OAPI) (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Idioma de publicación: español (ES)
Idioma de la solicitud: español (ES)