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1. WO2020196615 - METHOD FOR CULTURING CELL POPULATION AND USE THEREOF

Publication Number WO/2020/196615
Publication Date 01.10.2020
International Application No. PCT/JP2020/013307
International Filing Date 25.03.2020
IPC
C12N 5/077 2010.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
5Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
07Animal cells or tissues
071Vertebrate cells or tissues, e.g. human cells or tissues
077Mesenchymal cells, e.g. bone cells, cartilage cells, marrow stromal cells, fat cells or muscle cells
Applicants
  • 学校法人東海大学 TOKAI UNIVERSITY EDUCATIONAL SYSTEM [JP]/[JP]
  • 日本臓器製薬株式会社 NIPPON ZOKI PHARMACEUTICAL CO., LTD. [JP]/[JP]
Inventors
  • 酒井 大輔 SAKAI Daisuke
  • 中村 嘉彦 NAKAMURA Yoshihiko
  • 松下 枝利香 MATSUSHITA Erika
Agents
  • 梅田 慎介 UMEDA Shinsuke
  • 今野 智介 IMANO Tomoyuki
Priority Data
PCT/JP2019/01257125.03.2019JP
Publication Language Japanese (JA)
Filing Language Japanese (JA)
Designated States
Title
(EN) METHOD FOR CULTURING CELL POPULATION AND USE THEREOF
(FR) PROCÉDÉ DE CULTURE D'UNE POPULATION CELLULAIRE ET UTILISATION CORRESPONDANTE
(JA) 細胞集団の培養方法及びその利用
Abstract
(EN)
The present invention addresses the problem of providing a means for efficiently preparing a cell population, which contains abundant cells having a definite characteristic corresponding to the purpose of use (for example, type II collagen-positive nucleus pulposus cells), from a cell population containing Tie2-positive stem/progenitor cells (for example, nucleus pulposus stem/progenitor cells). The culture method according to the present invention comprises culturing a cell population containing Tie2-positive stem/progenitor cells while suppressing the formation of spherical colonies under the following conditions: (1) in a state of being present in a tissue which is not subjected to a digestion treatment; (2) in a medium which contains at least one Tie2 expression enhancer other than a growth factor; (3) in a culture container which is provided with a culture surface having been treated so as to enhance cell adhesion; or (4) in a medium which contains an extracellular matrix degrading agent.
(FR)
Le but de la présente invention est à fournir un moyen pour préparer efficacement une population de cellules, contenant des cellules abondantes qui ont une caractéristique définie correspondant au but d'utilisation (par exemple, cellules de noyau gélatineux positives au collagène de type II), à partir d'une population de cellules contenant des cellules souches/progénitrices positives Tie2 (par exemple, des cellules souches/progénitrices de noyau gélatineux). Le procédé de culture selon la présente invention comprend la culture d'Une population de cellules contenant des cellules souches/progénitrices positives à Tie2 tout en supprimant la formation de colonies sphériques dans les conditions suivantes : (1) dans un état d'être présent dans un tissu n'étant pas soumis à un traitement de digestion; (2) dans un milieu contenant au moins un activateur d'expression de Tie2 autre qu'un facteur de croissance; (3) dans un récipient de culture étant pourvu d'une surface de culture ayant été traitée de façon à améliorer l'adhérence cellulaire; ou (4) dans un milieu contenant un agent de dégradation de matrice extracellulaire.
(JA)
本発明は、Tie2陽性幹/前駆細胞(例えば、髄核幹/前駆細胞)を含む細胞集団から、用途に応じた所定の形質を有する細胞(例えば、II型コラーゲン陽性髄核細胞)を豊富に含む細胞集団を、効率的に調製するための手段を提供することを課題とする。本発明の培養方法は、(1)消化処理されていない組織中に存在する状態で、(2)少なくとも1種の、増殖因子以外のTie2発現増強剤が添加された培地中で、(3)細胞の付着性を高める処理がなされた培養表面を有する培養容器で、又は(4)細胞外マトリックス分解剤が添加された培地中で、球状コロニーの形成を抑制しながら、Tie2陽性幹/前駆細胞を含む細胞集団を培養する、培養方法である。
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