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1. (WO2018227665) METHODS FOR EXTRACTING AND PURIFYING NOSTOC SPHAEROIDES KUTZING PHYCOBILIPROTEIN, AND PURIFIED PHYCOCYANIN
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Pub. No.: WO/2018/227665 International Application No.: PCT/CN2017/090811
Publication Date: 20.12.2018 International Filing Date: 29.06.2017
IPC:
C07K 14/795 (2006.01) ,C07K 1/18 (2006.01) ,C07K 1/34 (2006.01) ,C07K 1/14 (2006.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
07
ORGANIC CHEMISTRY
K
PEPTIDES
14
Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
795
Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
C CHEMISTRY; METALLURGY
07
ORGANIC CHEMISTRY
K
PEPTIDES
1
General processes for the preparation of peptides
14
Extraction; Separation; Purification
16
by chromatography
18
Ion-exchange chromatography
C CHEMISTRY; METALLURGY
07
ORGANIC CHEMISTRY
K
PEPTIDES
1
General processes for the preparation of peptides
14
Extraction; Separation; Purification
34
by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis
C CHEMISTRY; METALLURGY
07
ORGANIC CHEMISTRY
K
PEPTIDES
1
General processes for the preparation of peptides
14
Extraction; Separation; Purification
Applicants:
湖南炎帝生物工程有限公司 HUNAN YANDI BIOENGINEERING CO., LTD. [CN/CN]; 中国湖南省株洲市 国家高新技术开发区(天元区)明日路8号 No.8, Mingri Road, National Hi-tech Development Zone (Tianyuan District) Zhuzhou, Hunan 412007, CN
Inventors:
余佳 YU, Jia; CN
张瑞华 ZHANG, Ruihua; CN
王玉兰 WANG, Yulan; CN
占豪 ZHAN, Hao; CN
陈盛 CHEN, Sheng; CN
王维 WANG, Wei; CN
Agent:
上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) MSJ LAW OFFICE; 中国上海市 普陀区中山北路3663号358幢301B室董红曼 Maggie Don Room 301B, Building 358, No.3663, North Zhongshan Road, Putuo District Shanghai 200062, CN
Priority Data:
201710447907.614.06.2017CN
Title (EN) METHODS FOR EXTRACTING AND PURIFYING NOSTOC SPHAEROIDES KUTZING PHYCOBILIPROTEIN, AND PURIFIED PHYCOCYANIN
(FR) PROCÉDÉS D'EXTRACTION ET DE PURIFICATION DE LA PHYCOBILIPROTÉINE DE NOSTOC SPHAEROIDES KUTZING ET PHYCOCYANINE PURIFIÉE
(ZH) 一种葛仙米藻胆蛋白的提取、纯化方法及纯化的藻蓝蛋白
Abstract:
(EN) Provided is a method for purifying a Nostoc sphaeroides Kutzing phycocyanin, the method comprising the following steps: (1) selecting an anion exchange column for being passed through ; (2) formulating a Tris-HCl buffer solution, i.e., buffer A, and a Tris-HCl-NaCl buffer solution, i.e., buffer B; (3) dissolving a coarsely extracted Nostoc sphaeroides Kutzing phycobiliprotein powder with buffer A, and subjecting same to centrifugation and filtration; (4) washing a pump, and balancing the ion exchange column with the buffer A buffer solution; (5) directly loading the Nostoc sphaeroides Kutzing phycobiliprotein dissolved in buffer A and prepared in step (3), carrying out gradient elution with buffer B, and collecting an eluent; (6) cleaning the ion exchange column with a salt solution, and then reversely rinsing same with a base solution; and (7) subjecting the eluent to ultrafiltration concentration and dialysis to obtain a purified Nostoc sphaeroides Kutzing phycocyanin aqueous solution.
(FR) La présente invention concerne un procédé pour la purification d'une phycocyanine de Nostoc sphaeroides Kutzing, le procédé comprenant les étapes suivantes consistant à : (1) sélectionner une colonne échangeuse d'anions pour la faire passer à travers ; (2) formuler une solution tampon Tris-HCl, c'est-à-dire le tampon A, et une solution tampon Tris-NaCl, c'est-à-dire, le tampon B ; (3) dissoudre une poudre de phycobiliprotéine de Nostoc sphaeroides Kützing grossièrement extraite avec le tampon A, et la soumettre à une centrifugation et à une filtration ; (4) laver une pompe et équilibrer la colonne échangeuse d'ions avec le tampon A ; (5) charger directement la phycobiliprotéine de Nostoc sphaeroides Kützing dissoute dans le tampon A et préparée à l'étape (3), réaliser une élution par gradient avec le tampon B et collecter un éluant ; (6) nettoyer la colonne échangeuse d'ions avec une solution saline, puis effectuer un rinçage inverse de celle-ci avec une solution de base ; et (7) soumettre l'éluant à une concentration par ultrafiltration et à une dialyse pour obtenir une solution aqueuse de phycocyanine de Nostoc sphaeroides Kützing purifiée.
(ZH) 提供了一种葛仙米藻蓝蛋白的纯化方法,包括以下步骤:(1)选用阴离子交换柱过柱;(2)配置Tris-HCl缓冲液Buffer A、Tris-HCl-NaCl缓冲液Buffer B;(3)葛仙米藻胆蛋白粗提粉末用Buffer A溶解,离心,过滤;(4)洗泵,用Buffer A缓冲液平衡离子交换柱;(5)将步骤(3)制备的溶解于Buffer A中的葛仙米藻胆蛋白直接上样,Buffer B梯度洗脱,收集洗脱液;(6)用盐溶液清洗离子交换柱,然后用碱溶液反向冲洗;(7)对淋洗液进行超滤浓缩,透析,得到纯化的葛仙米藻蓝蛋白水溶液。
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Publication Language: Chinese (ZH)
Filing Language: Chinese (ZH)