(EN) A method for producing γδ T cells modified by a chimeric antigen receptor, comprising: transfecting K562 cells with shFPPS targeted to FPP synthase by means of a lentiviral vector, such that the expression of FPPS in the K562 cells is lowered and a K562-shFPPS cell line with reduced FPPS expression is constructed; adding the K562-shFPPS cell line into a γδ T cell culture system for co-culturing with the γδ T cells, wherein it is found that the K562-shFPPS cell line can facilitate in vitro differentiation and proliferation of the γδ T cells; and adding a CAR-expressing lentiviral vector to the γδ T cell culture system comprising the cell line for co-culturing, wherein it is found that the K562-shFPPS cell line can further effectively improve the transfection rate of CAR genes. The provided solution effectively overcomes the technical challenge of the large-scale production of CAR-γδ T cells, and has a good application prospect.
(FR) La présente invention concerne un procédé de production de cellules γδ T modifiées par un récepteur d’antigène chimère, comprenant : la transfection des cellules K562 avec shFPPS ciblé vers la FPP synthase à l’aide d’un vecteur lentiviral, de sorte que l’expression FPPS dans les cellules K562 est réduite et une lignée cellulaire K562-shFPPS avec expression FPPS réduite est construite ; l’addition de la lignée cellulaire K562-shFPPS dans un système de culture de cellules γδ T pour la co-culture avec les cellules γδ T, ayant été découvert que la lignée cellulaire K562-shFPPS peut faciliter la différenciation et la prolifération in vitro des cellules γδ T ; et l’addition d’un vecteur lentiviral exprimant CAR au système de culture de cellules γδ T comprenant la lignée cellulaire pour la co-culture, ayant été découvert que la lignée cellulaire K562-shFPPS peut en outre efficacement améliorer le taux de transfection des gènes CAR. La solution fournie surmonte efficacement le défi technique de la production à grande échelle des cellules CAR-γδ T, et présente une bonne perspective d’application.
(ZH) 一种生产嵌合抗原受体修饰的γδT细胞的方法：将靶向于FPP合成酶的shFPPS通过慢病毒载体转染K562细胞，下调了K562细胞中FPPS的表达量，构建了FPPS表达量降低的K562-shFPPS细胞系。将K562-shFPPS细胞系加入γδT细胞培养体系中与γδT细胞进行共培养，发现K562-shFPPS细胞系能促进γδT细胞的体外分化和扩增。将表达CAR的慢病毒载体加入含有该细胞系的γδT细胞培养体系中进行共培养，发现K562-shFPPS细胞系还可以有效提高CAR基因的转染率。所提供的方案有效解决了大规模生产CAR-γδT细胞的技术瓶颈，具有良好的应用前景。
