(EN) A recombinant lentiviral vector comprising a coding sequence for an OR protein fused to a coding sequence for a fluorescent protein or a subunit of a fluorescent protein, and a promoter active in human cells operatively linked to the coding sequences. A recombinant lentivirus comprising a recombinant genome comprising an RNA that generates an ANCH sequence upon retrotranscription. A recombinant eukaryotic cell comprising a genomically integrated DNA copy of the recombinant lentiviral vector. A method of observing lentiviral DNA in a eukaryotic cell, comprising: providing a recombinant eukaryotic cell that produces a fusion protein comprising an OR protein, fused to a fluorescent protein or a subunit of a fluorescent protein; infecting the recombinant eukaryotic cell with a recombinant lentivirus comprising a recombinant genome comprising an RNA that generates an ANCH sequence upon retrotranscription, under conditions sufficient for reverse transcription of the recombinant lentiviral genome comprising an ANCH sequence; allowing the OR protein to bind to the ANCH sequence; and detecting the fluorescent protein or subunit of the fluorescent protein to thereby observe the lentiviral DNA in the eukaryotic cell. This tool can be suitable also for in vivo applications (e.g. humanized mice) as well as for screening of new antiretroviral compounds. The HIV-1 ANCHOR system can be extended to the study of other viruses or for the screening of antiviral compounds, e.g. against SARS-CoV2.
(FR) L'invention concerne un vecteur lentiviral de recombinaison comprenant une séquence codante pour une protéine OR fusionnée à une séquence codante pour une protéine fluorescente ou une sous-unité d'une protéine fluorescente, et un promoteur actif dans des cellules humaines fonctionnellement liées aux séquences codantes. L'invention concerne également un lentivirus de recombinaison comprenant un génome de recombinaison comprenant un ARN qui génère une séquence ANCH lors de la rétrotranscription. Une cellule eucaryote de recombinaison comprend une copie d'ADN génomiquement intégrée du vecteur lentiviral de recombinaison. L'invention concerne également un procédé d'observation d'ADN lentiviral dans une cellule eucaryote, consistant à : utiliser une cellule eucaryote de recombinaison qui produit une protéine de fusion comprenant une protéine OR, fusionnée à une protéine fluorescente ou à une sous-unité d'une protéine fluorescente ; infecter la cellule eucaryote de recombinaison avec un lentivirus de recombinaison comprenant un génome de recombinaison comprenant un ARN qui génère une séquence ANCH lors de la rétrotranscription, dans des conditions suffisantes pour la transcription inverse du génome lentiviral de recombinaison comprenant une séquence ANCH ; permettre à la protéine OR de se lier à la séquence ANCH ; et détecter la protéine fluorescente ou la sous-unité de la protéine fluorescente pour ainsi observer l'ADN lentiviral dans la cellule eucaryote. Cet outil peut également être approprié pour des applications in vivo (par exemple des souris humanisées) ainsi que pour le criblage de nouveaux composés antirétroviraux. Le système ANCHOR VIH-1 peut être étendu à l'étude d'autres virus ou pour le criblage de composés antiviraux, par exemple contre le SARS-CoV2.