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1. WO2018135027 - METHOD FOR PRODUCING HEPAROSAN COMPOUND HAVING ISOMERIZED HEXULONIC ACID RESIDUE

Publication Number WO/2018/135027
Publication Date 26.07.2018
International Application No. PCT/JP2017/030998
International Filing Date 29.08.2017
IPC
C12P 19/26 2006.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
19Preparation of compounds containing saccharide radicals
26Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
C12N 9/90 2006.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes, e.g. ligases (6.); Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating, or purifying enzymes
90Isomerases (5.)
C12N 15/09 2006.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
CPC
C08B 37/0075
CCHEMISTRY; METALLURGY
08ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
BPOLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
37Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
006Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
0063Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
0075Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
C12N 15/09
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
C12N 9/90
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
9Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof
90Isomerases (5.)
C12P 19/26
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
19Preparation of compounds containing saccharide radicals
26Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
C12Y 501/03017
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
YENZYMES
501Racemaces and epimerases (5.1)
03acting on carbohydrates and derivatives (5.1.3)
03017Heparosan-N-sulfate-glucuronate 5-epimerase (5.1.3.17)
Applicants
  • 味の素株式会社 AJINOMOTO CO., INC. [JP]/[JP]
Inventors
  • 辻 ちひろ TSUJI, Chihiro
  • 三原 康博 MIHARA, Yasuhiro
  • 中野 祥吾 NAKANO, Shogo
  • 本山 智晴 MOTOYAMA, Tomoharu
  • 伊藤 創平 ITO, Souhei
Agents
  • 特許業務法人酒井国際特許事務所 SAKAI INTERNATIONAL PATENT OFFICE
Priority Data
2017-00790019.01.2017JP
Publication Language Japanese (JA)
Filing Language Japanese (JA)
Designated States
Title
(EN) METHOD FOR PRODUCING HEPAROSAN COMPOUND HAVING ISOMERIZED HEXULONIC ACID RESIDUE
(FR) PROCÉDÉ DE PRODUCTION D'UN COMPOSÉ D'HÉPAROSANE COMPRENANT UN RÉSIDU D'ACIDE HEXULONIQUE ISOMÉRISÉ
(JA) ヘキスロン酸残基が異性化されたヘパロサン化合物の製造方法
Abstract
(EN)
The present invention provides: a method for producing a heparosan compound having an isomerized hexulonic acid residue, which has improved C5-epimerization efficiency; and a method for producing heparan sulfate. More specifically, the present invention provides a method for producing a heparosan compound having an isomerized hexulonic acid residue, said method comprising producing the heparosan compound having an isomerized hexulonic acid residue from a heparosan compound in the presence of a protein selected from the group consisting of the following proteins (A) to (F): (A) a protein which contains the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 2; (B) a protein which contains an amino acid sequence having a 90% or higher homology with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 2 and has a D-glucuronyl C5-epimerase activity; (C) a protein which contains an amino acid sequence having the deletion, substitution, addition or insertion of one or several amino acid residues in the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 2 and has a D-glucuronyl C5-epimerase activity; (D) a protein which contains the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5; (E) a protein which contains an amino acid sequence having a 90% or higher homology with the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 and has a D-glucuronyl C5-epimerase activity; and (F) a protein which contains an amino acid sequence having the deletion, substitution, addition or insertion of one or several amino acid residues in the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5 and has a D-glucuronyl C5-epimerase activity.
(FR)
La présente invention concerne : un procédé de production d'un composé d'héparosane comprenant un résidu d'acide hexulonique isomérisé, qui présente une efficacité d'épimérisation en C5 améliorée; et un procédé de production de sulfate d'héparane. Plus particulièrement, la présente invention concerne un procédé de production d'un composé d'héparosane comprenant un résidu d'acide hexulonique isomérisé, ledit procédé comprenant la production du composé d'héparosane comprenant un résidu d'acide hexulonique isomérisé à partir d'un composé d'héparosane en présence d'une protéine sélectionnée dans le groupe constitué par les protéines (A) à (F) suivantes : (A) une protéine qui contient la séquence d'acides aminés représentée par la SEQ ID NO : 2; (B) une protéine qui contient une séquence d'acides aminés ayant une homologie supérieure ou égale à 90 % avec la séquence d'acides aminés représentée par la SEQ ID NO : 2 et qui possède une activité de D-glucuronyl C5-épimérase; (C) une protéine qui contient une séquence d'acides aminés présentant la délétion, la substitution, l'addition ou l'insertion d'un ou de plusieurs résidus d'acides aminés dans la séquence d'acides aminés représentée par la SEQ ID NO : 2 et qui possède une activité de D-glucuronyl C5-épimérase; (D) une protéine qui contient la séquence d'acides aminés représentée par la SEQ ID NO : 5; (E) une protéine qui contient une séquence d'acides aminés ayant une homologie supérieure ou égale à 90 % avec la séquence d'acides aminés représentée par la SEQ ID NO : 5 et qui possède une activité de D-glucuronyl C5-épimérase; et (F) une protéine qui contient une séquence d'acides aminés présentant la délétion, la substitution, l'addition ou l'insertion d'un ou de plusieurs résidus d'acides aminés dans la séquence d'acides aminés représentée par la SEQ ID NO : 5 et qui possède une activité de D-glucuronyl C5-épimérase.
(JA)
本発明は、C5-エピメリ化効率が向上した、ヘキスロン酸残基が異性化されたヘパロサン化合物の製造方法、およびヘパラン硫酸の製造方法を提供する。具体的には、本発明は、以下(A)~(F)からなる群より選ばれるタンパク質の存在下において、ヘパロサン化合物からヘキスロン酸残基が異性化されたヘパロサン化合物を生成することを含む、ヘキスロン酸残基が異性化されたヘパロサン化合物の製造方法を提供する: (A)配列番号2のアミノ酸配列を含むタンパク質; (B)配列番号2のアミノ酸配列と90%以上の相同性を有するアミノ酸配列を含み、かつD-グルクロニル C5-エピメラーゼ活性を有するタンパク質; (C)配列番号2のアミノ酸配列において1個または数個のアミノ酸残基が欠失、置換、付加または挿入されているアミノ酸配列を含み、かつD-グルクロニル C5-エピメラーゼ活性を有するタンパク質; (D)配列番号5のアミノ酸配列を含むタンパク質; (E)配列番号5のアミノ酸配列と90%以上の相同性を有するアミノ酸配列を含み、かつD-グルクロニル C5-エピメラーゼ活性を有するタンパク質;および (F)配列番号5のアミノ酸配列において1個または数個のアミノ酸残基が欠失、置換、付加または挿入されているアミノ酸配列を含み、かつD-グルクロニル C5-エピメラーゼ活性を有するタンパク質。
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