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1. WO1997026359 - SISTEMA DE EXPRESION DE ANTIGENOS HETEROLOGOS COMO PROTEINAS DE FUSION

N.º de publicación WO/1997/026359
Fecha de publicación 24.07.1997
Nº de la solicitud internacional PCT/CU1997/000001
Fecha de presentación internacional 17.01.1997
CIP
A61K 39/00 2006.01
ANECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA
61CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE
KPREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO
39Preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos
C07K 14/16 2006.01
CQUIMICA; METALURGIA
07QUIMICA ORGANICA
KPEPTIDOS
14Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados
005de origen vírico
08Virus ARN
15Retroviridae, p. ej. virus de la leucemia bovina, virus de la leucemia felina, virus linfotrópico de células T humanas
155Lentiviridae, p. ej. virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), virus visnamaedi, virus de la anemia infecciosa equina
16VIH-1
C07K 14/22 2006.01
CQUIMICA; METALURGIA
07QUIMICA ORGANICA
KPEPTIDOS
14Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados
195de origen bacteriano
22de Neisseriaceae (F), p. ej. Acinetobacter
C07K 16/12 2006.01
CQUIMICA; METALURGIA
07QUIMICA ORGANICA
KPEPTIDOS
16Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales
12contra materiales bacterianos
C12N 15/62 2006.01
CQUIMICA; METALURGIA
12BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA
NMICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO
15Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello
09Tecnología del ADN recombinante
11Fragmentos de ADN o de ARN; sus formas modificadas
62Secuencias de ADN que codifican proteínas de fusión
CPC
A61K 39/00
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
39Medicinal preparations containing antigens or antibodies
A61P 31/04
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
31Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
04Antibacterial agents
A61P 31/12
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
31Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
12Antivirals
C07K 14/005
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
14Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
005from viruses
C07K 14/22
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
14Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
195from bacteria
22from Neisseriaceae (F)
C07K 16/1217
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
16Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
12against material from bacteria
1203from Gram-negative bacteria
1217from Neisseriaceae (F), e.g. Acinetobacter
Solicitantes
  • CENTRO DE INGENIERIA GENETICA Y BIOTECNOLOGIA (CIGB) [CU]/[CU] (AllExceptUS)
  • DUARTE CANO, Carlos Antonio [CU]/[CU] (UsOnly)
  • GUILLEN NIETO, Gerardo Enrique [CU]/[CU] (UsOnly)
  • ALVAREZ ACOSTA, Anabel [CU]/[CU] (UsOnly)
  • CARPIO MUÑOZ, Emilio Luis [CU]/[CU] (UsOnly)
  • QUINTANA VAZQUEZ, Diógenes [CU]/[CU] (UsOnly)
  • GOMEZ RODRIGUEZ, Carmen Elena [CU]/[CU] (UsOnly)
  • SILVA RODRIGEZ, Ricardo de la Caridad [CU]/[CU] (UsOnly)
  • NAZABAL GALVEZ, Consuelo [CU]/[CU] (UsOnly)
  • LEAL ANGULO, María de Jesús [CU]/[CU] (UsOnly)
  • MARTIN DUNN, Alejandro Miguel [CU]/[CU] (UsOnly)
Inventores
  • DUARTE CANO, Carlos Antonio
  • GUILLEN NIETO, Gerardo Enrique
  • ALVAREZ ACOSTA, Anabel
  • CARPIO MUÑOZ, Emilio Luis
  • QUINTANA VAZQUEZ, Diógenes
  • GOMEZ RODRIGUEZ, Carmen Elena
  • SILVA RODRIGEZ, Ricardo de la Caridad
  • NAZABAL GALVEZ, Consuelo
  • LEAL ANGULO, María de Jesús
  • MARTIN DUNN, Alejandro Miguel
Mandatarios
  • MORENO SAMPER, Olga, Lidia
Datos de prioridad
10/9617.01.1996CU
Idioma de publicación Español (ES)
Idioma de solicitud Español (ES)
Estados designados
Título
(EN) SYSTEM FOR THE EXPRESSION OF HETEROLOGOUS ANTIGENS AS FUSION PROTEINS
(ES) SISTEMA DE EXPRESION DE ANTIGENOS HETEROLOGOS COMO PROTEINAS DE FUSION
(FR) SYSTEME D'EXPRESSION D'ANTIGENES HETEROLOGUES EN TANT QUE PROTEINES DE FUSION
Resumen
(EN)
The present invention relates to biotechnology and genetic engineering, particularly the expression of heterologous proteins in microorganisms through their fusion, by applying the recombinant DNA technology, to bacterial peptides. The present invention provides an efficient process for the expression in $i(Escherichia coli) of heterologous proteins as fusion polypeptides with a view to obtaining them with a high degree of purity, in commercially useful amounts, and in an oppropriate form for their inclusion in vaccine preparations intended to human use. To this effect, what is essentially used is a stabilizing sequence derived from the first 47 aminoacids of the antigen P64k of $i(Neisseria meningitidis) B:4 :P1.15. In particular, use is made of a recombinant plasmide containing said sequence, under the control of the triptophane promotor of $i(E. coli) and of the terminator of the transcription of the phage T4, including restriction sites which provide for the cloning in phase of DNA fragments coding for polypeptides of interest. The process of the invention is applicable to the pharmaceutical industry, for the development of diagnostic systems, vaccine preparations, and in any situation where it is required to obtain high amounts of heterologous proteins as fusion polypeptides in $i(E. coli).
(ES)
La presente invención está relacionada con la rama de la biotecnología y la ingeniería genética, particularmente con la expresión de proteínas heterólogas en microorganismos mediante su fusión, usando la tecnología del ADN recombinante, a péptidos bacterianos. Mediante la presente invención se proporciona un procedimiento eficaz para la expresión en $i(Escherichia coli) de proteínas heterólogas como polipéptidos de fusión con vistas a su obtención con un alto grado de pureza, en cantidades comercialmente útiles, y de forma que permita su inclusión en preparados vacunales destinados al uso en humanos. Para ello se emplea esencialmente una secuencia estabilizadora derivada de los primeros 47 aminoácidos del antígeno P64k de $i(Neisseria meningitidis) B:4 :P1.15. En particular, se usa un plasmidio recombinante conteniendo dicha secuencia bajo el control del promotor triptófano de $i(E. coli) y del terminador de la transcripción del fago T4, incluyendo sitios de restricción que permiten la clonación en fase de fragmentos de ADN codificantes para polipéptidos de interés. El procedimiento objeto de la presente invención es aplicable en la industria farmacéutica, para el desarrollo de sistemas de diagnóstico, de preparados vacunales, y en cualquier situación donde sea necesaria la obtención en grandes cantidades de proteínas heterólogas como polipéptidos de fusión en $i(E. coli).
(FR)
La présente invention concerne la biotechnologie et l'ingénierie génétique, en particulier l'expression de protéines hétérologues par des micro-organismes par l'intermédiaire de leurs fusions, par application de la technologie de l'ADN recombinant, ayant peptides bactériens. La présente invention fournit un procédé efficace d'expression dans $i(Escherichia coli) de protéines hétérologues en tant que polypeptides de fusion en vue de leur obtention avec un degré élevé de pureté, en quantités commercialement utiles, et sous une forme permettant leur inclusion dans des préparations vaccinales destinées à un usage chez les êtres humains. A cet effet, on utilise essentiellement une séquence stabilisatrice dérivée des premiers 47 aminoacides de l'antigène P64k de $i(Neisseria meningitidis) B:4 :P1.15. En particulier, on utilise un plasmide recombinant contenant ladite séquence sous le contrôle du promoteur triptophane de $i(E. coli) et de la terminaison de la transcription du phage T4, y compris des sites de restriction qui permettent le clonage en phase de fragments d'ADN codant pour des polypeptides d'intérêt. Le procédé de la présente invention s'applique à l'industrie pharmaceutique, au développement de systèmes de diagnostic, à des préparations vaccinales, et dans toute situation où il est nécessaire d'obtenir de grandes quantités de protéines hétérologues en tant que polypeptides de fusion dans $i(E. coli).
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