Processing

Please wait...

Settings

Settings

Goto Application

1. WO2020197446 - METHOD FOR OBTAINING RECOMBINANT BETA-1,4-GALACTOSIDASE BGAA FROM STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE

Publication Number WO/2020/197446
Publication Date 01.10.2020
International Application No. PCT/RU2020/050060
International Filing Date 25.03.2020
IPC
A61K 38/47 2006.01
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
38Medicinal preparations containing peptides
16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
43Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
46Hydrolases (3)
47acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
C12N 9/38 2006.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes, e.g. ligases (6.); Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating, or purifying enzymes
14Hydrolases (3.)
24acting on glycosyl compounds (3.2)
38acting on beta-galactose-glycoside bonds, e.g. beta-galactosidase
CPC
A61K 38/47
AHUMAN NECESSITIES
61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
38Medicinal preparations containing peptides
16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
43Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
46Hydrolases (3)
47acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
C12N 9/2468
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof
14Hydrolases (3)
24acting on glycosyl compounds (3.2)
2402hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
2468acting on beta-galactose-glycoside bonds, e.g. carrageenases (3.2.1.83; 3.2.1.157); beta-agarase (3.2.1.81)
Applicants
  • ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "МЕЖДУНАРОДНЫЙ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ЦЕНТР "ГЕНЕРИУМ" LIMITED LIABILITY COMPANY "INTERNATIONAL BIOTECHNOLOGY CENTER "GENERIUM" [RU]/[RU]
Inventors
  • ЕРШОВ, Александр Викторович ERSHOV, Aleksandr Viktorovich
  • ЕРШОВА, Ольга Анатольевна ERSHOVA, Olga Anatolyevna
  • ЛЕОНОВ, Вячеслав Сергеевич LEONOV, Vyacheslav Sergeevich
Agents
  • ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "ПАТЕНТНО-ПРАВОВАЯ ФИРМА "ЮС" PATENT & LAW FIRM 'YUS', LIMITED LIABILITY COMPANY
Priority Data
201910911728.03.2019RU
Publication Language Russian (RU)
Filing Language Russian (RU)
Designated States
Title
(EN) METHOD FOR OBTAINING RECOMBINANT BETA-1,4-GALACTOSIDASE BGAA FROM STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE
(FR) PROCÉDÉ DE PRODUCTION DE BÊTA-1,4-GALACTOSIDASE BGAA RECOMBINANTE À PARTIR DE STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE
(RU) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ БЕТА-1,4-ГАЛАКТОЗИДАЗЫ BGAA ИЗ STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE
Abstract
(EN)
The invention relates to the field of biotechnology and addresses the problem of obtaining industrial quantities of highly purified enzymatically active recombinant β-1,4-galactosidase BgaA which is suitable for use in the remodeling stage to obtain therapeutically functional glycoprotein preparations with specified properties, for developing tools for high-sensitivity analysis of glycan chains of glycoproteins of plant, animal and microbial tissue. A method involves the use of metal chelate, pseudo-affinity, hydrophobic, anion-exchange, concentrating chromatography with subsequent polishing gel filtration, wherein a protein from the soluble fraction of cell lysate is purified using two stages of chromatography on the same Ni2+ metal chelate sorbent under different elution conditions and by pseudo-affinity chromatography in flow-through mode on Blue Sepharose. The use of the three stages mentioned above helps achieve maximum purification of the preparation for major contaminating impurities.
(FR)
L'invention se rapporte au domaine des biotechnologies et a pour but de produire dans des proportions industrielles de la β-1,4-galactosidase BgaA d'une grande pureté et active sur le plan des ferments, qui puisse être utilisée au stade de remodélisation afin de produire des préparations thérapeutiquement fonctionnelles de glycoprotéines ayant des propriétés données, ceci afin de produire des outils pour une analyse de grande sensibilité de chaîne de glycanes de glycoprotéines de tissus de végétaux, d'animaux et de micro-organismes. Ce procédé consiste à utiliser une chromatographie à base de métallo-chélates, pseudo-affine, hydrophobe, à échange d'ions et de concentration suivie d'une filtration par gel de polissage; les protéines issues de la fraction soluble du lysat cellulaire sont purifiées en deux stades de chromatographie sur un même sorbant métallo-chélate Ni2+ dans différentes conditions d'élusion et par chromatographie pseudo-affine en mode de pénétration sur Blue Sepharose. Le recours à ces trois stades facilite une purification maximale de la préparation et permet d'éliminer les impuretés contaminantes majeures.
(RU)
Изобретение относится к области биотехнологии и решает задачу получения в промышленных объемах высокоочищенной ферментативно активной рекомбинантной β-1,4-галактозидазы BgaA, пригодной для использования на стадии ремоделирования для получения терапевтически функциональных препаратов гликопротеинов с заданными свойствами, для разработки инструментов для высокочувствительного анализа гликановых цепей гликопротеинов тканей растений, животных и микроорганизмов. Способ предусматривает применение металлохелатной, псевдоаффинной, гидрофобной, анионообменной, концентрирующей хроматографии с последующей полирующей гель- фильтрацией, при этом белок из растворимой фракции клеточного лизата очищают с помощью двух стадий хроматографии на одном и том же Ni2+ металлохелатном сорбенте в различных условиях элюции и псевдоаффинной хроматографией в режиме проскока на Blue Sepharose. Применение вышеуказанных трех стадий помогает максимально очистить препарат от мажорных контаминирующих примесей.
Latest bibliographic data on file with the International Bureau