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1. WO2022007224 - METHOD, COMPOSITION AND KIT FOR FLUORESCENT QUANTITATIVE PCR, AND USE THEREOF

Publication Number WO/2022/007224
Publication Date 13.01.2022
International Application No. PCT/CN2020/120819
International Filing Date 14.10.2020
IPC
C12Q 1/686 2018.1
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
1Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
68involving nucleic acids
6844Nucleic acid amplification reactions
686Polymerase chain reaction
Applicants
  • 圣湘生物科技股份有限公司 SANSURE BIOTECH INC. [CN]/[CN]
Inventors
  • 戴立忠 DAI, Lizhong
  • 纪博知 JI, Bozhi
  • 谭德勇 TAN, Deyong
  • 刘佳 LIU, Jia
  • 范旭 FAN, Xu
  • 邓中平 DENG, Zhongping
Agents
  • 广州华进联合专利商标代理有限公司 ADVANCE CHINA IP LAW OFFICE
Priority Data
202010649826.608.07.2020CN
Publication Language Chinese (zh)
Filing Language Chinese (ZH)
Designated States
Title
(EN) METHOD, COMPOSITION AND KIT FOR FLUORESCENT QUANTITATIVE PCR, AND USE THEREOF
(FR) PROCÉDÉ, COMPOSITION ET KIT POUR LA PCR QUANTITATIVE PAR FLUORESCENCE, ET LEUR UTILISATION
(ZH) 用于荧光定量PCR的方法、组合物、试剂盒及其用途
Abstract
(EN) The present invention relates to the field of molecular biology detection, more particularly to a method for fluorescent quantitative PCR. The method comprises: 1) mixing an upstream and downstream primer pair, a fluorescent probe, and a PCR amplification reagent; and 2) carrying out the fluorescent quantitative PCR, wherein the fluorescent probe has two quenching groups, in which the first quenching group is located at the 3' end and the second quenching group is labeled on the T base and is 10-15 nt apart from the first quenching group. By means of using the method for fluorescent quantitative PCR, background signals in the fluorescent quantitative PCR can be reduced, and furthermore, the sensitivity of PCR is improved, the occurrence of false negative detection is reduced, and the amplification efficiency of the fluorescent quantitative PCR can also be improved.
(FR) La présente invention concerne un procédé de PCR quantitative par fluorescence. Le procédé comprend les étapes suivantes : 1) mélange d'une paire d'amorces amont et aval, d'une sonde fluorescente et d'un réactif d'amplification par PCR; et 2) réalisation de la PCR quantitative par fluorescence, la sonde fluorescente ayant deux groupes d'extinction, le premier groupe d'extinction étant situé à l'extrémité 3' et le second groupe d'extinction étant marqué sur la base T et distant de 10 à 15 nt du premier groupe d'extinction. En utilisant le procédé de PCR quantitative par fluorescence, les signaux de fond dans la PCR quantitative par fluorescence peuvent être réduits, et en outre, la sensibilité de la PCR est améliorée, l'occurrence de la détection de faux négatifs est réduite, et l'efficacité d'amplification de la PCR quantitative par fluorescence peut également être améliorée.
(ZH) 涉及分子生物学检测领域,更具体地,涉及一种荧光定量PCR的方法,所述方法包括:1)将上下游引物对、荧光探针以及PCR扩增试剂混合;2)进行荧光定量PCR;其中,所述荧光探针上带有两个淬灭基团,其中,第一淬灭基团位于3'末端,而第二淬灭基团标记在T碱基上且与所述第一淬灭基团相隔10~15nt。使用所述荧光定量PCR方法能够降低荧光定量PCR中的本底信号,进一步提升PCR的灵敏度,降低检测假阴性的出现,并且还能够提高荧光定量PCR扩增效率。
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