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1. WO2020007002 - METHOD FOR ACQUIRING AND CREATING STERILE MUTANT

Publication Number WO/2020/007002
Publication Date 09.01.2020
International Application No. PCT/CN2018/124189
International Filing Date 27.12.2018
IPC
A HUMAN NECESSITIES
01
AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
H
NEW PLANTS OR PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
1
Processes for modifying genotypes
02
Methods or apparatus for hybridisation; Artificial pollination
A HUMAN NECESSITIES
01
AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
H
NEW PLANTS OR PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
1
Processes for modifying genotypes
04
Processes of selection
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
N
MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15
Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09
Recombinant DNA-technology
63
Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
79
Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
82
for plant cells
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
N
MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15
Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09
Recombinant DNA-technology
11
DNA or RNA fragments; Modified forms thereof
A01H 1/02 (2006.01)
A01H 1/04 (2006.01)
C12N 15/82 (2006.01)
C12N 15/11 (2006.01)
CPC
A01H 1/02
A01H 1/04
C12N 15/11
C12N 15/82
Applicants
  • 青岛袁策集团有限公司 QINGDAO YUANCE GROUP CO., LTD. [CN/CN]; 中国山东省青岛市 李沧区金水路171号青岛国际院士港16号楼 Building No.16, Qingdao International Academician Port, No. 171 Jinshui Road, Licang District Qingdao, Shandong 266000, CN
Inventors
  • 刘佳音 LIU, Jiayin; CN
  • 米铁柱 MI, Tiezhu; CN
  • 张国栋 ZHNAG, Guodong; CN
  • 张彦荣 ZHNAG, Yanrong; CN
  • 李继明 LI, Jiming; CN
  • 邹丹丹 ZOU, Dandan; CN
  • 邵晓宇 SHAO, Xiaoyu; CN
  • 丁锦燕 DING, Jinyan; CN
  • 刘鹏飞 LIU, Pengfei; CN
  • 万吉丽 WAN, Jili; CN
  • 王克响 WANG, Kexiang; CN
  • 罗碧 LUO, Bi; CN
Agents
  • 北京华仁联合知识产权代理有限公司 BEIJING HUAREN UNITED INTELLECTUAL PROPERTY AGENCY CO., LTD.; 中国北京市 海淀区苏州街1号7层051室 Rm 051, 7/F, No.1 Suzhou Street, Haidian District Beijing 100080, CN
Priority Data
201810734127.405.07.2018CN
201810794442.618.07.2018CN
201810794443.018.07.2018CN
Publication Language Chinese (ZH)
Filing Language Chinese (ZH)
Designated States
Title
(EN) METHOD FOR ACQUIRING AND CREATING STERILE MUTANT
(FR) PROCÉDÉ D'ACQUISITION ET DE CRÉATION D'UN MUTANT STÉRILE
(ZH) 不育系突变体的获取和创制方法
Abstract
(EN)
Provided in the present application is a method for acquiring a sterile mutant, for which an existing mutant is utilized and hybridized with other varieties, a sterile gene serves as a marker for screening an offspring, the offspring is also rehybridized, and each instance of hybridization undergoes a detection for the sterile gene. Also provided in the present application is a method for creating a common nuclear sterile mutant, comprising the following steps: 1. utilizing a gene knockout technique, constructing a gene knockout vector; and 2. utilizing an agrobacterium-mediated method, mediating the vector into an embryogenic cell, thus acquiring a cell of which a fertility gene is silenced. The present invention, with a rice nuclear fertility gene serving as a target gene, utilizes CRISPR/Cas9 gene silencing for a gene knockout, the gene loses the function thereof when silenced, and cells develop and grow into a complete plant but lacking developed pollens having normal functions; this is used for creating a sterile line.
(FR)
La présente invention concerne un procédé pour l'acquisition d'un mutant stérile, pour lequel un mutant existant est utilisé et hybridé avec d'autres variétés, un gène stérile sert de marqueur pour le criblage d'une descendance, la descendance est également réhybridée, et chaque cas d'hybridation subit une détection du gène stérile. La présente invention concerne également un procédé pour la création d'un mutant stérile nucléaire commun, comprenant les étapes suivantes : 1. l'utilisation d'une technique d'inactivation génique, la construction d'un vecteur d'inactivation génique; et 2. l'utilisation d'un procédé médié par agrobacterium, la médiation du vecteur dans une cellule embryogène, ce qui permet d'acquérir une cellule dont un gène de fertilité est silencieux. La présente invention, avec un gène de fertilité nucléaire du riz servant de gène cible, utilise le silençage de gène CRISPR/Cas9 pour une inactivation de gène, le gène perd sa fonction lorsqu'il est silencieux, et les cellules se développent et se multiplient en une plante complète mais dépourvues de pollens développés possédant des fonctions normales; ceci est utilisé pour créer une lignée stérile.
(ZH)
本申请提供了一种不育系突变体获取方法,利用现有的突变体,与其它品种进行杂交,以不育基因作为标记,进行后代的筛选,后代同时进行回交,每次回交均经过所述不育基因的检测。本申请还提供了一种普通核不育突变体的创制方法,包括以下步骤:1.利用基因敲除技术,构建基因敲除载体;2.利用农杆菌介导方法,将载体介导入胚性细胞中,从而获得育性基因被沉默的细胞。本发明以水稻细胞核育性基因作为目标基因,利用CRISPR/cas9基因沉默进行基因敲除,基因沉默后丧失功能,细胞发育长成完整植株,但不具备发育成正常功能的花粉,用于创制不育系。
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