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1. (WO2018140647) IN VITRO INDUCTION OF MAMMARY-LIKE DIFFERENTIATION FROM HUMAN PLURIPOTENT STEM CELLS
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Pub. No.: WO/2018/140647 International Application No.: PCT/US2018/015318
Publication Date: 02.08.2018 International Filing Date: 25.01.2018
IPC:
A61K 35/12 (2015.01) ,A61K 48/00 (2006.01) ,C12N 5/00 (2006.01) ,C12N 5/10 (2006.01) ,G01N 33/50 (2006.01)
[IPC code unknown for A61K 35/12][IPC code unknown for A61K 48][IPC code unknown for C12N 5][IPC code unknown for C12N 5/10][IPC code unknown for G01N 33/50]
Applicants:
CEDARS-SINAI MEDICAL CENTER [US/US]; 8700 Beverly Blvd. Los Angeles, California 90048, US
Inventors:
QU, Ying; US
CUI, Xiaojiang; US
SAREEN, Dhruv; US
GIULIANO, Armando E.; US
Agent:
CHEN, Stephen W.; US
BIRKENEDER, Erik J.; US
COSTELLIA, Jeffrey L.; US
EISENSTEIN, Ronald I.; US
GARETTO, Janet M.; US
GATZ, John C.; US
HAYES, Jennifer; US
HUBER, Linda B.; US
KIM, TaeSoo Sean; US
LEVY, Seth D.; US
MATTAN-HUNG, Natalia; US
PROMMER, Peter J.; US
RESNICK, David S.; US
SWIATEK, Maria S.; US
TANG, Wayne L.; US
ZHU, Samantha; US
Priority Data:
62/450,48425.01.2017US
Title (EN) IN VITRO INDUCTION OF MAMMARY-LIKE DIFFERENTIATION FROM HUMAN PLURIPOTENT STEM CELLS
(FR) INDUCTION IN VITRO DE DIFFÉRENCIATION DE TYPE MAMMAIRE À PARTIR DE CELLULES SOUCHES PLURIPOTENTES HUMAINES
Abstract:
(EN) Human induced pluripotent stem cells (iPSCs) can give rise to multiple cell types and hold great promise in regenerative medicine and disease modeling applications. The Inventors herein developed a reliable two-step protocol to generate human mammary-like organoids from iPSCs. Non-neural ectoderm cell-containing spheres, referred to as mEBs, were first differentiated and enriched from iPSCs using MammoCult medium. Gene expression profile analysis suggested that mammary gland function-associated signaling pathways were hallmarks of 10-d differentiated mEBs. The Inventors generated mammary-like organoids from 10-d mEBs using 3D floating mixed gel culture and a three-stage differentiation procedure. These organoids expressed common breast tissue, luminal, and basal markers, including estrogen receptor, and could be induced to produce milk protein. These results demonstrate that human iPSCs can be directed in vitro toward mammary lineage differentiation.
(FR) L'invention est motivée par le fait que les cellules souches pluripotentes induites humaines (iPSC) peuvent conduire à des types de cellule multiples et être très prometteuses dans des applications de médecine régénérative et de modélisation de maladie. Les inventeurs ont développé un protocole à deux étapes fiable pour générer des organoïdes de type mammaire à partir d'iPSC. Des sphères contenant des cellules d'ectoderme non neuronal, appelées mEB, ont été initialement différenciées et enrichies à partir d'iPSC au moyen d'un milieu MammoCult. L'analyse de profil d'expression génique suggère que les voies de signalisation associées à une fonction de glande mammaire sont des caractéristiques de mEB différenciés à 10 j. Les inventeurs ont généré des organoïdes de type mammaire à partir de mEB 10 j au moyen d'une culture de gel mixte flottante 3D et d'une procédure de différenciation en trois étapes. Ces organoïdes expriment un tissu mammaire commun, des marqueurs luminaux et basaux, comprenant le récepteur d'œstrogène, et peuvent être induits pour produire une protéine de lait. Ces résultats démontrent que les iPSC humaines peuvent être dirigées in vitro vers la différenciation de lignage mammaire.
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Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)