说明书
发明名称 : 一种包含地佐辛类似物酯的缓释混悬液及其制备方法
[0002]
本申请主张2017年07月04日提交的中国专利申请CN201710539419.8的优先权，其内容在此并入本申请。
[0003]
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种包含式(Ⅰ)所示化合物的止痛油性缓释混悬液及其制备方法。
[0004]
式(Ⅰ)所示化合物是地佐辛类似物式(Ⅱ)所示化合物的癸二酸二酯前药，在血浆中不稳定，体内水解后可释放出活性成分式(Ⅱ)所示化合物。
[0005]
式(Ⅰ)所示化合物在水和油溶液中的溶解度都较低，属于在水中微溶，在油溶液中几乎不溶或不溶的药物。而且式(Ⅰ)所示化合物的半衰期较短，配置成水溶液在体内的清除率过快，无法达到缓释效果。
[0008]
本发明的混悬注射液制剂组成简单，制剂性能稳定，制备工艺简单，适合大规模生产研发。而且该混悬液具有粘度低，可沉降比、可重分散性以及通针性优良等优点。
[0010]
一方面，本发明提供了一种包含式(Ⅰ)所示化合物、可注射用油以及赋形剂的缓释混悬液，
[0012]
在本发明的一些方案中，上述缓释混悬液中式(Ⅰ)所示化合物的含量为5-20wt.％。
[0013]
在本发明的一些方案中，上述缓释混悬液中赋形剂的含量为0.25-2wt.％。
[0014]
在本发明的一些方案中，上述缓释混悬液中可注射用油的含量为80-95wt.％。
[0015]
在本发明的一些方案中，上述可注射用油选自：中链甘油三酸酯、大豆油、橄榄油、芝麻油、玉米油、棉籽油、肉豆蔻酸异丙酯，以及它们的混合物。
[0016]
在本发明的一些方案中，上述赋形剂选自：润湿剂和助悬剂。
[0017]
在本发明的一些方案中，上述润湿剂选自：吐温80、RH40、PEG400、泊洛沙姆188、HS-15、乙醇、丙二醇、司盘80、聚氧乙烯氢化硬脂酸酯、聚氧乙烯蓖麻油及其衍生物。
[0018]
在本发明的一些方案中，其中助悬剂选自：甲基纤维素、PVP、明胶、海藻酸钠、硬脂酸铝和三硬脂酸铝。
[0019]
另一方面，本发明提供了一种上述缓释混悬液的制备方法，其特征在于，该方法采用高度分散法。
[0020]
在本发明的一些方案中，上述高度分散法选自：微粉化法、反溶剂法、高压均质法和预混悬法。
[0021]
在本发明的一些方案中，上述制备方法得到的90％颗粒粒径≤15μm。
[0023]
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在含有下列含义。一个特定的短语或术语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文出现商品名时，旨在指代其对应的商品或其活性成分。
[0024]
本发明的中间体化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
[0025]
本发明具体实施方式的化学反应是在合适的溶剂中完成的，所述的溶剂须适合于本发明的化学变化及其所需的试剂和物料。为了获得本发明的化合物，有时需要本领域技术人员在已有实施方式的基础上对合成步骤或者反应流程进行修改或选择。
[0026]
下面会通过实施例具体描述本发明，这些实施例并不意味着对本发明的任何限制。
[0027]
本发明所使用的所有溶剂是市售的，无需进一步纯化即可使用。
[0037]
1.制剂过程所用主要仪器及参数如表1所示
[0042]
将混悬液分装于50mL的量筒中并振摇1分钟混匀，室温下静置，记录沉降前原始高度H0，同时记录静置1h、2h、3h后沉降高度H，按照公式F＝H/H0计算可沉降比。
[0045]
仪器型号：Microtrac-X100麦奇克激光粒度仪(Particle Size Distribution Analyzer,PSD)
[0046]
测试条件：取适量的待测物到样品瓶中，加入分散介质(含有0.25％卵磷脂的异构烷烃溶剂)，手动混合均匀后加入到样品池，测试样品。详细的PSD参数如下表2(湿法)所示：
[0050]
偏光显微镜(Polarized Light Microscope,PLM)
[0051]
仪器型号：Nikon LV100偏光显微镜
[0052]
测试方法：样品置于载玻片上，硅油分散后观察。目镜：10倍，物镜：20/50倍。
[0055]
高效液相检测仪(安捷伦1260配制PDA检测器)
[0056]
色谱柱：Kromasil C18(4.6×250mm,5μm)
[0058]
流动相A：0.05％的三氟乙酸的水溶液，流动相B：0.05％的三氟乙酸的乙腈溶液；柱温：35℃；流速：1mL/min；
[0059]
检测波长：215nm；样品溶液浓度：0.08mg/mL，进样量：50μL；
[0063]
[表0002]
| 0.01 |
20 |
| 30.00 |
98 |
| 40.00 |
98 |
| 40.01 |
20 |
| 60.00 |
停止 |
[0065]
取制剂样品(规格：1mL，50mg)一份，充分振摇后转移至5mL离心管，精密量取3mL乙腈-水(2:1)溶液分次冲洗制剂瓶内壁，合并冲洗液倒入离心管中；摇匀后超声20min(强度50％)，使用漩涡仪强力振摇1min(强度4)，将样品置于转速为12000rpm的离心机中，离心15min，用注射器吸取上清液至西林瓶中；精密量取1.5mL上清液置于25mL容量瓶中，加乙腈-水(2:1)稀释并定容至刻度；精密量取2mL置于25mL容量瓶中，加乙腈-水(2:1)稀释并定容至刻度，即得浓度约为0.08mg/mL的供试品溶液。
[0067]
精密称取对照品10mg，置于25mL容量瓶中，加乙腈-水(2:1)溶液溶解、稀释并定容至刻度；精密量取2mL置10mL容量瓶中，加乙腈-水(2:1)稀释并定容至刻度，即得浓度约为0.08mg/mL的对照品溶液。
[0068]
6.混悬液有关物质含量的检测试验方案：
[0070]
高效液相检测仪(安捷伦1260配制PDA检测器)
[0071]
色谱柱：Kromasil C18(4.6×250mm,5μm)；
[0073]
流动相A：0.05％的三氟乙酸的水溶液，流动相B：0.05％的三氟乙酸的乙腈溶液；柱温：35℃；流速：1mL/min；
[0074]
检测波长：215nm；样品溶液浓度：0.08mg/mL，进样量：10μL；
[0077]
[表0003]
| 时间 |
流动相B(％) |
| 0.01 |
20 |
| 10.00 |
45 |
| 40.00 |
100 |
| 50.01 |
100 |
| 50.00 |
20 |
| 60.00 |
20 |
[0078]
6.3供试品溶液和对照品溶液的制备方法同5.3、5.4供试品溶液和对照品溶液的制备方法。
[0079]
图1为实施例4所得混悬液的粒径分布图。
[0080]
图2为实施例4所得混悬液的PLM显微图。
[0081]
为了实现上述技术效果，本发明的实施方案如下：
[0083]
式(Ⅰ)所示化合物的油性混悬注射液的制备，每10mL该注射液组成如下：
[0088]
上述的注射用油为中链甘油三酸酯、大豆油、橄榄油、芝麻油、玉米油、棉籽油、肉豆蔻酸异丙酯的一种或几种。优选的为中链甘油三酸酯、大豆油。
[0089]
上述的助悬剂为硬脂酸铝、三硬脂酸铝、甲基纤维素、PVP、明胶、海藻酸钠的一种或几种。优选硬脂酸铝、三硬脂酸铝。
[0090]
上述的润湿剂为吐温80、RH40、PEG400、泊洛沙姆188、HS-15、乙醇、丙二醇、司盘80、聚氧乙烯氢化硬脂酸酯、聚氧乙烯蓖麻油中的一种或几种。优选吐温80，RH40。
[0091]
上述式(Ⅰ)所示化合物的油性混悬注射液制备方法，其可以由分散法制备，具体步骤如下：
[0092]
1.精密称取注射用油，加入助悬剂，于常温搅拌1小时，加热至120℃后搅拌3小时，关闭加热，持续搅拌至室温，备用。
[0093]
2.精密称取步骤1所得油溶液，并加入润湿剂于60℃条件下，高速搅拌(2500rpm)5分钟，精密称取处方量式(Ⅰ)所示化合物，缓慢少量加入高速搅拌的油溶液中，维持1小时即得所述混悬注射液。
[0095]
式(Ⅰ)所示化合物油性混悬注射液的制备，每1mL该注射液组成如下：
[0098]
上述式(Ⅰ)所示化合物的长效油性混悬注射液，其可以由预混法制备，具体步骤如下：
[0099]
1.取式(Ⅰ)所示化合物粉末置粉碎机内粉碎至90％颗粒粒径≤7μm；
[0100]
2.称量注射用油0.947g于2mL西林瓶，密封并灭菌；
[0101]
3.对式(Ⅰ)所示化合物进行无菌处理并微粉化，并在无菌环境下分装0.05g于2mL西林瓶；
[0102]
4.待用时将灭菌后的油注入步骤3的西林瓶中，并手动混匀即得所述混悬注射液。
[0104]
式(Ⅰ)所示化合物的油性混悬注射液，每10mL该注射液组成如下：
[0108]
上述的式(Ⅰ)所示化合物的油性混悬注射液的制备方法，其可以由高压均质法制备，具体步骤如下：
[0109]
1.取式(Ⅰ)所示化合物粉末置粉碎机内粉碎至90％颗粒粒径≤7μm；
[0110]
2.取适量的表面活性剂加入注射用油中，于60℃加热搅拌30分钟；
[0111]
3.在步骤1所得的式(Ⅰ)所示化合物粉末中加入步骤2所得油中，使用高速均质机以10000rpm转速搅拌1分钟，使完全分散成混悬液；
[0112]
4.将步骤3所得混悬液于高压均质机进行超细化，即得所述混悬注射液；
[0113]
5.将步骤4所得混悬注射液分装镀膜西林瓶，使用镀膜胶塞和铝盖密封，置于湿热灭菌器内进行终 端灭菌。
[0114]
步骤4中所述的高压均质过程，具体包括如下步骤：
[0115]
a)6000psi压力均质5个循环；
[0116]
b)3000psi压力均质5个循环；其中均质过程中管道温度控制在0至-20℃。
[0117]
本发明提供了三种制备式(Ⅰ)所示化合物油性混悬注射液的方法。由于油性混悬剂普遍存在易沉降的特点，本发明采用三种制备方法，根据混悬液的沉降性质，分别从增加混悬液的粘度、降低药物的粒径以及通过预混分装的方法增加混悬液的稳定性。三种方法制备工艺简单，辅料廉价易得，所得的制剂性能稳定，符合药典要求，能够工业化生产，应用前景十分广阔。
[0118]
下面通过实施例对本发明进行详细描述，但并不意味着对本发明任何不利限制。本文已经详细地描述了本发明，其中也公开了其具体实施例方式，对本领域的技术人员而言，在不脱离本发明精神和范围的情况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。
[0120]
1.精密称取中链甘油三酸酯50g，再加入三硬脂酸铝0.4g，于常温搅拌1小时，加热至120℃后搅拌3小时，关闭加热，持续搅拌至室温，备用。
[0121]
2.精密称取步骤1所得油溶液8.0g，RH40 0.25g，于60℃条件下，高速搅拌(2500rpm)5分钟。精密称取式(Ⅰ)所示化合物3.125g，缓慢少量加入高速搅拌的油溶液中，维持1小时即得所述混悬注射液。
[0122]
测量强光、高温、高压条件下实施例1中的混悬液稳定性情况以及有关物质的影响。结果如表5，影响因素结果显示，有关物质无明显增加，粒径分布无明显改变，可沉降比符合药典要求，稳定较好。
[0123]
表5：实施例1所得混悬液稳定性以及有关物质含量的情况
[0126]
1.称取中链甘油三酸酯50g，三硬脂酸铝0.15g，常温搅拌30分钟，油浴加热至120℃，搅拌2小时，油溶解澄清透明，放冷备用；
[0127]
2.称取式(Ⅰ)所示化合物0.5g，溶于4mL无水乙醇中，超声10秒即溶，备用；
[0128]
3.量取步骤1所得油相10mL，置于60℃水浴中，高速搅拌(2400rpm)，缓慢滴加步骤2的所得式(Ⅰ)所示化合物的乙醇溶液，敞口搅拌1小时即得所述混悬注射液；
[0130]
[表0004]
| 沉降比 |
粘度 |
粒径D90(μm) |
分散性能 |
| 0.95 |
易流动 |
13.1 |
易分散 |
[0131]
结果显示，该混悬液3小时测定沉降比大于药典要求的0.9，其粒径也符合药典中混悬剂项下粒径的相关要求。
[0134]
将式(Ⅰ)所示化合物过微粉化后，按50mg/mL分装至2mL西林瓶中。
[0136]
精密量取100mL中链甘油三酸酯，加入针用活性炭100mg，于60℃搅拌15分钟后，通过0.8μm滤膜，再通过0.22μm微孔滤膜，按1.1mL/瓶分装。
[0137]
表7:实施例3所得混悬液三个月稳定性考察数据
[0138]
[表0005]
| 条件 |
复溶 |
化合物含量(％) |
有关物质含量(％) |
粒度分布D90(μm) |
水分含量(％) |
| 常温 |
可分散混匀 |
97.12 |
2.16 |
11.32 |
3.28 |
| 60℃ |
可分散均匀 |
92.43 |
5.91 |
11.86 |
4.12 |
[0139]
由表7结果得出：在室温下放置三个月，化合物含量无明显下降且有关物质无明显增加，粉末能够在中链甘油三酸酯分散均匀且粒径D90(μm)为11.32μm，仍符合药典要求；但在60℃条件下，含量有所下降以及有关物质明显增加，但药物粉末仍可以很好分散，以上结果表明，在控制储存温度情况下，预混装制备混悬液可行性较高。
[0141]
1.取式(Ⅰ)所示化合物粉末置粉碎机内粉碎至90％颗粒粒径≤7μm；
[0142]
2.取6.7g的吐温80加入可注射用油中，于60℃加热搅拌30分钟；
[0143]
3.在步骤1所得的式(Ⅰ)所示化合物的粉末150.8g加入步骤2所得油中，使用高速均质机以10000rpm转速搅拌1分钟，使其完全分散成混悬液；
[0144]
4.将步骤3所得混悬液于高压均质机进行超细化，即得所述混悬注射液；
[0145]
步骤4中所述的高压均质过程，具体包括如下步骤：
[0146]
1)6000psi压力均质5个循环；
[0147]
2)3000psi压力均质5个循环；其中均质过程中管道温度控制在0至-20℃。
[0148]
5.将步骤4所得混悬注射液分装在镀膜西林瓶，使用镀膜胶塞和铝盖密封，置于湿热灭菌器内进行终端灭菌。
[0149]
对实施例4所得混悬液进行表征，包括粒径检测、偏光显微镜(PLM)、可沉降比、粘度、重分散性能以及通针性。实施例4所得混悬液的粒径分布图和PLM显微图如图1和图2所示。
[0151]
[表0006]
| 沉降比 |
粘度 |
粒度分布D90(μm) |
分散性能 |
通针性 |
| 1 |
易流动 |
14.1 |
易分散 |
可过27规格 |
[0152]
测量不同加速条件下实施例4所得混悬液稳定性情况以及有关物质的影响，具体见表9。实施例4混悬液2个月稳定性结果显示，三个条件下的粒径放置两个月后，无明显变化，同时通过沉降比结果可以看出混悬液的物料稳定性非常良好，同时通过有关物质的结果显示，两个月的有关物质亦无明显增加。以上结果显示实施例4中混悬液整体稳定性较好。
[0153]
表9:实施例4所得混悬液2个月稳定性考察
[0157]
每组3只雄性大鼠，通过肌肉注射给予式(Ⅰ)所示化合物。水混悬液组给药后0.25、0.50、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0、24.0和48.0小时采集全血样品。油混悬液组给药后0.25、0.50、2.0、4.0、8.0、10.0、24.0、48.0、72.0、96.0、120.0和144.0小时采集全血样品。经乙腈/甲醇沉淀蛋白后，取上清进样，采用LC-MS/MS法测定血药浓度，使用WinNonlin
TMVersion 6.3(Pharsight,Mountain View,CA)药动学软件，以非房室模型线性对数梯形法分别计算式(Ⅰ)和式(Ⅱ)所示化合物相关药代动力学参数。
[0158]
式(Ⅰ)所示化合物的大鼠药代动力学研究显示，与水混悬液相比(表10)，油混悬液通过肌注给药后(表11)可以显著降低最高血药浓度和延长药物体内半衰期，从而达到降低给药频率，减少副作用，延长药物体内作用时间的目的。
[0159]
表10:式(Ⅰ)所示化合物的水混悬液的大鼠药代动力学(肌肉注射，给药量：17.5μM/Kg)
[0161]
注：ND表示不确定(由于血药浓度低于检测限，不能确定末端消除相，该参数不确定)。
[0162]
表11:式(Ⅰ)所示化合物的油混悬液的大鼠药代动力学(肌肉注射，给药量：51.4μM/Kg)
[0164]
注：ND表示不确定(由于血药浓度低于检测限，不能确定末端消除相，该参数不确定)。
[0165]
以上对式(Ⅰ)所示化合物长效油性混悬注射液及其制备方法进行了详细介绍，所述的实施例只是为了能够更清楚的理解本发明的技术内容，而不应当视为是对本发明的限制，本领域的技术人员根据本发明做出的非本质的改进和调整均属于本发明范围。
权利要求书
[权利要求 1]
一种包含式(Ⅰ)所示化合物、可注射用油以及赋形剂的缓释混悬液，
[权利要求 2]
根据权利要求1所述的缓释混悬液，其中式(Ⅰ)所示化合物的含量为5-20wt.％。
[权利要求 3]
根据权利要求1所述的缓释混悬液，其中赋形剂的含量为0.25-2wt.％。
[权利要求 4]
根据权利要求1所述的缓释混悬液，其中可注射用油的含量为80-95wt.％。
[权利要求 5]
根据权利要求1所述的缓释混悬液，其中可注射用油选自：中链甘油三酸酯、大豆油、橄榄油、芝麻油、玉米油、棉籽油、肉豆蔻酸异丙酯，以及它们的混合物。
[权利要求 6]
根据权利要求1所述的缓释混悬液，其中赋形剂选自：润湿剂和助悬剂。
[权利要求 7]
根据权利要求6所述的缓释混悬液，其中润湿剂选自：吐温80、RH40、PEG400、泊洛沙姆188、HS-15、乙醇、丙二醇、司盘80、聚氧乙烯氢化硬脂酸酯、聚氧乙烯蓖麻油及其衍生物。
[权利要求 8]
根据权利要求6所述的缓释混悬剂，其中助悬剂选自：甲基纤维素、PVP、明胶、海藻酸钠、硬脂酸铝和三硬脂酸铝。
[权利要求 9]
一种如权利要求1所述的缓释混悬液的制备方法，其特征在于，该方法采用高度分散法。
[权利要求 10]
根据权利要求9所述的制备方法，其中所述高度分散法选自：微粉化法、反溶剂法、高压均质法和预混悬法。
[权利要求 11]
根据权利要求9或10所述的制备方法，其特征在于，该方法得到的90％颗粒粒径≤15μm。
附图
