说明书
发明名称 : FGFR4抑制剂的盐、晶体、制备方法及其用途
[0001]
本发明属于晶型技术领域，具体涉及式(I)化合物可药用盐、可药用盐的晶型及其制备方法和用途。
[0002]
成纤维细胞生长因子受体(FGFR)属于受体酪氨酸激酶跨膜受体，包括4个受体亚型，分别为FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4。FGFR调节细胞增殖、生存、分化和迁移等多种功能，在人体发育和成人各项机体功能中发挥重要作用。FGFR在多种人类肿瘤中表现异常，包括基因扩增、突变和过表达，是肿瘤靶向治疗研究的重要靶点。
[0003]
FGFR4是FGFR受体家族中的一员，通过与其配体成纤维细胞生长因子19(FGF19)的结合，在细胞膜上形成二聚体，这些二聚体的形成可引起FGFR4自身细胞内关键的酪氨酸残基磷酸化，从而激活细胞内多个下游信号通路，这些细胞内信号通路在细胞增殖、生存及抗凋亡过程中起重要作用。FGFR4在许多癌症中过表达，是肿瘤恶性侵袭的预测因素。减少和降低FGFR4表达能减少细胞增生和促进细胞凋亡。最近越来越多的研究表明约三分之一左右的肝癌患者FGF19/FGFR4信号通路持续激活，是导致该部分患者肝癌发生的主要致癌因素。同时FGFR4表达或高表达也和许多其他肿瘤的密切相关，如胃癌、前列腺癌、皮肤癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌等。
[0004]
肝癌发病率在我国高居全球之首，每年新发和死亡患者约占全球肝癌总数的一半。目前我国肝癌的发病率约为28.7/10万，2012年有394770例新发病例，成为死亡率仅次于胃癌、肺癌的第三大恶性肿瘤。原发性肝癌发病是多因素、多步骤的复杂过程，其侵袭性强，预后差。手术治疗如肝切除和肝移植可提高部分病人的生存率，但只有有限病人可以进行手术治疗，并且手术后大多数病人由于复发和转移仍预后较差。Sorafenib是目前市场上批准的唯一一个肝癌治疗药物，临床也只能延长3个月左右的总体生存期，治疗效果并不理想，因此迫切需要开发靶向新分子的肝癌系统治疗药物。FGFR4作为相当一部分肝癌的主要致癌因素，其小分子抑制剂的开发具有重大的临床应用潜力。
[0005]
目前已有一些FGFR抑制剂作为抗肿瘤药物进入临床研究阶段，但这些都主要是针对FGFR1、2和3的抑制剂，对FGFR4的活性抑制较弱，且FGFR1-3的抑制具有高血磷症等靶点相关副作用。FGFR4高选择性抑制剂能有效治疗FGFR4信号通路异常导致的癌症疾病，并可避免FGFR1-3抑制导致的高血磷症等相关副作用，针对FGFR4的高选择性小分子抑制剂在肿瘤靶向治疗领域具有重大应用前景。
[0007]
本发明一方面提供了式(I)化合物的可药用盐。
[0008]
本发明第二方面提供了式(I)化合物盐酸盐的晶型。
[0009]
本发明第三方面提供了式(I)化合物硫酸盐的晶型。
[0010]
本发明第四方面提供了式(I)化合物甲磺酸盐的晶型。
[0011]
本发明第五方面提供了式(I)化合物苯磺酸盐的晶型。
[0012]
本发明第六方面提供了式(I)化合物乙磺酸盐的晶型。
[0013]
本发明第七方面提供了式(I)化合物草酸盐的晶型。
[0014]
本发明第八方面提供了式(I)化合物马来酸盐的晶型。
[0015]
本发明第九方面提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型。
[0016]
本发明第十方面提供了式(I)化合物可药用盐晶型的药物组合物。
[0017]
本发明第十一方面提供了式(I)化合物可药用盐晶型的制备方法。
[0018]
本发明第十二方面提供了式(I)化合物可药用盐晶型的用途。
[0019]
化合物(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-甲酰基-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺(以下简称为式(I)化合物)，最早公开于豪森专利PCT/CN2017/084564，该化合物对FGFR4激酶活性具有很强的抑制作用，并具有非常高的选择性，是新一代FGFR4抑制剂药物，其化学结构式如下：
[0021]
本发明所述的“可药用盐”可为任何盐，只要它能与式(I)化合物形成无毒盐即可。其例子包括但不限于：与各种无机酸形成的盐如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、高氯酸盐等；与有机酸形成的盐如柠檬酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、醋酸盐、苹果酸盐、苯甲酸盐、对甲苯甲酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、乙磺酸盐、羟乙基磺酸盐、1-萘磺酸盐、2-萘磺酸盐、樟脑磺酸盐、三氟甲磺酸盐、三氟乙酸盐、乳酸盐、草酸盐、水杨酸盐、苯乙酸盐、扁桃酸盐、甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、草酸盐、羟乙酸盐、羟基马来酸盐、甲基马来酸盐、己二酸盐、肉桂酸盐、抗坏血酸盐、水杨酸盐、2-乙酸基苯甲酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、胆酸盐、天冬氨酸盐或谷氨酸盐。在一些情况下，盐可为含水物、水合物、与醇等的溶剂化物等。
[0022]
本发明提供了式(I)化合物可药用盐的制备方法，将式(I)化合物与酸在溶剂中反应得到。
[0023]
所述溶剂包括有机溶剂或无机溶剂，所述有机溶剂选自醇溶剂、酮溶剂、酯类溶剂、二氯甲烷、乙腈、氯仿、中的一种或几种混合溶剂，优选水、甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙醇、二氯甲烷、乙腈、丙酮、异丁醇中的一种或几种混合溶剂。
[0024]
所述酸包括有机溶酸或无机酸，所述无机酸包括但不限于盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、磷酸、碳酸、高氯酸等；有机酸包括但不限于柠檬酸、酒石酸、富马酸、琥珀酸、马来酸、醋酸、苹果酸、苯甲酸、对甲苯甲酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、乙磺酸、羟乙基磺酸、1-萘磺酸、2-萘磺酸、樟脑磺酸、三氟甲磺酸、三氟乙酸、乳酸、草酸、水杨酸、苯乙酸、扁桃酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、草酸、羟乙酸、羟基马来酸、甲基马来酸、己二酸、肉桂酸、 抗坏血酸、水杨酸、2-乙酸基苯甲酸、烟酸、异烟酸、胆酸、天冬氨酸或谷氨酸。
[0025]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型。
[0026]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型I。
[0027]
所述式(I)化合物盐酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.8、9.9、11.0、16.7和25.3的衍射峰；
[0028]
优选的，所述式(I)化合物盐酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.8、8.2、9.9、11.0、12.1、12.4、13.0、14.0、16.7、18.5、19.0、22.3、25.3、25.8、26.2和27.7的衍射峰。
[0029]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型I制备方法，式(I)化合物与盐酸在乙酸乙酯中反应得到。
[0030]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型II。
[0031]
所述式(I)化合物盐酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.0、6.5、15.7和23.8的衍射峰。
[0032]
优选的，所述盐酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.0、6.5、8.4、11.7、12.1、13.2、14.6、15.7、16.7、17.7、18.7、19.1、20.0、22.5、23.0、23.8、24.5和25.6的衍射峰。
[0033]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型II制备方法，式(I)化合物与盐酸在乙醇中反应得到。
[0034]
本发明提供的式(I)化合物盐酸盐晶型II，具有良好的稳定性，在40℃条件下放置1个月，降解≤0.5％。
[0035]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型III。
[0036]
所述式(I)化合物盐酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.1、7.0、9.2、10.2和21.0的衍射峰；
[0037]
优选的，所述盐酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.1、7.0、9.2、10.2、12.4、14.4、16.4、16.9、18.6、19.5、21.0、24.6、25.6和26.2的衍射峰。
[0038]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型III制备方法，式(I)化合物与盐酸在二氯甲烷中反应得到。
[0039]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型IV。
[0040]
所述式(I)化合物盐酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.1、7.8、9.5、11.9和25.0的衍射峰；
[0041]
优选的，所述盐酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.9、6.1、7.8、8.8、9.5、10.0、11.9、12.4、15.5、21.2、23.6、25.0、26.5和32.5的衍射峰。
[0042]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型IV制备方法，式(I)化合物与盐酸在乙腈中反应得到。
[0043]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型V。
[0044]
所述式(I)化合物盐酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.5、12.0、13.2、16.5和23.6的衍射峰；
[0045]
优选的，所述式(I)化合物盐酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.5、8.8、11.5、12.0、13.2、14.4、14.8、15.2、16.5、20.3、21.3、23.6、25.3和27.0的衍射峰。
[0046]
本发明提供了式(I)化合物盐酸盐晶型V制备方法，式(I)化合物与盐酸在乙酸乙酯中反应得到。
[0047]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型。
[0048]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型I。
[0049]
所述式(I)化合物硫酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.6、6.4、7.6、13.4和27.1的衍射峰；
[0050]
优选的，所述式(I)化合物硫酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.6、6.4、7.6、11.3、12.1、12.4、13.4、14.1、15.3、18.1、19.0、20.9、21.5、24.5、24.9和27.1的衍射峰。
[0051]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型I的制备方法，式(I)化合物与硫酸在乙酸乙酯中反应得到。
[0052]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型II。
[0053]
所述式(I)化合物硫酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.8、6.1、6.5、9.0、13.0和23.9的衍射峰；
[0054]
优选的，所述式(I)化合物硫酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.8、6.1、6.5、7.8、9.0、11.8、13.0、14.6、15.4、16.0、16.6、17.4、18.1、19.8、21.6、22.1、23.0和23.9的衍射峰。
[0055]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型II的制备方法，式(I)化合物与硫酸在乙腈中反应得到。
[0056]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型III。
[0057]
所述式(I)化合物硫酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.6、7.8、15.5、18.1、25.0和27.1的衍射峰；
[0058]
优选的，所述式(I)化合物硫酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.6、7.8、9.5、11.5、12.2、12.6、13.6、14.3、15.5、17.1、18.1、18.7、19.1、19.8、21.1、21.6、23.2、24.6、25.0和27.1的衍射峰。
[0059]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型III的制备方法，式(I)化合物与硫酸在丙酮中反应得到。
[0060]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型IV。
[0061]
所述式(I)化合物硫酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.2、6.6、9.8、20.5和23.3的衍射峰；
[0062]
优选的，所述式(I)化合物硫酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.2、6.6、8.7、9.8、11.3、13.4、16.5、20.5、23.3、25.4、26.7和28.8的衍射峰。
[0063]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型IV的制备方法，式(I)化合物与硫酸在二氯甲烷中反应得到。
[0064]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型V。
[0065]
所述式(I)化合物硫酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.8、6.3、13.5、24.0和24.8的衍射峰；
[0066]
优选的，所述式(I)化合物硫酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.8、6.3、13.5、14.5、14.9、16.8、17.4、18.1、19.4、20.5、20.9、22.8、24.0、24.8、26.7、28.3和31.8的衍射峰。
[0067]
本发明提供了式(I)化合物硫酸盐晶型V的制备方法，式(I)化合物与硫酸在乙腈中反应并长时间搅拌得到。
[0068]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型。
[0069]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型I。
[0070]
所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.2、7.8、9.6、13.8、18.9和25.6的衍射峰；
[0071]
优选的，所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.2、7.8、9.6、12.5、13.8、14.6、15.4、16.1、18.9、19.4、20.5、21.0、22.4、23.3、24.0、25.1、25.6、26.6和27.9的衍射峰.
[0072]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型I的制备方法，式(I)化合物与甲磺酸在乙腈中反应得到。
[0073]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型II。
[0074]
所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.5、8.2、13.7、17.3、20.9和25.1的衍射峰；
[0075]
优选的，所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.5、8.2、11.5、13.7、15.1、17.3、20.0、20.9、23.0、25.1和28.9的衍射峰。
[0076]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型II的制备方法，式(I)化合物与甲磺酸在乙醇中反应得到。
[0077]
本发明提供的式(I)化合物甲磺酸盐晶型II，为溶剂化物晶型，晶体中含有乙醇和水。
[0078]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型III。
[0079]
所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.2、13.5、16.3、19.5、22.0和24.2的衍射峰；
[0080]
优选的，所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.2、6.9、11.1、12.5、13.5、14.7、16.3、17.2、18.4、19.5、20.4、22.0、24.2、24.8和30.4的衍射峰。
[0081]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型III的制备方法，式(I)化合物甲磺酸盐在湿度92.5％环境中放置转晶得到。
[0082]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型IV。
[0083]
所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.1、9.0、11.0、13.6、14.8、22.3和23.8的衍射峰；
[0084]
优选的，所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.1、6.9、9.0、11.0、13.6、14.8、18.4、18.9、20.6、22.3、23.8和25.4的衍射峰。
[0085]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型IV的制备方法，式(I)化合物甲磺酸盐在异丁醇中打浆转晶得到。
[0086]
本发明提供的式(I)化合物甲磺酸盐晶型IV，为异丁醇溶剂化物晶型。
[0087]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型V。
[0088]
所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.1、7.9、9.4、15.9、19.2和24.5的衍射峰；
[0089]
优选的，所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.1、7.9、9.4、10.1、12.2、12.6、13.3、14.3、15.9、17.2、19.1、21.8、22.8、23.7、24.5、27.3和29.1的衍射峰。
[0090]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型V的制备方法，式(I)化合物甲磺酸盐在异丙醇中打浆转晶得到。
[0091]
本发明提供的式(I)化合物甲磺酸盐晶型V，为异丙醇溶剂化物晶型。
[0092]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型VI。
[0093]
所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型VI的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.6、8.6、13.7、17.5、22.1、23.7和28.8的衍射峰；
[0094]
优选的，所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型VI的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.6、8.6、11.4、13.7、15.1、17.5、18.5、18.8、20.1、21.1、22.1、23.1、23.7、24.5、25.7和28.8的衍射峰。
[0095]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型VI的制备方法，式(I)化合物甲磺酸盐在甲酸乙酯中打浆转晶得到。
[0096]
本发明提供的式(I)化合物甲磺酸盐晶型VI，为甲酸乙酯溶剂化物晶型。
[0097]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型VII。
[0098]
所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型VII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.2、7.1、10.4、14.1和23.3的衍射峰；
[0099]
优选的，所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型VII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.2、7.1、10.4、12.0、13.2、14.1、16.0、17.2、18.7、23.3、和30.2的衍射峰；
[0100]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型VII的制备方法，式(I)化合物甲磺酸盐在乙酸乙酯中长时间搅拌转晶得到。
[0101]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型VIII。
[0102]
所述式(I)化合物甲磺酸盐晶型VIII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.9、6.4、13.6、16.9、24.1和25.0的衍射峰；
[0103]
优选的，所述甲磺酸盐晶型VIII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.9、6.4、13.6、14.6、15.1、16.9、17.6、18.2、19.6、20.6、21.0、22.7、24.1、25.0、26.8、28.4和31.9的衍射峰。
[0104]
本发明提供了式(I)化合物甲磺酸盐晶型VIII的制备方法，式(I)化合物甲磺酸盐在丙酮中长时间搅拌转晶得到。
[0105]
本发明提供的式(I)化合物甲磺酸盐晶型VIII，不含溶剂，在172℃时熔化降解，该晶型具有良好的稳定性，在高湿RH92.5％和高温40℃条件下储存1个月，有关物质增加＜0.5％。
[0106]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型。
[0107]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型I。
[0108]
所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.4、5.9、7.1、10.4、14.8、17.6和21.9的衍射峰；
[0109]
优选的，所述苯磺酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.4、5.9、6.8、7.1、8.3、8.7、10.4、11.7、14.0、14.8、15.1、17.6、20.9、21.9、23.7、24.8和26.6的衍射峰。
[0110]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型I的制备方法，式(I)化合物与苯磺酸在乙醇中反应得到。
[0111]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型II。
[0112]
所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：4.4、6.0、9.3、11.5、17.5、21.0和26.0的衍射峰；
[0113]
优选的，所述苯磺酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：4.4、6.0、9.3、11.5、14.8、15.3、17.5、20.0、21.0、21.9、22.7、24.6和26.0的衍射峰。
[0114]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型II的制备方法，式(I)化合物与苯磺酸在四氢呋喃中反应得到。
[0115]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型III。
[0116]
所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.7、8.3、8.6、17.2、23.2和26.0的衍射峰；
[0117]
优选的，所述苯磺酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.7、8.3、 8.6、11.6、13.8、14.5、17.2、18.3、18.9、20.8、21.8、23.2和26.0的衍射峰。
[0118]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型III的制备方法，式(I)化合物与苯磺酸在二氯甲烷中反应得到。
[0119]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型IV。
[0120]
所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.7、6.4、13.0、14.4和23.8的衍射峰；
[0121]
优选的，所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.7、6.4、12.0、13.0、14.4、15.6、16.5、17.5、18.6、21.0、21.7、23.2、23.8、26.0、26.6和30.0的衍射峰。
[0122]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型IV的制备方法，式(I)化合物苯磺酸盐在乙腈中长时间搅拌转晶得到。
[0123]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型V。
[0124]
所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.7、7.5、10.3、14.3和25.1的衍射峰；
[0125]
优选的，所述苯磺酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.7、7.5、10.3、11.0、11.3、11.7、13.8、14.3、16.3、16.6、17.8、18.3、19.0、20.1、23.4、25.1和27.5的衍射峰。
[0126]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型V的制备方法，式(I)化合物苯磺酸盐在75％乙醇水溶液中长时间搅拌转晶得到。
[0127]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型VI。
[0128]
所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型VI的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.0、7.4、13.5、18.6、23.6和24.5的衍射峰；
[0129]
优选的，所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型VI的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.0、7.4、11.6、12.2、12.8、13.5、14.8、16.5、17.5、18.6、20.4、21.0、21.6、22.7、23.6、24.5、25.9、26.7和27.5的衍射峰。
[0130]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型VI的制备方法，式(I)化合物与苯磺酸在丙酮中反应得到。
[0131]
本发明提供的式(I)化合物苯磺酸盐晶型VI，不含溶剂，其熔点为162℃，非常适合药物制剂开发，制备工艺收率最高，达到95％，并且制备工艺重现性好，特别适合工业化生产。
[0132]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型VII。
[0133]
所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型VII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.9、7.1、9.7、15.0、16.4和23.7的衍射峰；
[0134]
优选的，所述式(I)化合物苯磺酸盐晶型VII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.9、7.1、9.7、11.9、12.9、13.4、15.0、16.4、18.3、18.8、20.5、21.2、21.9、22.8和23.7的衍射峰。
[0135]
本发明提供了式(I)化合物苯磺酸盐晶型VII的制备方法，式(I)化合物苯磺酸盐在92.5％RH中放置转晶得到。
[0136]
本发明提供了式(I)化合物乙磺酸盐晶型。
[0137]
本发明提供了式(I)化合物乙磺酸盐晶型I。
[0138]
所述式(I)化合物乙磺酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.5、8.3和17.9的衍射峰；
[0139]
优选的，所述式(I)化合物乙磺酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为： 7.5、8.3、10.5、12.9、17.9、23.5和25.0的衍射峰。
[0140]
本发明提供了式(I)化合物乙磺酸盐晶型I的制备方法，式(I)化合物与乙磺酸在乙醇中反应得到。
[0141]
本发明提供了式(I)化合物乙磺酸盐晶型II。
[0142]
所述式(I)化合物乙磺酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.0、6.6、12.1和24.1的衍射峰；
[0143]
优选的，所述式(I)化合物乙磺酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.8、6.0、6.6、8.5、12.1、13.3、14.7、15.4、16.3、16.8、17.3、19.1、22.1、23.3和24.1的衍射峰。
[0144]
本发明提供了式(I)化合物乙磺酸盐晶型II的制备方法，式(I)化合物乙磺酸盐在乙酸乙酯中长时间搅拌转晶得到。
[0145]
本发明提供了式(I)化合物乙磺酸盐晶型III。
[0146]
所述式(I)化合物乙磺酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.0、7.6、12.2、13.6和18.3的衍射峰；
[0147]
优选的，所述乙磺酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.0、7.6、9.4、12.2、13.6、14.4、15.2、16.0、17.2、18.4、19.3和20.4的衍射峰。
[0148]
本发明提供了式(I)化合物乙磺酸盐晶型III的制备方法，式(I)化合物乙磺酸盐在二氯甲烷中长时间搅拌转晶得到。
[0149]
本发明提供了式(I)化合物草酸盐晶型。
[0150]
本发明提供了式(I)化合物草酸盐晶型I。
[0151]
所述式(I)化合物草酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：4.1、6.9、7.9、14.5、19.4、23.8和27.0的衍射峰；
[0152]
优选的，所述式(I)化合物草酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：4.1、6.9、7.9、11.7、12.2、13.0、13.9、14.5、15.0、16.4、17.6、19.4、20.3、21.0、23.8、25.5、26.0和27.0的衍射峰。
[0153]
本发明提供了式(I)化合物草酸盐晶型I的制备方法，式(I)化合物与草酸在二氯甲烷中反应得到。
[0154]
本发明提供了式(I)化合物草酸盐晶型I，其熔点约150℃。
[0155]
本发明提供了式(I)化合物草酸盐晶型II。
[0156]
所述式(I)化合物草酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：4.0、6.8、7.7、8.1、16.7和23.7的衍射峰；
[0157]
优选的，所述式(I)化合物草酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：4.0、6.8、7.7、8.1、14.6、16.7、17.4、17.9、20.9、21.4、22.1、22.7、23.7和27.7的衍射峰。
[0158]
本发明提供了式(I)化合物草酸盐晶型II的制备方法，式(I)化合物草酸盐在丙酮中打浆转晶得到。
[0159]
本发明提供了式(I)化合物草酸盐晶型II，其熔点约154℃。
[0160]
本发明提供了式(I)化合物马来酸盐晶型。
[0161]
本发明提供了式(I)化合物马来酸盐晶型I。
[0162]
所述式(I)化合物马来酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.6、8.1、10.8、13.8、23.0和26.3的衍射峰；
[0163]
优选的，所述式(I)化合物马来酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.6、6.4、8.1、10.8、11.6、12.4、12.9、13.3、13.8、14.7、15.5、16.7、17.4、17.8、18.0、18.6、20.1、21.1、22.6、23.0、23.8、24.8、26.3和28.1的衍射峰。
[0164]
本发明提供了式(I)化合物马来酸盐晶型I的制备方法，式(I)化合物与马来酸在二氯甲烷/乙酸乙酯体系中共结晶得到。
[0165]
本发明还提供了式(I)化合物马来酸盐晶型I的另一种制备方法，具体为将式(I)化合物与马来酸置于在乙酸乙酯中，在室温下搅拌7天得到马来酸盐晶型I。
[0166]
本发明还提供了式(I)化合物马来酸盐晶型I的另一种制备方法，具体为将式(I)化合物与马来酸置于二氯甲烷中，加入乙酸乙酯及马来酸盐晶型I晶种析晶，得到马来酸盐晶型I。
[0167]
本发明还提供了式(I)化合物马来酸盐晶型I的另一种制备方法，具体为将式(I)化合物与马来酸置于二氯甲烷中，加入正庚烷和马来酸盐晶型I晶种，搅拌得到晶型I样品。
[0168]
本发明提供的式(I)化合物马来酸盐晶型I，马来酸的含量约为27％-33％，优选29％-31％，最优选30％。
[0169]
本发明提供的式(I)化合物马来酸盐晶型I，不含水和有机溶剂，在高湿(RH92.5％)和高温(40℃)条件下放置6个月，基本不发生降解。
[0170]
本发明提供的式(I)化合物马来酸盐晶型I，其熔点为114℃。
[0171]
本发明提供的式(I)所示化合物马来酸盐晶型I制备工艺简单，工艺重现性好，特别适合工业化生产和药物制剂研究。
[0172]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型。
[0173]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型I。
[0174]
所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.6、13.5、15.0、20.6和23.5的衍射峰；
[0175]
优选的，所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型I的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.6、8.5、10.1、11.9、13.0、13.5、15.0、16.5、17.0、17.4、18.4、18.7、20.6、20.9、23.5、24.1、25.7和26.6的衍射峰。
[0176]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型I的制备方法，式(I)化合物与对甲苯磺酸在乙酸乙酯中反应得到。
[0177]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型II。
[0178]
所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.5、8.1、13.1、20.7和22.9的衍射峰；
[0179]
优选的，所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型II的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.5、8.1、13.1、13.5、16.5、16.9、17.7、19.9、20.7、21.1、22.9、24.9、25.5和28.7的衍射峰。
[0180]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型II的制备方法，式(I)化合物对甲苯磺酸盐在乙醇中打浆转晶得到。
[0181]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型III。
[0182]
所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：8.3、12.8、14.7、16.6和24.3的衍射峰；
[0183]
优选的，所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型III的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.4、6.9、8.3、8.8、9.1、10.5、10.8、11.4、12.1、12.8、14.7、15.5、16.6、17.2、17.8、18.5、18.8、19.3、19.9、20.4、22.1、22.4、23.4、23.9、24.3、25.4、25.8、26.8、27.5、28.4和29.6的衍射峰。
[0184]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型III的制备方法，式(I)化合物对甲苯磺酸盐在水中长时间搅拌转晶得到。
[0185]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IV。
[0186]
所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.3、14.4、21.2、23.5和25.3的衍射峰；
[0187]
优选的，所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IV的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.7、7.3、10.1、10.6、11.7、14.4、16.1、16.6、17.2、18.5、18.9、19.9、20.6、21.2、22.3、22.9、23.5、24.4、25.3、25.8、26.9、27.4、28.1、29.2、30.1、31.0、31.6、32.5、33.1、33.6、34.5、35.5、367、38.9和42.7的衍射峰。
[0188]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IV的制备方法，式(I)化合物对甲苯磺酸盐在乙酸乙酯中打浆转晶得到。
[0189]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型V。
[0190]
所述对式(I)化合物甲苯磺酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：8.1、10.2、11.0、19.4和24.1的衍射峰；
[0191]
优选的，所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型V的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：8.1、8.5、9.0、10.2、11.0、13.8、14.8、16.6、17.0、17.5、18.3、19.4、20.6、22.1、23.0、24.1、25.8、28.1、30.1和30.7的衍射峰。
[0192]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型V的制备方法，式(I)化合物对甲苯磺酸盐在二氯甲烷/乙酸乙酯中打浆转晶得到。
[0193]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VI。
[0194]
所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VI的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.2、12.5、16.5和21.0的衍射峰；
[0195]
优选的，所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VI的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：6.8、7.2、7.7、10.0、10.4、11.6、12.5、14.3、16.5、17.1、17.5、18.2、19.2、19.7、21.0、21.7、23.5、23.7、24.4、25.3、26.8和29.4的衍射峰。
[0196]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VI的制备方法，式(I)化合物对甲苯磺酸盐在丙酮/乙酸乙酯中打浆转晶得到。
[0197]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VII。
[0198]
所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.7、6.9、9.9和17.6的衍射峰；
[0199]
优选的，所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：5.7、6.9、7.4、8.7、9.9、11.5、12.5、14.6、15.7、17.6、23.6、24.7和26.5的衍射峰。
[0200]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VII的制备方法，式(I)化合物与对甲苯磺酸在乙醇中反应得到。
[0201]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VIII。
[0202]
所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VIII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：4.2、5.9、7.2、9.0和25.3的衍射峰；
[0203]
优选的，所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VIII的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：4.2、5.9、7.2、9.0、10.3、11.0、14.3、15.2、16.6、18.9、19.7、19.9、21.0、22.1、23.6、25.3、26.2、29.5和31.1的衍射峰。
[0204]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VIII的制备方法，式(I)化合物与对甲苯磺酸在丙酮中反应得到。
[0205]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IX。
[0206]
所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IX的XRPD图谱中包含2θ±0.2°为：7.0、7.7、9.4、12.9和15.4的衍射峰；
[0207]
优选的，所述式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IX的XRPD图谱中包含2θ±0.2° 为：7.0、7.7、9.4、10.8、12.2、12.9、13.7、15.4、18.0、20.5、21.9、23.2、26.7和28.0的衍射峰。
[0208]
本发明提供了式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IX的制备方法，式(I)化合物与对甲苯磺酸在甲醇中反应得到。
[0209]
目前尚无文献报道式(I)化合物的可药用盐及其晶型，本发明的盐具有良好的理化性质，尤其在溶解度、稳定性及引湿性方面表现优异，本发明具体优选的盐及其晶型在上述性质方面表现尤为优异。本发明晶型稳定性好、不具有引湿性，溶解度良好，在制剂生产过程中具有良好的适应性，能实现药物良好的溶出行为，确保药物在体内具有良好的生物利用度。相应晶型制备工艺简单，收率高，适合工业化生产。因此，本发明式(I)化合物的盐及晶型非常适合药物制剂应用，具有良好的临床应用前景。·
[0210]
图1为式(I)化合物盐酸盐晶型I的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0211]
图2为式(I)化合物盐酸盐晶型II的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0212]
图3为式(I)化合物盐酸盐晶型III的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0213]
图4为式(I)化合物盐酸盐晶型IV的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0214]
图5为式(I)化合物盐酸盐晶型V的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0215]
图6为式(I)化合物硫酸盐晶型I的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0216]
图7为式(I)化合物硫酸盐晶型II的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0217]
图8为式(I)化合物硫酸盐晶型III的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0218]
图9为式(I)化合物硫酸盐晶型IV的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0219]
图10为式(I)化合物硫酸盐晶型V的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0220]
图11为式(I)化合物甲磺酸盐晶型I的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0221]
图12为式(I)化合物甲磺酸盐晶型I的DSC图谱；
[0222]
图13为式(I)化合物甲磺酸盐晶型I的TGA图谱；
[0223]
图14为式(I)化合物甲磺酸盐晶型II的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0224]
图15为式(I)化合物甲磺酸盐晶型III的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0225]
图16为式(I)化合物甲磺酸盐晶型IV的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0226]
图17为式(I)化合物甲磺酸盐晶型V的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度 (cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0227]
图18为式(I)化合物甲磺酸盐晶型VI的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0228]
图19为式(I)化合物甲磺酸盐晶型VII的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0229]
图20为式(I)化合物甲磺酸盐晶型VIII的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0230]
图21为式(I)化合物甲磺酸盐晶型VIII的DSC图谱；
[0231]
图22为式(I)化合物甲磺酸盐晶型VIII的TGA图谱；
[0232]
图23为式(I)化合物苯磺酸盐晶型I的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0233]
图24为式(I)化合物苯磺酸盐晶型II的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0234]
图25为式(I)化合物苯磺酸盐晶型III的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0235]
图26为式(I)化合物苯磺酸盐晶型IV的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0236]
图27为式(I)化合物苯磺酸盐晶型V的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0237]
图28为式(I)化合物苯磺酸盐晶型VI的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0238]
图29为式(I)化合物苯磺酸盐晶型VII的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0239]
图30为式(I)化合物乙磺酸盐晶型I的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0240]
图31为式(I)化合物乙磺酸盐晶型II的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0241]
图32为式(I)化合物乙磺酸盐晶型III的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0242]
图33为式(I)化合物草酸盐晶型I的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0243]
图34为式(I)化合物草酸盐晶型I的DSC图谱；
[0244]
图35为式(I)化合物草酸盐晶型I的TGA图谱；
[0245]
图36为式(I)化合物草酸盐晶型II的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0246]
图37为式(I)化合物草酸盐晶型II的DSC图谱；
[0247]
图38为式(I)化合物草酸盐晶型II的TGA图谱；
[0248]
图39为式(I)化合物马来酸盐晶型I的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0249]
图40为式(I)化合物马来酸盐晶型I的DSC图谱
[0250]
图41为式(I)化合物对甲苯黄酸盐晶型I的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0251]
图42为式(I)化合物对甲苯黄酸盐晶型II的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0252]
图43为式(I)化合物对甲苯黄酸盐晶型III的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0253]
图44为式(I)化合物对甲苯黄酸盐晶型IV的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0254]
图45为式(I)化合物对甲苯黄酸盐晶型V的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0255]
图46为式(I)化合物对甲苯黄酸盐晶型VI的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0256]
图47为式(I)化合物对甲苯黄酸盐晶型VII的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0257]
图48为式(I)化合物对甲苯黄酸盐晶型VIII的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0258]
图49为式(I)化合物对甲苯黄酸盐晶型IX的X射线粉末衍射图，纵轴表示峰强度(cps)，横轴表示衍射角(2θ[°])。
[0259]
下面结合附图和实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但并不用来限制本发明的范围。
[0261]
第一步4-(((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)氨基)丁烷-1-醇的制备
[0263]
室温下，将2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-甲醛(1.0g,4.2mmol)，4-氨基丁烷-1-醇(0.45g,5.1mmol)溶于DCE(15mL)，搅拌2小时，然后加入NaBH(OAc)
3(1.35g,6.4mmol)，室温下搅拌过夜。反应液用CH
2Cl
2(100mL)稀释，有机相依次用水(10mL)和饱和食盐水(15mL)洗涤，并用无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析得到化合物4-(((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)氨基)丁烷-1-醇(0.9g,69％)。
[0264]
1H NMR(400MHz,CDCl
3)δ7.13(s,1H),5.17(s,1H),4.84(s,1H),3.73(s,2H),3.66-3.49(m,2H),3.42(s,6H),3.40-3.36(m,2H),2.71(t,J＝6.3Hz,2H),2.68-2.56(m,2H),1.95-1.81(m,2H),1.74-1.55(m,4H)；
[0265]
MS m/z(ESI):310.2[M+H]
+.
[0266]
第二步3-((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)-1,3-噁吖庚环-2-酮的制备
[0268]
冰水浴下，将4-(((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)氨基)丁烷-1-醇(0.6g,1.94mmol)溶于DCE(15mL)，然后加入二(三氯甲基)碳酸酯(0.22g,0.76mmol)，缓慢滴加三乙胺(0.78g,7.76mmol)，然后在室温下搅拌3小时。将反应温度升至80℃，在80℃下反应6小时，反应冷却至室温后，用CH
2Cl
2(100mL)稀释，有机相依次用水(10mL)和饱和食盐水(15mL)洗涤，并用无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析得到化合物3-((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)-1,3-噁吖庚环-2-酮(0.37g,57％)。
[0269]
MS m/z(ESI):336.2[M+H]
+.
[0270]
第三步苯基7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-羧酸酯的制备
[0272]
3-((2-(二甲氧基甲基)-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)甲基)-1,3-噁吖庚环-2-酮(670mg,2mmol),碳酸二苯酯(643mg,3mmol)混合于THF(15mL)中，N
2氛围下,冷却至-78℃，滴加LiHMDS的THF(4mL,4mmol)溶液，自然升至室温反应过夜。加入饱和NH
4Cl水溶液(100mL)，乙酸乙酯(100mL×2)萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析得标题化合物苯基7-(二甲氧基甲基)-6-((3-羰基吗啉代)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-羧酸酯(432mg,47％)。
[0273]
1H NMR(400MHz,CDCl
3)δ7.56(s,1H),7.38(m,2H),7.21(m,3H),5.22(s,1H),4.77(s,2H),4.16(m,2H),3.95(m,2H),3.39(s,6H),3.25(m,2H),2.84(t,J＝6.5Hz,2H),1.87(m,2H),1.64(m,4H)；
[0274]
MS m/z(ESI):456.2[M+H]
+.
[0275]
第四步：(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺的合成
[0277]
(R)-6-氨基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)尼古丁腈(30mg,0.14mmol),苯基7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-羧酸酯(60mg,0.13mmol)溶于THF(5mL)中，N
2氛围下冷却至-78℃，滴加LiHMDS的THF(0.3mL,0.3mmol)溶液于反应液中，自然升至室温反应过夜。加入饱和NH
4Cl水溶液(50mL)，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析得标题化合物(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺(65mg,86％)。
[0278]
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ13.70(s,1H),8.18(s,1H),7.60(s,2H),5.41(s,1H),5.12(d,J＝7.8Hz,1H),4.73(s,2H),4.20-4.11(m,2H),4.06-3.99(m,2H),3.93(s,1H),3.52-3.48(m,7H),3.46-3.42(m,1H),3.39(s,3H),3.26-3.21(m,2H),2.83(t,J＝6.2Hz,2H),2.03-1.95(m,2H),1.91-1.83(m,2H),1.67-1.62(m,2H),1.31(d,J＝6.6Hz,3H)；
[0279]
MS m/z(ESI):568.3[M+H]
+.
[0280]
第五步：(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-甲酰基-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺的合成
[0282]
(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-(二甲氧基甲基)-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺(65mg,0.12mmol)溶于THF/水(体积比：11/4，4.5mL)中，加入浓HCl(0.45mL,5.4mmol)，室温反应2h。加入饱和NaHCO
3水溶液(50mL)，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相并用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析得标题化合物(R)-N-(5-氰基-4-((1-甲氧基丙烷-2-基)氨基)吡啶-2-基)-7-甲酰基-6-((2-羰基-1,3-噁吖庚环-3-基)甲基)-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺(30mg,51％)。
[0283]
1H NMR(400MHz,CDCl
3)δ13.57(s,1H),10.26(s,1H),8.17(s,1H),7.71(s,1H),7.63(s,1H),5.27(s,1H),4.95(s,2H),4.19-4.12(m,2H),4.11-4.04(m,2H), 3.94(s,1H),3.52(m,1H),3.48-3.37(m,4H),3.33-3.28(m,2H),2.93(t,J＝6.3Hz,2H),2.04(m,2H),1.93-1.85(m,2H),1.73(m,2H),1.39-1.28(m,3H)；
[0284]
MS m/z(ESI):522.2[M+H]
+.
[0285]
实施例2：式(I)化合物盐酸盐晶型I的制备
[0286]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙酸乙酯，然后向上述反应器中添加50.0μl盐酸，搅拌6小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物盐酸盐晶型I。
[0287]
实施例3：式(I)化合物盐酸盐晶型II的制备
[0288]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙醇，然后向上述反应器中添加50.0μl盐酸，搅拌6小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物盐酸盐晶型II。
[0289]
实施例4：式(I)化合物盐酸盐晶型III的制备
[0290]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL二氯甲烷，然后向上述反应器中添加50.0μl盐酸，搅拌6小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物盐酸盐晶型III。
[0291]
实施例5：式(I)化合物盐酸盐晶型IV的制备
[0292]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙腈，然后向上述反应器中添加50.0μl盐酸，得到澄清液，放置4℃条件下搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物盐酸盐晶型IV。
[0293]
实施例6：式(I)化合物盐酸盐晶型V的制备
[0294]
称取约500mg式(I)化合物盐酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙酸乙酯，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物盐酸盐晶型V。
[0295]
实施例7：式(I)化合物硫酸盐晶型I的制备
[0296]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙酸乙酯，然后向上述反应器中添加33.0μl硫酸，搅拌6小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物硫酸盐晶型I。
[0297]
实施例8：式(I)化合物硫酸盐晶型II的制备
[0298]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙腈，然后向上述反应器中添加33.0μl硫酸，搅拌6小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物硫酸盐晶型II。
[0299]
实施例9：式(I)化合物硫酸盐晶型III的制备
[0300]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL丙酮，然后向上述反应器中添加33.0μl硫酸，搅拌2小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物硫酸盐晶型III。
[0301]
实施例10：式(I)化合物硫酸盐晶型IV的制备
[0302]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL二氯甲烷，然后向上述反应器中添加33.0μl硫酸，搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物硫酸盐晶型IV。
[0303]
实施例11：式(I)化合物硫酸盐晶型V的制备
[0304]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙腈，然后向上述反应器中添加33.0μl硫酸，搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物硫酸盐晶型V。
[0305]
实施例12：式(I)化合物甲磺酸盐晶型I的制备
[0306]
称取约200mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙腈，然后向上述反应器中添加24.9mg甲磺酸，搅拌6小时，将悬浊液过滤得到固体， 即式(I)化合物甲磺酸盐晶型I。
[0307]
实施例13：式(I)化合物甲磺酸盐晶型II的制备
[0308]
称取约200mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙醇，然后向上述反应器中添加24.9mg甲磺酸，搅拌6小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物甲磺酸盐晶型II。
[0309]
实施例14：式(I)化合物甲磺酸盐晶型III的制备
[0310]
称取约200mg式(I)化合物甲磺酸盐样品，室温条件下放置湿度92.5％环境中5天，得到式(I)化合物甲磺酸盐晶型III。
[0311]
实施例15：式(I)化合物甲磺酸盐晶型IV的制备
[0312]
称取约500mg式(I)化合物甲磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL异丁醇，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物甲磺酸盐晶型IV。
[0313]
实施例16：式(I)化合物甲磺酸盐晶型V的制备
[0314]
称取约500mg式(I)化合物甲磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL异丙醇，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物甲磺酸盐晶型V。
[0315]
实施例17：式(I)化合物甲磺酸盐晶型VI的制备
[0316]
称取约500mg式(I)化合物甲磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL甲酸乙酯，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物甲磺酸盐晶型VI。
[0317]
实施例18：式(I)化合物甲磺酸盐晶型VII的制备
[0318]
称取约500mg式(I)化合物甲磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙酸乙酯，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物甲磺酸盐晶型VII。
[0319]
实施例19：式(I)化合物甲磺酸盐晶型VIII的制备
[0320]
称取约500mg式(I)化合物甲磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL丙酮，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物甲磺酸盐晶型VIII。
[0321]
实施例20：式(I)化合物苯磺酸盐晶型I的制备
[0322]
称取约200mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙醇，然后向上述反应器中添加50.56mg苯磺酸，搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物苯磺酸盐晶型I。
[0323]
实施例21：式(I)化合物苯磺酸盐晶型II的制备
[0324]
称取约500mg式(I)化合物苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL四氢呋喃，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物苯磺酸盐晶型II。
[0325]
实施例22：式(I)化合物苯磺酸盐晶型III的制备
[0326]
称取约500mg式(I)化合物苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL二氯甲烷，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物苯磺酸盐晶型III。
[0327]
实施例23：式(I)化合物苯磺酸盐晶型IV的制备
[0328]
称取约500mg式(I)化合物苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙腈，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物苯磺酸盐晶型IV。
[0329]
实施例24：式(I)化合物苯磺酸盐晶型V的制备
[0330]
称取约500mg式(I)化合物苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL75％乙醇水溶液，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物苯磺酸盐晶型V。
[0331]
实施例25：式(I)化合物苯磺酸盐晶型VI的制备
[0332]
称取约200mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL丙酮，然后向上述反应器中添加50.56mg苯磺酸，搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体238mg，即式(I)化合物苯磺酸盐晶型VI。
[0333]
实施例26：式(I)化合物苯磺酸盐晶型VII的制备
[0334]
称取约200mg苯磺酸盐样品，室温条件下放置在湿度92.5％环境中5天，得到式(I)化合物苯磺酸盐晶型VII。
[0335]
实施例27：式(I)化合物乙磺酸盐晶型I的制备
[0336]
称取约300mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙醇，然后向上述反应器中添加63.34mg乙磺酸，搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物乙磺酸盐晶型I。
[0337]
实施例28：式(I)化合物乙磺酸盐晶型II的制备
[0338]
称取约500mg式(I)化合物乙磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙酸乙酯，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即乙苯磺酸盐晶型II。
[0339]
实施例29：式(I)化合物乙磺酸盐晶型III的制备
[0340]
称取约500mg式(I)化合物乙磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL二氯甲烷，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即乙苯磺酸盐晶型III。
[0341]
实施例30：式(I)化合物草酸盐晶型I的制备
[0342]
称取约500mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL二氯甲烷，然后向上述反应器中添加120mg草酸，搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物草酸盐晶型I。
[0343]
实施例31：式(I)化合物草酸盐晶型II的制备
[0344]
称取约500mg式(I)化合物草酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL丙酮，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即草酸盐晶型II。
[0345]
实施例32：式(I)化合物马来酸盐晶型I的制备
[0346]
称取1.0g式(I)化合物加入反应器中，加入马来酸1.0g和乙酸乙酯50ml，在室温下搅拌7天，过滤得到式(I)化合物马来酸盐晶型I。
[0347]
实施例33：式(I)化合物马来酸盐晶型I的制备
[0348]
称取约200mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL二氯甲烷，然后向上述反应器中添加112mg马来酸，搅拌得到澄清液，缓慢滴加30ml乙酸乙酯，加入10mg马来酸盐晶型I晶种继续搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物马来酸盐晶型I。
[0349]
实施例34：式(I)化合物马来酸盐晶型I的制备
[0350]
称取2g式(I)化合物加入到反应器中，室温条件下加入100ml二氯甲烷，加入马来酸1.1g，滴加正庚烷30ml后加入30mg晶型I晶种，继续滴加正庚烷50ml，室温搅拌24h，过滤得到式(I)化合物马来酸盐晶型I。
[0351]
实施例35：式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型I的制备
[0352]
称取约200mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙酸乙酯，然后向上述反应器中添加51mg对甲苯磺酸，搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型I。
[0353]
实施例36：式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型II的制备
[0354]
称取约500mg式(I)化合物对甲苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙醇，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即对甲苯磺酸盐晶型II。
[0355]
实施例37：式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型III的制备
[0356]
称取约500mg式(I)化合物对甲苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL水，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即目标产物对甲苯磺酸盐晶型III。
[0357]
实施例38：式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IV的制备
[0358]
称取约500mg式(I)化合物对甲苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙酸乙酯，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IV。
[0359]
实施例39：式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型V的制备
[0360]
称取约500mg式(I)化合物对甲苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL二氯甲烷/乙酸乙酯(1:1)混合溶剂，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型V。
[0361]
实施例40：式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VI的制备
[0362]
称取约500mg式(I)化合物对甲苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL丙酮/乙酸乙酯(1:1)混合溶剂，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IV。
[0363]
实施例41：式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VII的制备
[0364]
称取约200mg式(I)化合物加入反应器中，室温条件下加入10.0mL乙醇，然后向上述反应器中添加51mg对甲苯磺酸，搅拌12小时，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VII。
[0365]
实施例41：式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VIII的制备
[0366]
称取约500mg式(I)化合物对甲苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL丙酮，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型VIII。
[0367]
实施例42：式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IX的制备
[0368]
称取约500mg式(I)化合物对甲苯磺酸盐样品加入反应器中，室温条件下加入10.0mL甲醇，搅拌3天，将悬浊液过滤得到固体，即式(I)化合物对甲苯磺酸盐晶型IX。
[0370]
对本发明提供的式(I)化合物草酸盐晶型I和晶型II进行流动性考察，测量休止角，具体结果如下表1。
[0372]
[表0001]
| 草酸盐晶型 |
休止角(°) |
USP分类 |
| 晶型I |
26 |
卓越 |
| 晶型II |
29 |
卓越 |
[0374]
将本发明提供的式(I)化合物的甲磺酸盐晶型VIII和马来酸盐晶型I的样品放置在高温40℃和高湿(RH92.5％)条件下，分别于0、1、2、3、6个月取样考察有关物质，具体检测结果如表2。
[0380]
本实验采用荧光共振能量转移(TR-FRET)的方法测试化合物对FGFR4激酶活性的抑制作用，并得出化合物对FGFR4激酶活性的半数抑制浓度IC
50。
[0381]
1)在384孔板中加入1～5uL FGFR4酶溶液，酶终浓度为0.1～5nM。
[0382]
2)加入1～5uL梯度稀释好的化合物溶液。
[0383]
3)加入1～5uL底物混合液包含底物多肽终浓度5～50nM和ATP终浓度10～200uM。
[0385]
5)加入10uL EDTA和含标记抗体的检测液，室温孵育1小时。
[0386]
6)酶标仪测定各板孔的665nm荧光信号值。
[0388]
8)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC
50，具体实施例酶学活性见表3。
[0390]
本实验采用荧光共振能量转移(TR-FRET)的方法测试化合物对FGFR1激酶活性的抑制作用，并得出化合物对FGFR1激酶活性的半数抑制浓度IC
50。
[0391]
1)在384孔板中加入1～5uL FGFR1酶溶液，酶终浓度为0.1～5nM。
[0392]
2)加入1～5uL梯度稀释好的化合物溶液。
[0393]
3)加入1～5uL底物混合液包含底物多肽终浓度5～50nM和ATP终浓度10～200uM。
[0395]
5)加入10uL EDTA和含标记抗体的检测液，室温孵育1小时。
[0396]
6)酶标仪测定各板孔的665nm荧光信号值。
[0398]
8)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC
50，具体实施例酶学活性见表3。
[0400]
[表0002]
| 化合物编号 |
FGFR4IC 50(nM) |
FGFR1IC 50(nM) |
| 式(I)化合物 |
0.96 |
>10000 |
[0402]
本实验采用CellTiter-Glo的方法测试化合物对Hep 3B细胞增殖的抑制作用，并得出化合物抑制细胞增殖活性的半数抑制浓度IC
50。
[0403]
1)在96孔细胞培养板中接种50～100uL的Hep 3B细胞悬液，密度为1～5×10
4细胞/mL，将培养板于培养箱培养16～24小时(37℃,5％CO
2)。
[0404]
2)向培养板细胞中加入梯度稀释的不同浓度的待测化合物溶液，将培养板在培养箱孵育72小时(37℃,5％CO
2)。
[0405]
3)每孔加入50～100uL CellTiter-Glo试剂，室温振荡或静置5～30分钟。
[0406]
4)酶标仪测定各板的化学发光信号值。
[0408]
6)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC
50，具体实施例细胞活性见表4。
[0410]
本实验采用CellTiter-Glo的方法测试化合物对HuH-7细胞增殖的抑制作用，并得出化合物抑制细胞增殖活性的半数抑制浓度IC
50。
[0411]
1)在96孔细胞培养板中接种50～100uL的HuH-7细胞悬液，密度为1～5×10
4细胞/mL，将培养板于培养箱培养16～24小时(37℃,5％CO
2)。
[0412]
2)向培养板细胞中加入梯度稀释的不同浓度的待测化合物溶液，将培养板在培养箱孵育72小时(37℃,5％CO
2)。
[0413]
3)每孔加入50～100uL CellTiter-Glo试剂，室温振荡或静置5～30分钟。
[0414]
4)酶标仪测定各板的化学发光信号值。
[0416]
6)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC
50，具体实施例细胞活性见表4。
[0417]
5.SK-HEP-1细胞增殖抑制实验
[0418]
本实验采用CellTiter-Glo的方法测试化合物对SK-HEP-1细胞增殖的抑制作用，并得出化合物抑制细胞增殖活性的半数抑制浓度IC
50。
[0419]
1)在96孔细胞培养板中接种50～100uL的SK-HEP-1细胞悬液，密度为1～5×10
4
[0420]
细胞/mL，将培养板于培养箱培养16～24小时(37℃,5％CO
2)。
[0421]
2)向培养板细胞中加入梯度稀释的不同浓度的待测化合物溶液，将培养板在培养箱孵育72小时(37℃,5％CO
2)。
[0422]
3)每孔加入50～100uL CellTiter-Glo试剂，室温振荡或静置5～30分钟。
[0423]
4)酶标仪测定各板的化学发光信号值。
[0425]
6)根据不同浓度的抑制率通过曲线拟合得出化合物的IC
50，具体实施例细胞活性见表4。
[0427]
[表0003]
| 化合物编号 |
Hep 3B IC 50(nM) |
HuH-7IC 50(nM) |
SK-HEP-1 IC 50(nM) |
| 式(I)化合物 |
0.6 |
2.6 |
>10000 |
[0429]
本发明优选实施例的大鼠药物代谢动力学试验采用SD大鼠(上海杰思捷实验动物有限公司)进行。
[0431]
■给药剂量：5毫克/10毫升/千克。
[0432]
■制剂处方：0.5％CMC和1％Tween 80，超声溶解。
[0433]
■取样点：给药后0.5、1、2、4、6、8和24小时。
[0435]
1)静脉采血0.2mL，置于K
2EDTA试管中，室温1000～3000×g离心5～20min分离血浆，于-80℃保存。
[0436]
2)血浆样品40uL加入160uL乙腈沉淀,混合后500～2000×g离心5～20分钟。
[0437]
3)取处理后上清溶液100uL进行LC/MS/MS分析待测化合物的浓度，LC/MS/MS分析仪器：AB Sciex API 4000。
[0439]
●液相条件：Shimadzu LC-20AD泵
[0440]
●色谱柱：phenomenex Gemiu 5um C18 50×4.6mm
[0441]
●移动相：A液为0.1％甲酸水溶液，B液为乙腈
[0443]
●洗脱时间：0-3.5分钟，洗脱液如下：
[0444]
[表0004]
| 时间/分钟 |
A液 |
B液 |
| 0.01 |
80％ |
20％ |
| 0.5 |
80％ |
20％ |
| 1.2 |
10％ |
90％ |
| 2.6 |
10％ |
90％ |
| 2.7 |
80％ |
20％ |
| 3.8 |
80％ |
20％ |
[0446]
主要参数用WinNonlin 6.1计算得到，大鼠药代实验结果见下表5：
[0452]
通过体内药效实验筛选出药效较为明显且毒副作用较小的化合物。
[0455]
1、超净工作台(BSC-1300II A2，上海博讯实业有限公司医疗设备厂)
[0457]
3、离心机(Centrifuge 5720R，Eppendorf)
[0458]
4、全自动细胞计数仪(Countess II，Life)
[0459]
5、移液器(10-20uL，Eppendorf)
[0461]
6、游标卡尺(500-196，日本三丰)
[0462]
7、细胞培养瓶(T25/T75/T225，Corning)
[0464]
1、MEM培养基(11095-080，gibico)
[0465]
2、胎牛血清(FBS)(10099-141，gibico)
[0466]
3、0.25％胰蛋白酶(25200-056，gibico)
[0467]
4、青链霉素双抗(SV30010，GE)
[0468]
5、磷酸盐缓冲液(PBS)(10010-023，gibico)
[0471]
a,从细胞库中取出一株Hep 3B细胞，用MEM培养基(MEM+10％FBS+1％Glu+1％SP)复苏细胞，复苏后的细胞置细胞培养瓶中(在瓶壁标记好细胞种类、日期、培养人名字等)置于CO2培养箱中培养(培养箱温度为37℃，CO2浓度为5％)。
[0472]
b,待细胞铺满培养瓶底部80-90％后传代，传代后细胞继续置于CO2培养箱中培养。重复该过程直到细胞数满足体内药效需求。
[0473]
c,收集培养好的细胞，用全自动细胞计数仪计数，根据计数结果用PBS重悬细胞，制成细胞悬液(密度7×107/mL)，置于冰盒中待用。
[0475]
a,接种前用一次性大小鼠通用耳标标记裸鼠，并用75％医用酒精消毒接种部位皮肤。
[0476]
b,接种时混匀细胞悬液，用1mL注射器抽取0.1～1mL细胞悬液、排除气泡，然后将注射器置于冰袋上待用。
[0477]
c,依次给试验裸鼠接种(接种部位位于裸鼠右侧背部靠右肩位置皮下接种0.1mL细胞悬液)。
[0479]
a,根据肿瘤生长情况，在接种后第14-16天量瘤、并计算肿瘤大小。
[0480]
肿瘤体积计算：肿瘤体积(mm3)＝长(mm)×宽(mm)×宽(mm)/2
[0481]
b,根据肿瘤大小，采用随机分组的方法进行分组。
[0482]
c,根据分组结果，开始给予测试药物(给药方式：口服给药，给药剂量：30mg/kg，给药体积：10mL/kg，给药频率：2次/天，给药周期：14天，溶媒：0.5％CMC/1％吐温80)。
[0483]
d,开始给予测试药物后每周二次量瘤、称重。
[0486]
[表0005]
| 分组 |
动物数量(只) |
给药天数(天) |
抑瘤率 |
| 空白对照 |
5 |
14 |
- |
| 式(I)化合物 |
5 |
14 |
181.67％ |
[0487]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变型，这些改进和变型也应视为本发明的保护范围。
权利要求书
[权利要求 1]
式(I)化合物的可药用盐，所述可药用盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、高氯酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、醋酸盐、苹果酸盐、苯甲酸盐、对甲苯甲酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、乙磺酸盐、羟乙基磺酸盐、1-萘磺酸盐、2-萘磺酸盐、樟脑磺酸盐、三氟甲磺酸盐、三氟乙酸盐、乳酸盐、草酸盐、水杨酸盐、苯乙酸盐、扁桃酸盐、甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、草酸盐、羟乙酸盐、羟基马来酸盐、甲基马来酸盐、己二酸盐、肉桂酸盐、抗坏血酸盐、水杨酸盐、2-乙酸基苯甲酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、胆酸盐、天冬氨酸盐或谷氨酸盐；
[权利要求 3]
式(I)化合物盐酸盐的晶型I，其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.8、9.9、11.0、16.7和25.3的衍射峰。
[权利要求 4]
根据权利要求3所述的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.8、8.2、9.9、11.0、12.1、12.4、13.0、14.0、16.7、18.5、19.0、22.3、25.3、25.8、26.2和27.7的衍射峰。
[权利要求 5]
根据权利要求3所述的晶型I，其粉末X-射线衍射图谱如图1所示。
[权利要求 6]
式(I)化合物盐酸盐的晶型II，其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.0、6.5、15.7和23.8的衍射峰。
[权利要求 7]
根据权利要求6所述的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.0、6.5、8.4、11.7、12.1、13.2、14.6、15.7、16.7、17.7、18.7、19.1、20.0、22.5、23.0、23.8、24.5和25.6的衍射峰。
[权利要求 8]
根据权利要求6所述的晶型II，其粉末X-射线衍射图谱如图2所示。
[权利要求 9]
式(I)化合物盐酸盐的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.1、7.0、9.2、10.2和21.0的衍射峰。
[权利要求 10]
根据权利要求9所述的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.1、7.0、9.2、10.2、12.4、14.4、16.4、16.9、18.6、19.5、21.0、24.6、25.6和26.2的衍射峰。
[权利要求 11]
根据权利要求9所述的式(I)化合物盐酸盐的晶型III，其粉末X-射线衍射图谱如图3所示。
[权利要求 12]
式(I)化合物盐酸盐的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.1、7.8、9.5、11.9和25.0的衍射峰。
[权利要求 13]
根据权利要求12所述的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.9、6.1、7.8、8.8、9.5、10.0、11.9、12.4、15.5、21.2、23.6、25.0、26.5和32.5的衍射峰。
[权利要求 14]
根据权利要求12所述的式(I)化合物盐酸盐的晶型IV，其粉末X-射线衍射图谱如图4所示。
[权利要求 15]
式(I)化合物盐酸盐的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.5、12.0、13.2、16.5和23.6的衍射峰。
[权利要求 16]
根据权利要求15所述的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.8、6.5、8.8、11.5、12.0、13.2、14.4、14.8、15.2、16.5、20.3、21.3、23.6、25.3和27.0的衍射峰。
[权利要求 17]
根据权利要求15所述的晶型V，其粉末X-射线衍射图谱如图5所示。
[权利要求 18]
式(I)化合物硫酸盐的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.6、6.4、7.6、13.4和27.1的衍射峰。
[权利要求 19]
根据权利要求18所述的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.6、6.4、7.6、11.3、12.1、12.4、13.4、14.1、15.3、18.1、19.0、20.9、21.5、24.5、24.9和27.1的衍射峰。
[权利要求 20]
根据权利要求18所述的式(I)化合物硫酸盐的晶型I，其粉末X-射线衍射图谱如图6所示。
[权利要求 21]
式(I)化合物硫酸盐的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.8、6.1、6.5、9.0、13.0和23.9的衍射峰。
[权利要求 22]
根据权利要求21所述的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.8、6.1、6.5、7.8、9.0、11.8、13.0、14.6、15.4、16.0、16.6、17.4、18.1、19.8、21.6、22.1、23.0和23.9的衍射峰。
[权利要求 23]
根据权利要求21所述的晶型II，其粉末X-射线衍射图谱如图7所示。
[权利要求 24]
式(I)化合物硫酸盐的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.6、7.8、15.5、18.1、25.0和27.1的衍射峰。
[权利要求 25]
根据权利要求24所述的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.6、7.8、9.5、11.5、12.2、12.6、13.6、14.3、15.5、17.1、18.1、18.7、19.1、19.8、21.1、21.6、23.2、24.6、25.0和27.1的衍射峰。
[权利要求 26]
根据权利要求24所述的晶型III，其粉末X-射线衍射图谱如图8所示。
[权利要求 27]
式(I)化合物硫酸盐的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.2、6.6、9.8、20.5和23.3的衍射峰。
[权利要求 28]
根据权利要求27所述的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.2、6.6、8.7、9.8、11.3、13.4、16.5、20.5、23.3、25.4、26.7和28.8的衍射峰。
[权利要求 29]
根据权利要求27所述的晶型IV，其粉末X-射线衍射图谱如图9所示。
[权利要求 30]
式(I)化合物硫酸盐的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.8、6.3、13.5、24.0和24.8的衍射峰。
[权利要求 31]
根据权利要求30所述的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.8、6.3、13.5、14.5、14.9、16.8、17.4、18.1、19.4、20.5、20.9、22.8、24.0、24.8、26.7、28.3和31.8的衍射峰。
[权利要求 32]
根据权利要求30所述的晶型V，其粉末X-射线衍射图谱如图10所示。
[权利要求 33]
式(I)化合物甲磺酸盐的晶型。
[权利要求 34]
式(I)化合物甲磺酸盐的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.2、7.8、9.6、13.8、18.9和25.6的衍射峰。
[权利要求 35]
根据权利要求34所述的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.2、7.8、9.6、12.5、13.8、14.6、15.4、16.1、18.9、19.4、20.5、21.0、22.4、23.3、24.0、25.1、25.6、26.6和27.9的衍射峰。
[权利要求 36]
根据权利要求34所述的甲磺酸盐晶型I，其粉末X-射线衍射图谱如图11所示。
[权利要求 37]
式(I)化合物甲磺酸盐的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：7.5、8.2、13.7、17.3、20.9和25.1的衍射峰。
[权利要求 38]
根据权利要求36所述的甲磺酸盐晶型II，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：7.5、8.2、11.5、13.7、15.1、17.3、20.0、20.9、23.0、25.1和28.9的衍射峰。
[权利要求 39]
根据权利要求37所述的甲磺酸盐晶型II，其粉末X-射线衍射图谱如图14所示。
[权利要求 40]
式(I)化合物甲磺酸盐的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.2、13.5、16.3、19.5、22.0和24.2的衍射峰。
[权利要求 41]
根据权利要求40所述的甲磺酸盐晶型III，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.2、6.9、11.1、12.5、13.5、14.7、16.3、17.2、18.4、19.5、20.4、22.0、24.2、24.8和30.4的衍射峰。
[权利要求 42]
根据权利要求40所述的甲磺酸盐晶型III，其粉末X-射线衍射图谱如图15所示。
[权利要求 43]
式(I)化合物甲磺酸盐的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.1、9.0、11.0、13.6、14.8、22.3和23.8的衍射峰。
[权利要求 44]
根据权利要求43所述的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.1、6.9、9.0、11.0、13.6、14.8、18.4、18.9、20.6、22.3、23.8和25.4的衍射峰。
[权利要求 45]
根据权利要求43所述的晶型IV，其粉末X-射线衍射图谱如图16所示。
[权利要求 46]
式(I)化合物甲磺酸盐的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.1、7.9、9.4、15.9、19.2和24.5的衍射峰。
[权利要求 47]
根据权利要求46所述的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.1、7.9、9.4、10.1、12.2、12.6、13.3、14.3、15.9、17.2、19.1、21.8、22.8、23.7、24.5、27.3和29.1的衍射峰。
[权利要求 48]
根据权利要求46所述的晶型V，其粉末X-射线衍射图谱如图17所示。
[权利要求 49]
式(I)化合物甲磺酸盐的晶型VI，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：7.6、8.6、13.7、17.5、22.1、23.7和28.8的衍射峰。
[权利要求 50]
根据权利要求49所述的晶型VI，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：7.6、8.6、11.4、13.7、15.1、17.5、18.5、18.8、20.1、21.1、22.1、23.1、23.7、24.5、25.7和28.8的衍射峰。
[权利要求 51]
根据权利要求49所述的晶型VI，其粉末X-射线衍射图谱如图18所示。
[权利要求 52]
式(I)化合物甲磺酸盐的晶型VII，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.2、7.1、10.4、14.1和23.3的衍射峰。
[权利要求 53]
根据权利要求52所述的晶型VII，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.2、7.1、10.4、12.0、13.2、14.1、16.0、17.2、18.7、23.3、和30.2的衍射峰。
[权利要求 54]
根据权利要求52所述的晶型VII，其粉末X-射线衍射图谱如图19所示。
[权利要求 55]
式(I)化合物甲磺酸盐的晶型VIII，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.9、6.4、13.6、16.9、24.1和25.0的衍射峰。
[权利要求 56]
根据权利要求55所述的晶型VIII，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.9、6.4、13.6、14.6、15.1、16.9、17.6、18.2、19.6、20.6、21.0、22.7、24.1、25.0、26.8、28.4和31.9的衍射峰。
[权利要求 57]
根据权利要求55所述的晶型VIII，其粉末X-射线衍射图谱如图20所示。
[权利要求 58]
式(I)化合物苯磺酸盐的晶型。
[权利要求 59]
式(I)化合物苯磺酸盐的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.4、5.9、7.1、10.4、14.8、17.6和21.9的衍射峰。
[权利要求 60]
根据权利要求59所述的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.4、5.9、6.8、7.1、8.3、8.7、10.4、11.7、14.0、14.8、15.1、17.6、20.9、21.9、23.7、24.8和26.6的衍射峰。
[权利要求 61]
根据权利要求59所述的晶型I，其粉末X-射线衍射图谱如图23所示。
[权利要求 62]
式(I)化合物苯磺酸盐的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：4.4、6.0、9.3、11.5、17.5、21.0和26.0的衍射峰。
[权利要求 63]
根据权利要求62所述的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：4.4、6.0、9.3、11.5、14.8、15.3、17.5、20.0、21.0、21.9、22.7、24.6和26.0的衍射峰。
[权利要求 64]
根据权利要求62所述的晶型II，其粉末X-射线衍射图谱如图24所示。
[权利要求 65]
式(I)化合物苯磺酸盐的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：7.7、8.3、8.6、17.2、23.2和26.0的衍射峰。
[权利要求 66]
根据权利要求65所述的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：7.7、8.3、8.6、11.6、13.8、14.5、17.2、18.3、18.9、20.8、21.8、23.2和26.0的衍射峰。
[权利要求 67]
根据权利要求65所述的晶型III，其粉末X-射线衍射图谱如图25所示。
[权利要求 68]
式(I)化合物苯磺酸盐的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.7、6.4、13.0、14.4和23.8的衍射峰。
[权利要求 69]
根据权利要求68所述的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.7、6.4、12.0、13.0、14.4、15.6、16.5、17.5、18.6、21.0、21.7、23.2、23.8、26.0、26.6和30.0的衍射峰。
[权利要求 70]
根据权利要求68所述的晶型IV，其粉末X-射线衍射图谱如图26所示。
[权利要求 71]
式(I)化合物苯磺酸盐的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.7、7.5、10.3、14.3和25.1的衍射峰。
[权利要求 72]
根据权利要求71所述的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.7、7.5、10.3、11.0、11.3、11.7、13.8、14.3、16.3、16.6、17.8、18.3、19.0、20.1、23.4、25.1和27.5的衍射峰。
[权利要求 73]
根据权利要求71所述的晶型V，其粉末X-射线衍射图谱如图27所示。
[权利要求 74]
式(I)化合物苯磺酸盐的晶型VI，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.0、7.4、13.5、18.6、23.6和24.5的衍射峰。
[权利要求 75]
根据权利要求84所述的晶型VI，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.0、7.4、11.6、12.2、12.8、13.5、14.8、16.5、17.5、18.6、20.4、21.0、21.6、22.7、23.6、24.5、25.9、26.7和27.5的衍射峰。
[权利要求 76]
根据权利要求74所述的晶型VI，其粉末X-射线衍射图谱如图28所示。
[权利要求 77]
式(I)化合物苯磺酸盐的晶型VII，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.9、7.1、9.7、15.0、16.4和23.7的衍射峰。
[权利要求 78]
根据权利要求77所述的晶型VII，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.9、7.1、9.7、11.9、12.9、13.4、15.0、16.4、18.3、18.8、20.5、21.2、21.9、22.8和23.7的衍射峰。
[权利要求 79]
根据权利要求77所述的晶型VII，其粉末X-射线衍射图谱如图29所示。
[权利要求 80]
式(I)化合物乙磺酸盐的晶型。
[权利要求 81]
式(I)化合物乙磺酸盐的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：7.5、8.3和17.9的衍射峰。
[权利要求 82]
根据权利要求80所述的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：7.5、8.3、10.5、12.9、17.9、23.5和25.0的衍射峰。
[权利要求 83]
根据权利要求80所述的晶型I，其粉末X-射线衍射图谱如图30所示。
[权利要求 84]
式(I)化合物乙磺酸盐的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.0、6.6、12.1和24.1的衍射峰。
[权利要求 85]
根据权利要求84所述的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.8、6.0、6.6、8.5、12.1、13.3、14.7、15.4、16.3、16.8、17.3、19.1、22.1、23.3和24.1的衍射峰。
[权利要求 86]
根据权利要求84所述的晶型II，其粉末X-射线衍射图谱如图31所示。
[权利要求 87]
式(I)化合物乙磺酸盐的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：6.0、7.6、12.2、13.6和18.3的衍射峰。
[权利要求 88]
根据权利要求87所述的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.0、7.6、9.4、12.2、13.6、14.4、15.2、16.0、17.2、18.4、19.3和20.4的衍射峰。
[权利要求 89]
根据权利要求87所述的晶型III，其粉末X-射线衍射图谱如图32所示。
[权利要求 91]
式(I)化合物草酸盐的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：4.1、6.9、7.9、14.5、19.4、23.8和27.0的衍射峰。
[权利要求 92]
根据权利要求91所述的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：4.1、6.9、7.9、11.7、12.2、13.0、13.9、14.5、15.0、16.4、17.6、19.4、20.3、21.0、23.8、25.5、26.0和27.0的衍射峰。
[权利要求 93]
根据权利要求91所述的晶型I，其粉末X-射线衍射图谱如图33所示。
[权利要求 94]
式(I)化合物草酸盐的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：4.0、6.8、7.7、8.1、16.7和23.7的衍射峰。
[权利要求 95]
根据权利要求94所述的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：4.0、6.8、7.7、8.1、14.6、16.7、17.4、17.9、20.9、21.4、22.1、22.7、23.7和27.7的衍射峰。
[权利要求 96]
根据权利要求94所述的晶型II，其粉末X-射线衍射图谱如图36所示。
[权利要求 97]
式(I)化合物马来酸盐的晶型。
[权利要求 98]
式(I)化合物马来酸盐的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.6、8.1、10.8、13.8、23.0和26.3的衍射峰。
[权利要求 99]
根据权利要求98所述的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.6、6.4、8.1、10.8、11.6、12.4、12.9、13.3、13.8、14.7、15.5、16.7、17.4、17.8、18.0、18.6、20.1、21.1、22.6、23.0、23.8、24.8、26.3和28.1的衍 射峰。
[权利要求 100]
根据权利要求98所述的晶型I，其粉末X-射线衍射图谱如图39所示。
[权利要求 101]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型。
[权利要求 102]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：7.6、13.5、15.0、20.6和23.5的衍射峰。
[权利要求 103]
根据权利要求102所述的晶型I，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：7.6、8.5、10.1、11.9、13.0、13.5、15.0、16.5、17.0、17.4、18.4、18.7、20.6、20.9、23.5、24.1、25.7和26.6的衍射峰。
[权利要求 104]
根据权利要求102所述的晶型I，其粉末X-射线衍射图谱如图41所示。
[权利要求 105]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：7.5、8.1、13.1、20.7和22.9的衍射峰。
[权利要求 106]
根据权利要求101所述的晶型II，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：7.5、8.1、13.1、13.5、16.5、16.9、17.7、19.9、20.7、21.1、22.9、24.9、25.5和28.7的衍射峰。
[权利要求 107]
根据权利要求105所述的晶型II，其粉末X-射线衍射图谱如图42所示。
[权利要求 108]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：8.3、12.8、14.7、16.6和24.3的衍射峰。
[权利要求 109]
根据权利要求108所述的晶型III，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.4、6.9、8.3、8.8、9.1、10.5、10.8、11.4、12.1、12.8、14.7、15.5、16.6、17.2、17.8、18.5、18.8、19.3、19.9、20.4、21.1、22.4、23.4、23.9、24.3、25.4、25.8、26.8、27.5、28.4和29.6的衍射峰。
[权利要求 110]
根据权利要求108所述的式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型III，其粉末X-射线衍射图谱如图43所示。
[权利要求 111]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：7.3、14.4、21.2、23.5和25.3的衍射峰。
[权利要求 112]
根据权利要求111所述的晶型IV，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.7、7.3、10.1、10.6、11.7、14.4、16.1、16.6、17.2、18.5、18.9、19.9、20.6、21.2、22.3、22.9、23.5、24.4、25.3、25.8、26.9、27.4、28.1、29.2、30.1、31.0、31.6、32.5、33.1、33.6、34.5、35.5、367、38.9和42.7的衍射峰。
[权利要求 113]
根据权利要求111所述的晶型IV，其粉末X-射线衍射图谱如图44所示。
[权利要求 114]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：8.1、10.2、11.0、19.4和24.1的衍射峰。
[权利要求 115]
根据权利要求114所述的晶型V，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：8.1、8.5、9.0、10.2、11.0、13.8、14.8、16.6、17.0、17.5、18.3、19.4、20.6、22.1、23.0、24.1、25.8、28.1、30.1和30.7的衍射峰。
[权利要求 116]
根据权利要求114所述的晶型V，其粉末X-射线衍射图谱如图45所示。
[权利要求 117]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型VI，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：7.2、12.5、16.5和21.0的衍射峰。
[权利要求 118]
根据权利要求117所述的晶型VI，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：6.8、7.2、7.7、10.0、10.4、11.6、12.5、14.3、16.5、17.1、17.5、18.2、19.2、19.7、21.0、21.7、23.5、23.7、24.4、25.3、26.8和29.4的衍射峰。
[权利要求 119]
根据权利要求117所述的晶型VI，其粉末X-射线衍射图谱如图46所示。
[权利要求 120]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型VII，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：5.7、6.9、9.9和17.6的衍射峰。
[权利要求 121]
根据权利要求120所述的晶型VII，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：5.7、6.9、7.4、8.7、9.9、11.5、12.5、14.6、15.7、17.6、23.6、24.7和26.5的衍射峰。
[权利要求 122]
根据权利要求120所述的晶型VII，其粉末X-射线衍射图谱如图47所示。
[权利要求 123]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型VIII，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：4.2、5.9、7.2、9.0和25.3的衍射峰。
[权利要求 124]
根据权利要求123所述的晶型VIII，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：4.2、5.9、7.2、9.0、10.3、11.0、14.3、15.2、16.6、18.9、19.7、19.9、21.0、22.1、23.6、25.3、26.2、29.5和31.1的衍射峰。
[权利要求 125]
根据权利要求123所述的晶型VIII，其粉末X-射线衍射图谱如图48所示。
[权利要求 126]
式(I)化合物对甲苯磺酸盐的晶型IX，其特征在于其XRPD图谱中至少包含有2θ±0.2°为：7.0、7.7、9.4、12.9和15.4的衍射峰。
[权利要求 127]
根据权利要求126所述的晶型IX，其特征在于其XRPD图谱中包含有2θ±0.2°为：7.0、7.7、9.4、10.8、12.2、12.9、13.7、15.4、18.0、20.5、21.9、23.2、26.7和28.0的衍射峰。
[权利要求 128]
根据权利要求126所述的晶型IX，其粉末X-射线衍射图谱如图49所示。
[权利要求 129]
一种药物组合物，其包括治疗有效剂量的权利要求1所述的可药用盐、或权利要求2-128任一所述的式(I)化合物的晶型及可药用的载体。
[权利要求 130]
权利要求1所述的可药用盐、或2-128任一所述的式(I)化合物晶型，或权利要求129所述的药物组合物在制备FGFR4抑制剂药物中的应用。
[权利要求 131]
权利要求1所述的可药用盐、或2-128任一所述的式(I)化合物晶型，或权利要求129所述的药物组合物在制备治疗癌症的药物中的应用。
[权利要求 132]
根据权利要求131所述的应用，其中所述癌症是肝癌、胃癌、前列腺癌、皮肤癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌、胶质瘤或横纹肌肉瘤。
附图