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1. WO2020006940 - METHOD AND KIT THEREOF FOR QUANTITATIVELY DETECTING LACTULOSE IN LIQUID MILK BY USING MICROPLATE READER ENZYMATIC METHOD

Publication Number WO/2020/006940
Publication Date 09.01.2020
International Application No. PCT/CN2018/112496
International Filing Date 29.10.2018
IPC
G PHYSICS
01
MEASURING; TESTING
N
INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33
Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/-G01N31/131
48
Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
50
Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
53
Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
G PHYSICS
01
MEASURING; TESTING
N
INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33
Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/-G01N31/131
48
Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
50
Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
53
Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
531
Production of immunochemical test materials
532
Production of labelled immunochemicals
535
with enzyme label
G01N 33/53 (2006.01)
G01N 33/535 (2006.01)
CPC
G01N 33/53
G01N 33/535
Applicants
  • 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 INSTITUTE OF ANIMAL SCIENCES, CHINESE ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES [CN/CN]; 中国北京市 海淀区圆明园西路2号 No 2 Yuanmingyuan West Road, Haidian Beijing 100193, CN
Inventors
  • 郑楠 ZHENG, Nan; CN
  • 文芳 WEN, Fang; CN
  • 李松励 LI, Songli; CN
  • 王加启 WANG, Jiaqi; CN
Agents
  • 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) BEIJING ORIGINTELLIGENCE IP LAW FIRM; 中国北京市 海淀区上地三街9号嘉华大厦E座1004室刘元霞 LIU Yuanxia Room 1004, Tower E, Jiahua Building No.9 Shangdi 3rd Street, Haidian District Beijing 100085, CN
Priority Data
201810720180.903.07.2018CN
Publication Language Chinese (ZH)
Filing Language Chinese (ZH)
Designated States
Title
(EN) METHOD AND KIT THEREOF FOR QUANTITATIVELY DETECTING LACTULOSE IN LIQUID MILK BY USING MICROPLATE READER ENZYMATIC METHOD
(FR) PROCÉDÉ ET KIT DE DÉTECTION QUANTITATIVE DE LACTULOSE DANS DU LAIT LIQUIDE À L'AIDE D'UN PROCÉDÉ ENZYMATIQUE DE LECTEUR DE MICROPLAQUE
(ZH) 一种用酶标仪酶法定量检测液态奶中乳果糖的方法及其试剂盒
Abstract
(EN)
Provided by the present invention are a method and a kit thereof for quantitatively detecting lactulose in liquid milk by using a microplate reader enzymatic method. By adopting fructose to establish a standard curve, the technical problem that quantitative detection cannot be realized in the microplate reader detection is solved, the detection efficiency of the detection method is greatly improved by using a microplate reader and the dose of a detection reagent is reduced. On the other hand, according to the present invention, a detection reagent is prepared by a treatment method of mixing glucose oxidase with catalase, NADP+ and ATP according to certain proportions, then freeze-drying the mixture and mixing hexokinase with glucose-6-phosphate dehydrogenase to obtain suspension, in this way, the detection reaction and the detection effect are not affected, the reagent addition step is also reduced, the operation is simplified and the detection accuracy is improved.
(FR)
La présente invention concerne un procédé et un kit associé de détection quantitative de lactulose dans du lait liquide à l'aide d'un procédé enzymatique de lecteur de microplaque. Par l'adoption du fructose pour établir une courbe standard, le problème technique selon lequel une détection quantitative ne peut pas être réalisée dans la détection de lecteur de microplaque est résolu, l'efficacité de détection du procédé de détection est considérablement améliorée grâce à un lecteur de microplaque et la dose d'un réactif de détection est réduite. D'autre part, selon la présente invention, un réactif de détection est préparé par un procédé de traitement consistant à mélanger la glucose oxydase avec la catalase, NADP+ et ATP selon certaines proportions, puis à lyophiliser le mélange et à mélanger l'hexokinase avec la glucose-6-phosphate déshydrogénase afin d'obtenir une suspension. Ainsi, la réaction de détection et l'effet de détection ne sont pas modifiés, l'étape d'ajout de réactif est également réduite, l'opération est simplifiée et la précision de détection est améliorée.
(ZH)
本发明提供一种酶标仪酶法定量检测乳果糖的方法及其试剂盒。本发明采用果糖建立标准曲线,解决了酶标仪检测中无法定量的技术问题,使检测方法因采用酶标仪而极大的提高的检测效率,降低了检测试剂用量。另一方面,本发明通过将葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶,NADP +与ATP分别按一定比例混合后进行冻干,将己糖激酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶混合后制成悬浮液的处理方法进行检测试剂的制备,不仅不干扰检测反应及其效果,还减少了试剂添加步骤,简化了操作,提高了检测的准确性。
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