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1. (WO2019025444) MEANS AND METHODS FOR THE SELECTIVE STABILIZATION OF RNA VIA CAS5 AND CAS7 PROTEINS
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Pub. No.: WO/2019/025444 International Application No.: PCT/EP2018/070739
Publication Date: 07.02.2019 International Filing Date: 31.07.2018
IPC:
C12N 15/10 (2006.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
N
MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15
Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09
Recombinant DNA-technology
10
Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
Applicants:
MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FÖRDERUNG DER WISSENSCHAFTEN E.V. [DE/DE]; Hofgartenstr. 8 80539 München, DE
Inventors:
GLEDITZSCH, Daniel; DE
RANDAU, Lennart; DE
Agent:
VOSSIUS & PARTNER PATENTANWÄLTE RECHTSANWÄLTE MBB; Siebertstraße 3 81675 München, DE
Priority Data:
17184103.431.07.2017EP
Title (EN) MEANS AND METHODS FOR THE SELECTIVE STABILIZATION OF RNA VIA CAS5 AND CAS7 PROTEINS
(FR) MOYENS ET PROCÉDÉS POUR LA STABILISATION SÉLECTIVE D'ARN PAR L'INTERMÉDIAIRE DE PROTÉINES CAS5 ET CAS7
Abstract:
(EN) The present invention relates to a method for producing an encased ribonucleic acid molecule, comprising (a) introducing a heterologous fusion construct into a host cell, said fusion construct encoding in expressible form a ribonucleic acid molecule comprising at its 5'-end a heterologous tag consisting of about 8 nucleotides and being recognized by a Cas5 protein, (b) introducing one or more nucleic acid molecules into said host cell, said one or more nucleic acid molecules encoding in expressible form a Cas5 protein and a Cas7 protein, and (c) culturing the host cell obtained in step (a) and (b) under conditions wherein the expressed Cas5 binds to the tag and the expressed Cas7 encases the ribonucleic acid molecule; or (a') introducing a heterologous fusion construct into a host cell, said fusion construct encoding in expressible form a ribonucleic acid molecule comprising at its 5'-end a heterologous tag consisting of about 8 nucleotides and being recognized by a Cas5 protein, said host cell comprising one or more nucleic acid molecules, said one or more nucleic acid molecules encoding in expressible form a Cas5 protein and a Cas7 protein, and (b') culturing the host cell obtained in step (a') under conditions wherein the expressed Cas5 binds to the tag and the expressed Cas7 encases the ribonucleic acid molecule; or (a") introducing one or more nucleic acid molecules into a host cell, said one or more nucleic acid molecules encoding in expressible form a Cas5 protein and a Cas7 protein, said host cell comprising a heterologous fusion construct, said fusion construct encoding in expressible form a ribonucleic acid molecule comprising at its 5'-end a heterologous tag consisting of about 8 nucleotides and being recognized by a Cas5 protein, and (b") culturing the host cell obtained in step (a") under conditions wherein the expressed Cas5 binds to the tag and the expressed Cas7 encases the ribonucleic acid molecule.
(FR) La présente invention concerne un procédé de production d'une molécule d'acide ribonucléique encapsulée, comprenant (a) l'introduction d'une construction de fusion hétérologue dans une cellule hôte, ladite construction de fusion codant, sous une forme exprimable, pour une molécule d'acide ribonucléique comprenant à son extrémité 5' une étiquette hétérologue consistant en environ 8 nucléotides et étant reconnue par une protéine Cas5, (b) l'introduction d'une ou plusieurs molécules d'acide nucléique dans ladite cellule hôte, ladite ou lesdites molécules d'acide nucléique codant, sous une forme exprimable, pour une protéine Cas5 et une protéine Cas7, et (c) la culture de la cellule hôte obtenue à l'étape (a) et à l'étape (b) dans des conditions dans lesquelles la Cas5 exprimée se lie à l'étiquette et la Cas7 exprimée encapsule la molécule d'acide ribonucléique ; ou (a') l'introduction d'une construction de fusion hétérologue dans une cellule hôte, ladite construction de fusion codant, sous une forme exprimable, pour une molécule d'acide ribonucléique comprenant à son extrémité 5' une étiquette hétérologue consistant en environ 8 nucléotides et étant reconnue par une protéine Cas5, ladite cellule hôte comprenant une ou plusieurs molécules d'acide nucléique, ladite ou lesdites molécules d'acide nucléique codant, sous une forme exprimable, pour une protéine Cas5 et une protéine Cas7, et (b') la culture de la cellule hôte obtenue à l'étape (a') dans des conditions dans lesquelles la Cas5 exprimée se lie à l'étiquette et la Cas7 exprimée encapsule la molécule d'acide ribonucléique ; ou (a") l'introduction d'une ou plusieurs molécules d'acide nucléique dans une cellule hôte, ladite ou lesdites molécules d'acide nucléique codant, sous une forme exprimable, pour une protéine Cas5 et une protéine Cas7, ladite cellule hôte comprenant une construction de fusion hétérologue, ladite construction de fusion codant, sous une forme exprimable, une molécule d'acide ribonucléique comprenant à son extrémité 5' une étiquette hétérologue consistant en environ 8 nucléotides et étant reconnue par une protéine Cas5, et (b") la culture de la cellule hôte obtenue à l'étape (a") dans des conditions dans lesquelles la Cas5 exprimée se lie à l'étiquette et la Cas7 exprimée encapsule la molécule d'acide ribonucléique.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JO, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
African Regional Intellectual Property Organization (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Office (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
European Patent Office (EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)