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1. (WO2019050051) 2-O-SULFATION ENZYME MUTANT AND 3-O-SULFATION ENZYME MUTANT, AND METHOD FOR USING SAME
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Pub. No.: WO/2019/050051 International Application No.: PCT/JP2018/033897
Publication Date: 14.03.2019 International Filing Date: 05.09.2018
IPC:
C12N 15/70 (2006.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
N
MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15
Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09
Recombinant DNA-technology
63
Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
70
Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
Applicants:
AJINOMOTO CO., INC. [JP/JP]; 15-1, Kyobashi 1-chome, Chuo-ku, Tokyo 1048315, JP
Inventors:
TSUJI, Chihiro; JP
SHIMIZU, Tomoko; JP
TAGAMI, Uno; JP
MIHARA, Yasuhiro; JP
SUGIKI, Masayuki; JP
NAKANO, Shogo; JP
MOTOYAMA, Tomoharu; JP
ITO, Sohei; JP
Agent:
SAKAI INTERNATIONAL PATENT OFFICE; Toranomon Mitsui Building, 8-1, Kasumigaseki 3-chome, Chiyoda-ku, Tokyo 1000013, JP
Priority Data:
2017-17063705.09.2017JP
Title (EN) 2-O-SULFATION ENZYME MUTANT AND 3-O-SULFATION ENZYME MUTANT, AND METHOD FOR USING SAME
(FR) MUTANT DE L'ENZYME DE 2-O-SULFATATION ET MUTANT DE L'ENZYME DE 3-O-SULFATATION, ET SA MÉTHODE D'UTILISATION
Abstract:
(EN) The present invention provides a 2-OST mutant exhibiting a high activity. Specifically, the present invention provides a 2-O-sulfation enzyme mutant, having a substitution of a leucine residue at position 321 with a basic amino acid residue in any one amino acid sequence of: (a) the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; (b) an amino acid sequence comprising one or several amino acid substitutions, deletions, insertions, or additions in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; or (c) an amino acid sequence having 90% or more identity to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; or (d) the amino acid sequence consisting of amino acid residues at positions 69 to 356 in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; (e) an amino acid sequence comprising one or several amino acid substitutions, deletions, insertions, or additions in the amino acid sequence consisting of amino acid residues at positions 69 to 356 in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; or (f) an amino acid sequence having 90% or more identity to the amino acid sequence consisting of amino acid residues at positions 69 to 356 in the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2; and having a 2-O-sulfate transfer activity.
(FR) La présente invention concerne un mutant de la 2-OST présentant une activité élevée. Spécifiquement, la présente invention concerne un mutant de l'enzyme de 2-O-sulfatation, présentant une substitution d'un résidu leucine en position 321 par un résidu acide aminé basique dans n'importe quelle séquence d'acides aminés parmi les suivantes : (a) la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2; (b) une séquence d'acides aminés comprenant une ou plusieurs substitutions, délétions, insertions ou additions d'acides aminés dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2; ou (c) une séquence d'acides aminés présentant 90 % ou plus d'identité avec la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2; ou (d) la séquence d'acides aminés constituée des résidus acides aminés situés entre les positions 69 et 356 de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2; (e) une séquence d'acides aminés comprenant une ou plusieurs substitutions, délétions, insertions ou additions d'acides aminés dans la séquence d'acides aminés constituée des résidus d'acides aminés situés entre les positions 69 et 356 de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2; ou (f) une séquence d'acides aminés présentant 90 % ou plus d'identité avec la séquence d'acides aminés constituée des résidus d'acides aminés situés entre les positions 69 et 356 de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2; et possédant une activité de transfert du 2-O-sulfate.
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Filing Language: English (EN)