Some content of this application is unavailable at the moment.
If this situation persist, please contact us atFeedback&Contact
1. (WO2018227918) RT-QPCR METHOD FOR DIRECT QUANTITATIVE DETECTION OF CIRCULATING MIRNA
Latest bibliographic data on file with the International Bureau    Submit observation

Pub. No.: WO/2018/227918 International Application No.: PCT/CN2017/117558
Publication Date: 20.12.2018 International Filing Date: 20.12.2017
IPC:
C12Q 1/68 (2018.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
Q
MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES OR MICRO-ORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
1
Measuring or testing processes involving enzymes or micro-organisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
68
involving nucleic acids
Applicants:
深圳大学 SHENZHEN UNIVERSITY [CN/CN]; 中国广东省深圳市 南山区南海大道3688号粤海门广场A207 A207, Yue Hai Men Square, Nanhai Ave 3688, Nanshan Shenzhen, Guangdong 518060, CN
Inventors:
苟德明 GOU, Deming; CN
牛燕琴 NIU, Yanqin; CN
康康 KANG, Kang; CN
Agent:
广州番禺容大专利代理事务所(普通合伙) GUANGZHOU PANYU RONDA PATENT AGENCY; 中国广东省广州市 越秀区东风中路300号之一金安大厦14楼B室 Room B, Floor 14, JinAn Building, No. 300, Dong Feng Zhong Road, Yuexiu District Guangzhou, Guangdong 510030, CN
Priority Data:
201710442989.513.06.2017CN
Title (EN) RT-QPCR METHOD FOR DIRECT QUANTITATIVE DETECTION OF CIRCULATING MIRNA
(FR) PROCÉDÉ DE RT-QPCR DESTINÉ À LA DÉTECTION QUANTITATIVE DIRECTE DE MIARN CIRCULANTS
(ZH) 一种直接定量检测循环miRNA的RT-qPCR方法
Abstract:
(EN) A real-time fluorescence quantitative RT-qPCR method for direct detection of circulating miRNAs in serum or plasma without the need of extracting nucleic acids. Said method comprises: S1, subjecting cleavages of exosomes and miRNA-protein complexes in serum or plasma, and performing centrifugation to obtain a crude circulating miRNA extract; S2, performing miRNA tailing and reverse transcription; and S3, performing RT-qPCR quantitative detection. Said method does not required nucleic acids to be extracted, and Poly(A) tailing and reverse transcription of miRNA will be synchronously accomplished in one reaction system. The operation is simple, the time is shortened, and the preparation of cDNAs is completed within 95 minutes. Compared with the stem-loop method, said method provides a sensitivity increased by several tens or even hundreds of times, establishes a very simple, sensitive, efficient, fast and inexpensive miRNA detection technology system, and is especially suitable for clinical application and for the detection of miRNAs from biological fluid samples having low miRNA abundance.
(FR) La présente invention concerne un procédé de RT-qPCR quantitative par fluorescence en temps réel destiné à la détection directe de miARN circulants dans du sérum ou du plasma sans nécessiter l'extraction d'acides nucléiques. Ledit procédé consiste : S1, à soumettre des clivages des exosomes et des complexes de protéine miARN dans du sérum ou du plasma, et à effectuer une centrifugation pour obtenir un extrait de miARN circulant brut ; S2, à effectuer une extension et une transcription inverse de miARN ; et S3, à effectuer une détection quantitative par RT-qPCR. Ledit procédé ne nécessite pas l'extraction d'acides nucléiques, et l'extension Poly(A) et la transcription inverse de miARN seront réalisées de manière synchrone dans un système de réaction. La mise en œuvre est simple, le temps est raccourci, et la préparation d'ADNc est achevée en 95 minutes. Par rapport au procédé de tige-boucle, ledit procédé permet d'obtenir une sensibilité augmentée de plusieurs dizaines voire de plusieurs centaines de fois, établit un système de technologie de la détection de miARN très simple, sensible, efficace, rapide et peu coûteux, et est particulièrement adapté à une application clinique et à la détection des miARN à partir d'échantillons de fluide biologique ayant une faible abondance de miARN.
(ZH) 一种不需提取核酸,直接检测血清或血浆中循环miRNA的实时荧光定量RT-qPCR方法。所述方法包括:S1:裂解血清或血浆中的外泌体及miRNA蛋白复合体,离心后得到循环miRNA粗提物;S2:miRNA加尾及逆转录;S3:RT-qPCR定量检测。该方法不需要提取核酸,且miRNA的Poly(A)加尾和逆转录将在一个反应体系中同步完成,操作简便,缩短时间,可在95分钟内完成cDNA的制备。该方法灵敏度与stem-loop方法相比提高数十甚至上百倍,建立了一种非常简便、灵敏、高效、快捷、廉价的miRNA检测的技术体系,尤其适合于临床应用推广及其从miRNA丰度较低的生物体液样本中检测miRNA。
front page image
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JO, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
African Regional Intellectual Property Organization (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Office (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
European Patent Office (EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Publication Language: Chinese (ZH)
Filing Language: Chinese (ZH)